NK细胞抗肿瘤应答的调控机制研究

发布时间：2021-05-21 12:50

　　自然杀伤细胞（Natural Killer Cell,NK）,因其杀伤肿瘤细胞或者病毒感染的细胞无需预先致敏而得名,是人体免疫监视的第一道防线。细胞氧化还原水平在人类疾病中起着关键作用,在不同程度上参与肿瘤的发生发展过程。目前尚不清楚肿瘤细胞的一些特征分子,尤其是氧化还原水平对NK细胞抗肿瘤免疫应答的影响。因此,本研究旨在揭示肿瘤细胞的氧化还原水平对NK细胞抗肿瘤应答的影响和机制。硫氧还蛋白互作用蛋白（Thioredoxin-Interacting Protein,TXNIP）,是细胞内的一种重要的氧化还原调节分子,通过与硫氧还蛋白（Thioredoxin Protein,Trx）的结合而抑制Trx的抗氧化作用,使细胞处于氧化应激状态。TXNIP在多种癌症组织和细胞系存在不同程度上表达下降,在提高TXNIP的表达后,癌细胞的增殖会受到影响,甚至诱导癌细胞凋亡。因此,TXNIP被认为开发用于许多人类疾病药物的有吸引力的靶标。TXNIP在肿瘤细胞中与氧化还原失衡紧密相关,在NK细胞中与抗肿瘤活性下降相关,但是它介导肿瘤细胞高氧化水平对NK细胞抗肿瘤应答的影响研究甚少。因此,通过氧化还原调节... 

【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院深圳先进技术研究院)广东省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 NK细胞
        1.1.1 NK细胞的简介
        1.1.2 NK细胞抗肿瘤应答的调控机制
    1.2 细胞氧化还原的生物学作用研究进展
        1.2.1 细胞氧化还原信号通路
        1.2.2 氧化还原对肿瘤的作用
        1.2.3 氧化还原对NK细胞功能的调节作用
    1.3 TXNIP
        1.3.1 TXNIP的结构
        1.3.2 TXNIP对细胞氧化还原水平的调节作用
        1.3.3 TXNIP对 NK细胞功能的调节作用
    1.4 本论文主要研究内容和意义
第2章 过表达TXNIP基因的肿瘤细胞系构建
    2.1 前言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 材料与试剂
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 实验细胞
        2.2.4 pcDNA-TXNIP-IRES-ZsGreen1 质粒构建与鉴定
        2.2.5 慢病毒包装
        2.2.6 稳定转染细胞系RMAS的筛选及建立
        2.2.7 Western blot检测TXNIP蛋白表达情况
        2.2.8 流式检测细胞表面TXNIP表达情况
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 Western blot检测TXNIP的表达
        2.3.2 流式细胞检测稳定转染细胞表面TXNIP的表达
    2.4 小结
第3章 过表达TXNIP对肿瘤细胞增殖和凋亡水平的影响
    3.1 前言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 材料与试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 细胞计数法检测细胞增殖实验
        3.2.4 Pacific Blue AnnexinⅤ/7-AAD双染检测细胞凋亡实验
        3.2.5 统计分析
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 细胞增殖评价
        3.3.2 细胞凋亡评价
    3.4 小结
第4章 肿瘤细胞过表达TXNIP对 NK细胞杀伤敏感性的影响及其机制的研究
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 材料与试剂
        4.2.2 实验细胞
        4.2.3 实验动物
        4.2.4 体外杀伤实验
        4.2.5 细胞内ROS检测
        4.2.6 线粒体ROS检测
    4.3 统计分析
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 体外杀伤评价
        4.4.2 细胞内ROS产生评价
        4.4.3 细胞线粒体ROS产生评价
    4.5 小结
第5章 肿瘤细胞过表达TXNIP对 NK细胞抗肿瘤功能影响研究
    5.1 前言
    5.2 材料与方法
        5.2.1 实验动物
        5.2.2 NK细胞体内清除实验
        5.2.3 肿瘤模型建立
        5.2.4 统计分析
    5.3 结果与讨论
    5.4 小结
第6章 结论与展望
参考文献
致谢
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]Diverse Functions of VDUP1 in Cell Proliferation,Differentiation,and Diseases[J]. Sang Yong Kim,Hyun-Woo Suh,Jin Woong Chung,Suk-Ran Yoon,Inpyo Choi.  Cellular & Molecular Immunology. 2007(05)



本文编号：3199736