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siRNA干扰体外胆囊癌细胞EIF5A2的表达及对胆囊癌细胞侵袭的影响

发布时间:2021-06-05 20:12
  研究背景:胆囊癌(Gallbladder Cancer,GC)是一种胆系原发性恶性肿瘤,在临床上十分常见。因其恶性程度较高,癌症细胞生长速度快,患此病的患者预后都很差。又由于胆囊癌往往在患者确诊前就有很大可能出现癌细胞的转移,使得患者接受手术切除的治疗手段后,极易复发。且患者手术切除后,5年生存率也相较于其他癌症较低,仅有2%-5%。另外,胆囊癌细胞对化疗药物不是十分敏感,采用放射治疗对胆囊癌疾病进行辅助治疗也很难取得显著的疗效。因此,目前临床上迫切需要研究和发展新的胆囊癌治疗方法,而基因治疗成为了科学家们所关注的焦点。其中siRNA采用与癌症细胞中的目标基因的反义核苷酸链,通过碱基互补的效应来达到抑制mRNA翻译/合成蛋白质的目的,从而在表观遗传学的层面沉默了目标基因的表达,目前该策略已经成为研究癌症基因治疗的一种常用策略,其中癌症相关基因EIF5A2基因已经在其他类型的癌症上有较多研究,而关于胆囊癌的EIF5A2基因的研究则鲜有报道。[目 的]采用iRNA技术,将靶向siRNA干扰片段转入进胆囊癌GBC-SD细胞系中,从而抑制EIF5A2基因的表达,通过Western Blot技术... 

【文章来源】:昆明医科大学云南省

【文章页数】:58 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

siRNA干扰体外胆囊癌细胞EIF5A2的表达及对胆囊癌细胞侵袭的影响


图3-1GBC-SD细胞与siRNA-GBC-SD细胞EIF5A2相对表达量??转染siRNA的GBC-SD细胞在转染24h后,其EIF5A2基因的相对表达量??

工作曲线,细胞,转染,蛋白


j?J??GBC-SD?siRNA-GBC-SD??EIF5A2????^?^?'??<,?ii?:-i.??.ib':篇越知綠匕辕??p-actin??图3-2?GBC-SD细胞与siRNA-GBC-SD细胞EIF5A2基因的蛋白表达情况??转染siRNA的GBC-SD细胞在转染48h后,其EIF5A2基因编码蛋白的能??力明显受到了抑制,Westernblot的条带较弱,而未转染siRNA的GBC-SD细胞??在培养48h后EIF5A2编码蛋白相对正常。从图3-2中可以明显看出,转染siRNA??的GBC-SD细胞相较于未转染siRNA的GBC-SD细胞,其EIF5A2基因表达蛋??白的水平明显降低。??1.?3?siRNA对GBC-SD细胞系的增殖影响??在验证siRNA对GBC-SD细胞的增殖影响前,首先绘制了?CCK8工作曲线:??y?=?6X106x?+?0.1385;?R2?=?0.8762??在转染siRNA?Oh后,GBC-SD与siRNA-GBC-SD的A450吸光度值无明显??统计学差异(P=0.732)。在转染?siRNA?]2h?后,GBC-SD?与?siRNA-GBC-SD?的??A450吸光度值同样也无明显统计学差异(P=0.172)。而在转染24h,36h以及48h??后,GBC-SD细胞与siRNA-GBC-SD细胞的A450吸光度值出现了明显的差异,??其中P值分别为0.013,?0.009,?0.003,均小于0.05。如图3-3所示:??0.35?????0.3」???????°-25^???5?0.2?丄——??S?0.15??

工作曲线,细胞增殖,细胞,转染


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【参考文献】:
期刊论文
[1]肿瘤转移抑制基因KAI1在原发性胆囊癌中的表达及其临床意义[J]. 姜文霞,宋伯根,汤如勇,方建萍.  第二军医大学学报. 2006(10)
[2]我国胆囊癌的发病情况及外科处理[J]. 石景森.  肝胆胰外科杂志. 1999(01)

硕士论文
[1]EIF-5A2蛋白在胆囊癌组织中的表达和临床分析[D]. 许丁伟.昆明医科大学 2015



本文编号:3212830

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