NF-κB/miR-223-3p/ARID1A通路在幽门螺杆菌感染介导的胃癌发生发展中的作用

发布时间：2021-04-09 23:04

　　研究背景幽门螺杆菌感染易引起慢性胃炎和消化性溃疡,被认为是导致胃癌发生的Ⅰ类致病菌。幽门螺杆菌的致病性主要归因于它的各种毒力因子,其中最广泛研究的是细胞毒素相关基因蛋白CagA。CagA可被细菌编码的Ⅳ型分泌系统注射入细胞内,在细胞中激活多种信号分子,其中包括炎症因子NF-κB。NF-κB被激活后,可在细胞中发挥多种生物学效应,如炎性,细胞永生化,细胞增殖,抗凋亡,血管新生,肿瘤转移等。NF-κB发挥生物学功能的分子机制之一是:NF-κB可引起细胞中的关键miRNAs表达失调,这些miRNAs的失调又可引起下游靶蛋白的异常表达,进而引起以上生物学效应,促进肿瘤发生发展。幽门螺杆菌毒力因子CagA在胃黏膜上皮细胞激活NF-κB后,NF-κB通过调控哪些miRNAs的表达来促进胃癌发生发展的,目前尚未见报道。我们通过文献检索发现:幽门螺杆菌感染胃黏膜上皮细胞后,通过miRNAs芯片筛选到31种差异性表达的miRNAs,其中miR-223-3p是唯一一种表达上调的miRNA。软件分析发现:miR-223-3p启动子区存在NF-κB的结合位点。基于以上研究成果和分析,本研究拟探讨以下问题:NF... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３?ｍｉＲ－２２３－３ｐ促进胃癌细胞增殖和迁移??

图４?ｍｉＲ－２２３－３ｐ直接靶向ＡＲＩＤＩＡ?３’ＵＴＲ并下调其表达???Ｂ?胃癌细胞?ＢＧＣ－８２３?和?ＳＧＣ－７９０１?转染?ｍｉＲ－２２３－３ｐ?ｍｉｍｉｃｓ，?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂ和ｑＲＴ－ＰＣＲ分别检测ＡＲＩＤＩＡ蛋白（Ａ）和ｍＲＮＡ?（Ｂ）表达水平???Ｄ?胃癌细胞?ＢＧＣ－８２３?和?ＳＧＣ－７９０１?转染?ｍｉＲ－２２３－３ｐ?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，?ｗｅｓｔｅｒｎ和ｑＲＴ－ＰＣＲ分别检测ＡＲＩＤＩＡ蛋白（Ｃ）和ｍＲＮＡ?（Ｄ）表达水平??构建ｐＭＩＲ－ＡＲＩＤｌＡ３＇ＵＴＲ荧光素酶报告基因载体示意图（ＷＴ表示野生Ｍｕｔ表示突变型）??－２）胃癌细胞ＢＧＣ－８２３和ＳＧＣ－７９０１共转染ｍｉＲ－２２３－３ｐ?ｍｉｍｉｃｓ和野生型变型ｐＭＩＲ－ＡＲＩＤＩＡ?３＇ＵＴＲ质粒，４８ｈ后进行荧光素酶活性检测??

图５?ｍｉＲ－２２３－３ｐ通过ＡＲＩＤ１Ａ促进胃癌细胞增殖和迁移??Ａ胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１转染ＡＲＩＤ１Ａ?ｓｉＲＮＡ或ＡＲＩＤ１Ａ过表达质粒??（ｐｃＤＮＡ６．０－ＡＲＩＤｌＡ）?，?ＥｄＵ检测细胞增殖能力??Ｂ统计学分析ＥｄＵ阳性细胞数??Ｃ胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１转染ＡＲＩＤ１Ａ?ｓｉＲＮＡ或ＡＲＩＤ１Ａ过表达质粒??（ｐｃＤＮＡ６．０－ＡＲＩＤｌＡ），Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?检测细胞迀移能力??Ｄ统计学分析Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ穿膜细胞数??Ｅ胃癌细胞ＢＧＣ－８２３和ＳＧＣ－７９０１转染ＡＲＩＤ１Ａ?ｓｉＲＮＡ或ＡＲＩＤ１Ａ过表达质粒，??ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?检测?ＡＲＩＤ?１Ａ、ｐ２１、Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?表达水平??Ｆ胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１共转染ＡＲＩＤ１Ａ过表达质粒（ｐｃＤＮＡ６．０－ＡＲＩＤｌＡ）和??ｍｉＲ－２２３－３ｐ?ｍｉｍｉｃｓ，ＥｄＵ检测细胞增殖能力??Ｇ统计学分析ＥｄＵ阳性细胞数??


本文编号：3128467