脂肪酸通过刺激骨髓脂肪细胞分泌CCL2促进前列腺癌骨转移

发布时间：2021-04-19 09:04

　　目的:本研究在收集非癌对照个体、前列腺癌（Prostate cancer,PCa）患者血清样本,以及构建肥胖状态下骨髓腔PCa荷瘤小鼠模型的基础上,分析血清游离脂肪酸（Free Fatty Acid,FFA）与PCa发生发展的相关性;在骨髓来源脂肪细胞（Bone marrow adipocytes,BMA）与PCa细胞体外共培养的基础上,观察高水平FFA是否通过上调BMA中GPRs/KLF7促进CCL2分泌,进而促进PCa细胞增殖、侵袭和迁移能力,并探讨可能的分子机制。通过以上研究,尝试阐明肥胖导致PCa发生骨转移的可能分子机制,为寻找临床治疗的分子靶标提供基础理论依据。方法:（1）2017年9月-2018年9月,在石河子大学医学院第一附属医院收集10例PCa患者与10例非癌个体一般资料及血清,检测血清中FFA、TG、TC、HDL、LDL和GLU含量及血清中CCL2表达水平。（2）构建高脂饮食诱导的肥胖伴骨髓腔PCa荷瘤小鼠模型（n=8）,以正常饮食骨髓腔PCa荷瘤小鼠（n=4）为对照,动态监测小鼠体重与Lee’s指数,检测小鼠血清中总FFA、TG、TC、HDL、LDL和GLU含量;运... 

【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

肥胖伴骨髓腔PCa荷瘤小鼠模型的建立(A)体重(B)术前Lee`s指数(C)术后Lee`s指数(D)活体成像(非参数秩和检验，*P<0.05，**P<0.01差异有统计学意义)

脂肪酸通过刺激骨髓脂肪细胞分泌CCL2促进前列腺癌骨转移23图3-3肥胖状态下BMA分布及骨髓中KLF7/CCL2表达水平(A)BMA数量(B)单个BMA面积(C)骨髓腔中BMA面积所占比(D)BMA中KLF7免疫组化评分(E)BMA中CCL2免疫组化评分(F)骨髓腔中KLF7的mRNA表达水平(G)骨髓腔中CCL2的mRNA表达水平(非参数秩和检验，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001差异有统计学意义(200×))Figure3-3DistributionofBMAandKLF7/CCL2expressioninbonemarrowunderobesity(A)NumberofBMA(B)AreaofsingleBMA(C)ProportionofBMAareainthebonemarrowcavity(D)KLF7immunohistochemicalscoreinBMA(E)CCL2immunohistochemicalscoreinBMA(F)mRNAexpressionlevelofKLF7inbonemarrowcavity(G)mRNAexpressionlevelofCCL2inbonemarrowcavity(Non-parametricranksumtest,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.01thedifferencewasstatisticallysignificant(200×))

脂肪酸通过刺激骨髓脂肪细胞分泌CCL2促进前列腺癌骨转移243.4高浓度PA通过促进BMA分泌CCL2对PCa细胞生物学行为的影响3.4.1高浓度PA对BMA中CCL2表达水平的影响分别使用0.1mM、0.2mM和0.3mMPA刺激BMA24小时后，ELISA法检测结果提示：不同浓度PA刺激下BMA分泌CCL2水平均显著升高，且在0.3mMPA刺激下CCL2的分泌水平最高(P<0.05，图3-4A)；不同浓度PA刺激BMA48小时后，qRT-PCR法检测结果提示：0.2mM和0.3mMPA刺激下BMA中CCL2的mRNA表达水平显著升高，且在0.3mMPA刺激下表达水平最高(P<0.05，图3-4B)；选择作用效果最为稳定且差异最显著的0.3mMPA刺激BMA48小时后，WesternBlot结果显示BMA中GPR40/GPR120/KLF7/CCL2的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05，图3-4C)；qRT-PCR结果显示BMA中GPR40/GPR120/KLF7的mRNA表达水平均显著升高(P<0.05，图3-4D-F)。图3-4高浓度PA刺激下BMA中GPR40/GPR120/KLF7/CCL2表达水平(A)不同浓度PA刺激下BMA中CCL2分泌水平(B)不同浓度PA刺激下BMA中CCL2的mRNA表达水平(C)0.3mMPA刺激下BMA中GPR40/GPR120/KLF7/CCL2的蛋白表达水平(D-F)0.3mMPA刺激下BMA中GPR40(D)、GPR120(E)与KLF7(F)的mRNA表达水平(t检验，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001差异有统计学意义)Figure3-4GPR40/GPR120/KLF7/CCL2expressioninBMAstimulatedbyhighconcentrationofPA(A)CCL2secretionlevelsinBMAstimulatedbydifferentconcentrationsofPA(B)mRNAexpressionlevelsofCCL2inBMAstimulatedbydifferentconcentrationsofPA(C)ProteinexpressionlevelsofGPR40/GPR120/KLF7/CCL2inBMAstimulatedby0.3mMPA(D-F)mRNAexpressionlevelsofGPR40(D),GPR120(E)andKLF7(F)inBMAstimulatedby0.3mMPA(ttest,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.01thedifferencewasstatistical

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3147253