超保守RNA uc.106和迷迭香酸甲酯在B细胞淋巴瘤中的作用和机制研究
发布时间:2021-06-14 08:08
淋巴瘤(lymphoma)是来源淋巴造血系统的恶性肿瘤,在常见肿瘤中排名第七位,在所有肿瘤中占3-4%。它包括两大类:霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma,HL)以Reed-Stemberg细胞(R-S细胞)为特征;非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)包括B细胞和T细胞淋巴瘤。在美国霍奇金淋巴瘤的5年生存率是85%,非霍奇金淋巴瘤是69%,在中国,非霍奇金淋巴瘤以每年5%的速度增长,发病率从上世纪的2/10万上升为6.43/10万,而2012年全球有566 000新发病例,同时有305 000病人死亡。根据淋巴瘤的不同亚型,制定有效的治疗方案是刻不容缓的。随着对淋巴瘤生物学特征的不断研究,分子靶向药物的应用有效的提高了患者的5年生存率。因此,寻找新的肿瘤标志物,研究其在淋巴瘤中的机制有至关重要的意义。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是长度大于200个核苷酸序列且不能翻译成蛋白的RNA,碱基组成从200bp到10万bp不等。研究发现它们具有高度的组织特异性,可通过转录调控、mRNA加工、海绵作用、入核转...
【文章来源】:扬州大学江苏省
【文章页数】:95 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
图1.2人弥漫大B细胞淋巴瘤石蜡组织和人正常淋巴结石蜡组织中uc.106的表迗,Beta-actin为内参
.m|iucerasessayeagen,p的上清,震荡3?sec,放入单孔酶标仪中读数;??(7)取出EP管,加入50?pi?STOP液,震荡3?sec,再次放入单孔酶标仪中读数;??(8)依次按照步骤(6)和(7)检测每个样本。??1.4统计学方法??应用SPSS?19.0统计分析软件,实验数据以均数±标准差(无±3)表示,数据采用独立??样本t检验和x2检验等相关分析,以检验水准a?=?0.05,?P<0.05表示差异有统计学意义,??P<?0.01表示差异有显著统计学意义。??2结果??2.1?uc.106质粒的构建??将uc.106超保守DNA序列克隆到MSCV-pig逆转录病毒载体上,得到的质粒送公司??测序,将测序结果与原序列比对,100%—致,没有突变。如图2.1所示:??uc.106??
?庞磊超保守RNAuc.106和迷迭香酸甲酯在B细胞淋巴瘤中的作用和机制研究?51_??2.2在小鼠淋巴瘤细胞株38B9和人淋巴瘤细胞株Romas中过表达uc.106??将?MSCV-pig、Gagpol、VSVG?和?uc.106、Gagpo]、VSVG?分为两组分别通过转染?293T??细胞包装病毒,然后在36?h、48?h和60?h收集逆转录病毒。再用收集的病毒感染38B9和??Romas细胞。感染48?h接着用嘌呤霉素筛选三天后观察荧光率很高(图2.2.1),流式测??GFP阳性率达到90%左右(图2.2.2),此时提取细胞总RNA检测uc.106的表达情况,发??现转染uc.?106的细胞中uc.?106升高约900倍(图2.2.3)。??
【参考文献】:
期刊论文
[1]迷迭香酸甲酯诱导自噬抑制人胃癌细胞增殖的研究[J]. 庞磊,曹桂云,吴凡,王小洪,周芳超,王方方,李斐,邓彬,丁岩冰,郁多男. 扬州大学学报(农业与生命科学版). 2018(03)
[2]迷迭香酸甲酯对6-OHDA所致脑内氧化损伤的影响[J]. 王小洪,丁冬怡,孙志颖,杨子坤,潘思华,曹桂云. 扬州大学学报(农业与生命科学版). 2017(04)
[3]2013年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,张思维,曾红梅,邹小农,赫捷. 中国肿瘤. 2017(01)
[4]同步放化疗联合中药治疗局部晚期宫颈癌的疗效及对生活质量的影响[J]. 李瑞玉,吕秀萍. 中国肿瘤临床与康复. 2016(07)
[5]成人Burkitt淋巴瘤治疗进展[J]. 李丽,陈宝安. 中国实验血液学杂志. 2012(05)
[6]中国淋巴瘤亚型分布:国内多中心性病例10002例分析[J]. 李小秋,李甘地,高子芬,周小鸽,朱雄增. 诊断学理论与实践. 2012(02)
[7]夏枯草提取物诱导B、T淋巴瘤细胞凋亡的实验研究[J]. 付晓瑞,孙振昌,张明智. 中药材. 2012(03)
[8]绿升麻中具有抗肿瘤活性的三萜类化合物[J]. 范云双,姚智,滕杰,潘勤,张富赓,段宏泉. 中草药. 2007(02)
[9]Dendritic Cells as a Pharmacological Target of Traditional Chinese Medicine[J]. O. M. Zack Howard,Joost J. Oppenheim. Cellular & Molecular Immunology. 2006(06)
[10]根据WHO淋巴造血系统肿瘤新分类对山西省淋巴瘤分布特点的分析[J]. 王晋芬,王云中,陈振文,Taylor Clive R. 中华病理学杂志. 2006(04)
本文编号:3229413
【文章来源】:扬州大学江苏省
【文章页数】:95 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
图1.2人弥漫大B细胞淋巴瘤石蜡组织和人正常淋巴结石蜡组织中uc.106的表迗,Beta-actin为内参
.m|iucerasessayeagen,p的上清,震荡3?sec,放入单孔酶标仪中读数;??(7)取出EP管,加入50?pi?STOP液,震荡3?sec,再次放入单孔酶标仪中读数;??(8)依次按照步骤(6)和(7)检测每个样本。??1.4统计学方法??应用SPSS?19.0统计分析软件,实验数据以均数±标准差(无±3)表示,数据采用独立??样本t检验和x2检验等相关分析,以检验水准a?=?0.05,?P<0.05表示差异有统计学意义,??P<?0.01表示差异有显著统计学意义。??2结果??2.1?uc.106质粒的构建??将uc.106超保守DNA序列克隆到MSCV-pig逆转录病毒载体上,得到的质粒送公司??测序,将测序结果与原序列比对,100%—致,没有突变。如图2.1所示:??uc.106??
?庞磊超保守RNAuc.106和迷迭香酸甲酯在B细胞淋巴瘤中的作用和机制研究?51_??2.2在小鼠淋巴瘤细胞株38B9和人淋巴瘤细胞株Romas中过表达uc.106??将?MSCV-pig、Gagpol、VSVG?和?uc.106、Gagpo]、VSVG?分为两组分别通过转染?293T??细胞包装病毒,然后在36?h、48?h和60?h收集逆转录病毒。再用收集的病毒感染38B9和??Romas细胞。感染48?h接着用嘌呤霉素筛选三天后观察荧光率很高(图2.2.1),流式测??GFP阳性率达到90%左右(图2.2.2),此时提取细胞总RNA检测uc.106的表达情况,发??现转染uc.?106的细胞中uc.?106升高约900倍(图2.2.3)。??
【参考文献】:
期刊论文
[1]迷迭香酸甲酯诱导自噬抑制人胃癌细胞增殖的研究[J]. 庞磊,曹桂云,吴凡,王小洪,周芳超,王方方,李斐,邓彬,丁岩冰,郁多男. 扬州大学学报(农业与生命科学版). 2018(03)
[2]迷迭香酸甲酯对6-OHDA所致脑内氧化损伤的影响[J]. 王小洪,丁冬怡,孙志颖,杨子坤,潘思华,曹桂云. 扬州大学学报(农业与生命科学版). 2017(04)
[3]2013年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,张思维,曾红梅,邹小农,赫捷. 中国肿瘤. 2017(01)
[4]同步放化疗联合中药治疗局部晚期宫颈癌的疗效及对生活质量的影响[J]. 李瑞玉,吕秀萍. 中国肿瘤临床与康复. 2016(07)
[5]成人Burkitt淋巴瘤治疗进展[J]. 李丽,陈宝安. 中国实验血液学杂志. 2012(05)
[6]中国淋巴瘤亚型分布:国内多中心性病例10002例分析[J]. 李小秋,李甘地,高子芬,周小鸽,朱雄增. 诊断学理论与实践. 2012(02)
[7]夏枯草提取物诱导B、T淋巴瘤细胞凋亡的实验研究[J]. 付晓瑞,孙振昌,张明智. 中药材. 2012(03)
[8]绿升麻中具有抗肿瘤活性的三萜类化合物[J]. 范云双,姚智,滕杰,潘勤,张富赓,段宏泉. 中草药. 2007(02)
[9]Dendritic Cells as a Pharmacological Target of Traditional Chinese Medicine[J]. O. M. Zack Howard,Joost J. Oppenheim. Cellular & Molecular Immunology. 2006(06)
[10]根据WHO淋巴造血系统肿瘤新分类对山西省淋巴瘤分布特点的分析[J]. 王晋芬,王云中,陈振文,Taylor Clive R. 中华病理学杂志. 2006(04)
本文编号:3229413
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