MicroRNA-19a通过PTEN/AKT/pAKT信号通路调控骨髓瘤细胞凋亡侵袭机制研究
发布时间：2021-04-18 21:09
目的:1.探讨miR-17-92家族成员之一—miR-19a在人多发性骨髓瘤（Multiple myeloma,MM）细胞株LP-1和U266中的表达情况。2.研究miR-19a对多发性骨髓瘤细胞株LP-1和U266的增殖、侵袭、凋亡等生物学行为的影响。3.探讨miR-19a在多发性骨髓瘤细胞中负向调控PTEN的机制及对PTEN/AKT/p AKT相关通路蛋白的调控作用。方法:1.RT-PCR检测多发性骨髓瘤细胞株LP-1和U266中miR-19a的表达情况;2.CCK8检测miR19a对多发性骨髓瘤细胞株LP-1和U266增殖的影响;3.Transwell方法测miR-19a对多发性骨髓瘤细胞株LP-1和U266侵袭影响;4.采用Anexin V-FITC/PI流式细胞仪检测miR-19a对多发性骨髓瘤细胞株LP-1和U266凋亡的影响;5.RT-PCR检测miR-19a对多发性骨髓瘤细胞株LP-1和U266凋亡、耐药相关关键调控基因bcl-2和mdr-1的影响;6.Western检测miR-19a对多发性骨髓瘤细胞株LP-1和U266凋亡、耐药相关关键调控蛋白BCL-2和MDR-1...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨髓瘤Lp-1和U266细胞中miR-19a的表达情况及转染效率
图 2 骨髓瘤 Lp-1 和 U266 细胞中 miR-19a 的表达情况及转染效率1.3.2 miR-19a 促进多发性骨髓瘤细胞株 LP-1 和 U266 的增殖LP-1 和 U266 骨髓瘤细胞转染 miR-19a 0、24、48、72h 后，经 CCK-8 实验测取 OD 值以反应细胞增值率，结果显示 miR-19a 促进多发性骨髓瘤细胞株 LP-1（p=0.0363）和 U266（p=0.0482）的增殖（图 3）。
图 4 转染 miR-19a 对骨髓瘤 Lp-1 和 U266 细胞侵袭的影响1.3.4 miR-19a 抑制多发性骨髓瘤细胞株 LP-1 和 U266 的凋亡hsa-miR-19a mimic 和 hsa-miR-19a mimic NC 处理 Lp-1 和 U266 细胞 48h 后，用 anexinV FITC/PI 检测细胞凋亡。结果显示 hsa-miR-19a mimic 处理后两组细胞凋亡率明显低于 hsa-miR-19a mimic NC (Lp-1: 凋亡率 14.9±0.7% vs 25.6±1.2%，P＜0.05；U266: 31.3±1.7% vs 41.2±2.3%，P＜0.05）（图 5、6）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA: a new and promising potential biomarker for diagnosis and prognosis of ovarian cancer[J]. Manish K.Pal,Shyam P.Jaiswar,Vinaya N.Dwivedi,Amit K.Tripathi,Ashish Dwivedi,Pushplata Sankhwar. Cancer Biology & Medicine. 2015(04)
[2]MiR-19a promotes epithelial-mesenchymal transition through PI3K/AKT pathway in gastric cancer[J]. Wei-Dong Lu,Yun Zuo,Zhen Xu,Min Zhang. World Journal of Gastroenterology. 2015(15)
[3]循环血清miR-17-92簇:一种新的胃癌诊断标志物[J]. 李红,李铤,刘常浩,薛琳,时永全,丁杰. 现代肿瘤医学. 2014(03)
[4]Targeting the PI3K-AKT-mTOR signaling network in cancer[J]. Khurum H. Khan,Timothy A. Yap,Li Yan,David Cunningham. Chinese Journal of Cancer. 2013(05)
[5]尾静脉注射及皮下接种方法建立小鼠高表达miR-17-92的L1210白血病模型的比较研究[J]. 田晓琳,许亚梅,王珍珍,赖宗浪,张雅月,林英,张冬梅,孙波,赵勇. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(08)
[6]miR-17～92基因簇在宫颈癌、子宫内膜癌与卵巢癌多种细胞系中的表达及意义[J]. 接智慧,吴建磊,陶陶,史春雪,王敏. 中国医科大学学报. 2013(03)
[7]miR-17-92对急性白血病L1210/DDP细胞多药耐药性影响研究[J]. 石凤芹,许亚梅,饶恩于,张雅月,马薇,赵勇,陈信义. 现代生物医学进展. 2013(08)
[8]Let-7维持乳腺癌干细胞的特性及机制的研究[J]. 孙欣,樊翀,胡丽娟,杜宁,许崇文,任宏. 细胞与分子免疫学杂志. 2012(08)
[9]miR-17-92基因簇与肿瘤[J]. 杨瑞芳,陈丽娟,李建勇. 中国实验血液学杂志. 2010(05)
本文编号：3146175
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
骨髓瘤Lp-1和U266细胞中miR-19a的表达情况及转染效率
图 2 骨髓瘤 Lp-1 和 U266 细胞中 miR-19a 的表达情况及转染效率1.3.2 miR-19a 促进多发性骨髓瘤细胞株 LP-1 和 U266 的增殖LP-1 和 U266 骨髓瘤细胞转染 miR-19a 0、24、48、72h 后，经 CCK-8 实验测取 OD 值以反应细胞增值率，结果显示 miR-19a 促进多发性骨髓瘤细胞株 LP-1（p=0.0363）和 U266（p=0.0482）的增殖（图 3）。
图 4 转染 miR-19a 对骨髓瘤 Lp-1 和 U266 细胞侵袭的影响1.3.4 miR-19a 抑制多发性骨髓瘤细胞株 LP-1 和 U266 的凋亡hsa-miR-19a mimic 和 hsa-miR-19a mimic NC 处理 Lp-1 和 U266 细胞 48h 后，用 anexinV FITC/PI 检测细胞凋亡。结果显示 hsa-miR-19a mimic 处理后两组细胞凋亡率明显低于 hsa-miR-19a mimic NC (Lp-1: 凋亡率 14.9±0.7% vs 25.6±1.2%，P＜0.05；U266: 31.3±1.7% vs 41.2±2.3%，P＜0.05）（图 5、6）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA: a new and promising potential biomarker for diagnosis and prognosis of ovarian cancer[J]. Manish K.Pal,Shyam P.Jaiswar,Vinaya N.Dwivedi,Amit K.Tripathi,Ashish Dwivedi,Pushplata Sankhwar. Cancer Biology & Medicine. 2015(04)
[2]MiR-19a promotes epithelial-mesenchymal transition through PI3K/AKT pathway in gastric cancer[J]. Wei-Dong Lu,Yun Zuo,Zhen Xu,Min Zhang. World Journal of Gastroenterology. 2015(15)
[3]循环血清miR-17-92簇:一种新的胃癌诊断标志物[J]. 李红,李铤,刘常浩,薛琳,时永全,丁杰. 现代肿瘤医学. 2014(03)
[4]Targeting the PI3K-AKT-mTOR signaling network in cancer[J]. Khurum H. Khan,Timothy A. Yap,Li Yan,David Cunningham. Chinese Journal of Cancer. 2013(05)
[5]尾静脉注射及皮下接种方法建立小鼠高表达miR-17-92的L1210白血病模型的比较研究[J]. 田晓琳,许亚梅,王珍珍,赖宗浪,张雅月,林英,张冬梅,孙波,赵勇. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(08)
[6]miR-17～92基因簇在宫颈癌、子宫内膜癌与卵巢癌多种细胞系中的表达及意义[J]. 接智慧,吴建磊,陶陶,史春雪,王敏. 中国医科大学学报. 2013(03)
[7]miR-17-92对急性白血病L1210/DDP细胞多药耐药性影响研究[J]. 石凤芹,许亚梅,饶恩于,张雅月,马薇,赵勇,陈信义. 现代生物医学进展. 2013(08)
[8]Let-7维持乳腺癌干细胞的特性及机制的研究[J]. 孙欣,樊翀,胡丽娟,杜宁,许崇文,任宏. 细胞与分子免疫学杂志. 2012(08)
[9]miR-17-92基因簇与肿瘤[J]. 杨瑞芳,陈丽娟,李建勇. 中国实验血液学杂志. 2010(05)
本文编号：3146175
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3146175.html
