异柠檬酸脱氢酶1的突变有利于肝内胆管细胞癌预后并通过下调Akt信号抑制肿瘤细胞生长

发布时间：2021-06-07 23:22

　　目的:研究IDH1在肝内胆管细胞癌中的突变频率,突变类型,预后意义,分析IDH1突变与临床病理特征之间的联系。方法:我们收集了从2009年到2014年在华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科行肝内胆管细胞癌手术的85例标本。通过测序检测IDH1的突变状态,对患者术后生存状况进行随访,收集并分析患者的临床病理特征。免疫组化检测肿瘤样本中ki-67的表达水平。结果:通过测序我们发现在肝内胆管细胞癌中存在约15%左右的IDH1突变。相对于野生型的患者,IDH1突变的患者有着更高的总体生存率和较低的术后复发率。IDH1突变与较小的肿瘤大小,较低的CA19-9水平和较早的TNM分期具有显著性相关。IDH1突变的样本中ki-67阳性率较低。结论:IDH1突变的肝内胆管细胞癌患者具有较好的预后。目的:研究IDH1对肝内胆管细胞癌生长功能的影响及机制。方法:利用病毒载体,我们建立了稳定表达野生型和5种突变型IDH1的肝内胆管细胞癌细胞系。通过细胞增殖实验,软琼脂克隆形成实验,细胞周期实验,裸鼠皮下成瘤实验及皮下瘤ki-67染色实验来检测细胞生长能力变化。Western Blotting实验检测一些... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：117 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

IDH1扩增区域序列

图 2 IDH1 扩增产物琼脂糖凝胶电泳图。产样品。2.4.3 Sanger 测序所有的测序工作均委托武汉擎科创新后，将条带清晰的样本（副孔中的另一管2.5 免疫组织化学染色1）将组织切片放于 60 度烤箱中半小2）将切片从烤箱迅速转移到二甲苯溶同时间，依次转入不同浓度乙醇，100%，3）将水化后的切片用预先配置好的 P如下：

华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文总体积 20μL反应条件：预变性 98 度 2 分钟变性 98 度 10 秒退火 15 秒*延伸 72 度 45 秒终延伸 72 度 5 分钟*采用温度梯度 PCR 仪（thermo），退火温度设置 60,65,70 三个温度梯度。反应结束后，每管加入 63的上样缓冲液 4ul，行琼脂糖凝胶电泳鉴定，方法第一部分。


本文编号：3217499