LncRNA XIST抑制miR-101调控胰腺癌生长与转移的作用研究

发布时间：2021-04-22 17:37

　　目的:研究胰腺癌组织及胰腺癌细胞中LncRNA XIST、miRNA-101的表达量及它们之间的表达关系,进一步研究LncRNA XIST对miRNA-101的调控作用和LncRNA XIST对胰腺癌生长与转移的影响。方法:收集胰腺癌患者经过手术治疗切除的肿瘤组织及癌旁组织标本,同时培养两种胰腺癌细胞,分别计算胰腺癌组织和细胞中LncRNA XIST与miRNA-101的表达量,得出二者表达量之间的相关性。进行双荧光素酶实验验证LncRNA XIST与miRNA-101之间具有单向调控关系,将培养的两种胰腺癌细胞进行转染,得到转染后的细胞分别是XIST敲低组、XIST增强组和对照转染,Real-time PCR检测计算基因表达量以及验证转染的准确性。转染后的各组细胞分别进行细胞活力检测实验（CCK-8）、细胞增殖实验（划痕实验）、迁移侵袭实验（Transwell）,再进行两种基因的共转染,得到Control、shXIST、shXIST+miR-NC、shXIST+miRNA-101inhibitors（Panc-1组）及Control、XIST、XIST+miR-NC、XIST+miR... 

【文章来源】：皖南医学院安徽省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
研究材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 胰腺癌组织标本的收取
    1.3 细胞培养与细胞转染
    1.4 胰腺癌组织与细胞Lnc RNA XIST与 mi RNA-101 表达水平检测
    1.5 双荧光素酶实验
    1.6 细胞活力检测
    1.7 划痕实验
    1.8 Transwell侵袭实验
    1.9 两种基因分别在两种细胞的共转染
    1.10 裸鼠成瘤实验
    1.11 统计学方法
结果
    2.1 胰腺癌组织中Lnc RNA XIST的相对表达量
    2.2 胰腺癌组织中miRNA-101的相对表达量
    2.3 两种细胞中Lnc RNA XIST的相对表达量及转染后转染效率的检测
    2.4 双荧光素酶分析报告
    2.5 CCK-8法检测细胞增殖情况
    2.6 各组细胞划痕实验对比
    2.7 各组细胞Transwell侵袭实验对比
    2.8 两种基因共转染方法下Lnc RNA XIST调控作用对比
    2.9 裸鼠成瘤实验
讨论
    3.1 胰腺癌组织与细胞Lnc RNA XIST、mi RNA-101 的表达
    3.2 Lnc RNA XIST和 mi RNA-101 调控关系
    3.3 体外细胞实验验证
    3.4 共转染实验背后的深层次分析与动物实验验证
    3.5 总结
结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
作者简介及读研期间主要科研成果
致谢



本文编号：3154186