NRG1/HER3通路激活致HER2阳性乳腺癌曲妥珠单抗原发耐药作用机制的研究

发布时间：2021-07-01 20:20

　　目的:探索HER2阳性乳腺癌中,NRG1/HER3通路激活在曲妥珠单抗原发耐药机制中的意义,以及NRG1依赖性HER3单克隆抗体（3D4）的抑制效果。选用BT474（曲妥珠单抗敏感）和MDA-MB-453（曲妥珠单抗原发耐药）HER2阳性乳腺癌细胞为研究对象,利用曲妥珠单抗和/或HER3抗体阻断HER2/HER3激活,利用siRNA沉默HER3基因,分析不同处理后下游信号转导分子和细胞凋亡、活力的变化规律,阐明NRG1/HER3激活在曲妥珠单抗原发耐药中的重要作用。方法:1.通过外源性NRG1刺激,曲妥珠单抗和/或HER3抗体处理敏感BT474细胞和耐药MDA-MB-453细胞后,利用western blot方法检测p-HER2、p-HER3、p-Akt、pMAPK信号通路的蛋白表达量。2.把小干扰RNA（靶向HER3基因）转染至耐药MDA-MB-453细胞中进行基因沉默,利用western blot方法检测p-HER2、p-HER3、p-Akt、p-MAPK表达的变化。3.通过外源性NRG1刺激,曲妥珠单抗和/或HER3抗体处理敏感BT474细胞与耐药MDA-MB-453细胞后,应用... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同药物刺激对BT474细胞p-HER2和p-HER3表达的影响

山西医科大学硕士学位论文2.2 在敏感 BT474 乳腺癌细胞中，NRG1/HER3 的激活对耐药相关信号分子 p-Akt 和 p-MAPK 的影响外源性 NRG1 刺激曲妥珠单抗敏感 BT474 乳腺癌细胞后，磷酸化蛋（Phospho Protein Kinase B, p-Akt）的表达水平上调。在没有 NRG1 刺激的曲妥珠单抗和 HER3 抗体均显著下调 p-Akt 的表达（P<0.01），但曲妥珠单抗抗体的抑制效果更强。而 NRG1 刺激后，曲妥珠单抗对 p-Akt 的抑制作用减抗体的抑制作用变得更加显著（P<0.01），两种抗体联合应用显示协同效应和 D）。在没有 NRG1 刺激的情况下，曲妥珠单抗可抑制敏感 BT474 细胞磷原活化蛋白激酶（Phospho Mitogen-activated Protein Kinase, p-MAPK）的表制作用在 NRG1 刺激后消失，而此时 HER3 抗体显示出显著的下调作用（（图 1，E）。

山西医科大学硕士学位论文外源性 NRG1 刺激可使 p-HER3 和 HER3 的蛋白表达水平显著升高。不NRG1 刺激，曲妥珠单抗都不能下调 p-HER2 和 p-HER3 的表达。但是在 NR后，HER3 抗体可以显著下调 p-HER2 和 p-HER3 的表达（P<0.01）（图 3，2.3 NRG1 依赖性 HER3 抗体可抑制耐药 MDA-MB-453 乳腺癌细胞HER2、p-HER3 的表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]OVEREXPRESSION OF p53, EGFR,C-ERBB2 AND C-ERBB3 IN ENDOMETRIOIDCARCINOMA OF THE OVARY[J]. 冷金花,郎景和,沈铿,郭丽娜.  Chinese Medical Sciences Journal. 1997(02)



本文编号：3259806