缺氧条件对胰腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响以及作用机制
发布时间：2021-07-02 12:44
目的探讨缺氧条件对胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭能力、上皮间质转化、细胞外基质、Hippo信号通路的影响,以及沉默HIF-1α对胰腺癌细胞侵袭、迁移的影响以及作用机制,为临床上进一步预防、治疗胰腺癌提供理论依据。方法1、将胰腺癌PANC-1细胞分为对照组和缺氧组,分别在常氧（5%CO2、95%O2）和缺氧（5%CO2、2%O2、93%N2）条件下培养24h,采用Transwell小室和细胞划痕实验检测胰腺癌细胞迁移能力的变化;Western blot和q RT-PCR技术检测上皮细胞间充质化（EMT）相关蛋白、MMP2和MMP-9、Hippo信号通路相关蛋白的表达水平;2、将PANC-1细胞分为对照组、缺氧组、缺氧空转组、缺氧干扰组。通过脂质体瞬时转染法将Si RNA、Si RNA HIF-1α转入胰腺癌细胞中,Western blot检测转染效果。采用细胞划痕和Transwell小室检测胰腺癌细胞迁移能力和侵袭能力的变化;Western blot检测EMT相关蛋白以及MMP2、MMP-9、Hippo信号通路相关蛋白的表达水平;3、实验结果采用SPSS22.0进行t检验和单因素方差分...
【文章来源】：华北理工大学河北省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图2两组细胞Transwell迁移实验结果（结晶紫染色，200倍）
-101.2结果1.2.1细胞划痕实验和细胞迁移实验结果结果显示，与对照组相比，缺氧组细胞的划痕面积和迁移细胞数明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。见图1、图2和表1图1两组胰腺癌细胞划痕实验结果（100倍）图2两组细胞Transwell迁移实验结果（结晶紫染色，200倍）表1细胞划痕实验和迁移实验结果（x±s）组别划痕面积（%）迁移细胞数（个）对照组35.247±5.612135.268±12.323缺氧组69.586±7.235a268.249±23.147a注：与对照组相比，aP<0.05对照组缺氧组对照组缺氧组培养0h培养24h
-11-1.2.2Transwell细胞侵袭实验结果与对照组相比，缺氧组侵袭细胞数明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。见图3和表2。图3Transwell侵袭实验检结果（结晶紫染色，200倍）表2两组细胞Transwell细胞侵袭实验结果（x±s）组别侵袭细胞数（个）对照组412.362±11.246缺氧组652.314±15.862a注：与对照组相比，aP<0.051.2.3缺氧对胰腺癌细胞功能的影响（1）对EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin表达的影响与对照组相比，缺氧组E-cadherin蛋白和mRNA表达水平明显降低，Vimentin蛋白和mRNA表达水平明显升高，差异均具有统计学意义（P<0.05）。见图4、图5和表3。对照组缺氧组
【参考文献】：
期刊论文
[1]Hippo信号通路与肿瘤发生的研究进展[J]. 邱勤明,石秋燕,王江,杨莉佳,潘巍巍. 四川生理科学杂志. 2016(01)
[2]YAP与肿瘤干细胞相关性研究进展[J]. 李海欣,何娜,郑红. 中国肿瘤临床. 2015(14)
[3]Hippo通路中Yes相关蛋白在胰腺癌中的表达及意义[J]. 李晓宇,田字彬,单信芝,张翠萍,刘晓英,徐永红,李新华,武军,赵文君,李丹. 世界华人消化杂志. 2013(28)
[4]Hippo信号通路在恶性肿瘤及干细胞中的作用[J]. 李敏睿,张盛洪,钟碧慧. 胃肠病学和肝病学杂志. 2013(04)
[5]不同缺氧状态对人肝癌HepG2细胞侵袭和转移能力的影响[J]. 余桂芳,严跃红,王瑞鑫,曾文铤,朱科伦. 中国病理生理杂志. 2012(02)
[6]哺乳动物Hippo信号通路:肿瘤治疗的新标靶[J]. 许传铭,万福生. 遗传. 2012(03)
[7]上皮-间质转化研究进展[J]. 张华东,黄勇,李宏伟,熊正文. 中国现代医学杂志. 2011(31)
[8]上皮间质转化与肿瘤侵袭转移关系的研究进展[J]. 孙丹,辛彦. 现代肿瘤医学. 2011(10)
[9]Hippo-YAP信号通路与胃癌相关性研究[J]. 张靖,朱金水. 国际消化病杂志. 2011(04)
[10]HIF-1α、VEGF、VEGFR2在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义[J]. 蒋晓东,戴鹏,宋大安,吴瑾,黎世秋. 临床肺科杂志. 2011(03)
博士论文
[1]低氧微环境调控Hippo信号通路的机制及其在肿瘤发生过程中的作用[D]. 马彪.南开大学 2016
[2]Hippo通路效应蛋白YAP调控基因转录的机制与功能研究[D]. 刘欢.浙江大学 2015
[3]沉默缺氧诱导因子HIF-1α基因对视网膜母细胞瘤生长与凋亡的影响[D]. 夏天.郑州大学 2013
[4]MicroRNA-210对缺氧状态下肾癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其分子机制研究[D]. 李松超.中南大学 2012
硕士论文
[1]缺氧对食管鳞癌细胞IL-6、TGF-β1的影响及间质转化的作用[D]. 姚进超.郑州大学 2016
[2]小干扰RNA沉默YAP基因对人牙周膜干细胞生物学行为的影响[D]. 唐翠竹.山东大学 2016
[3]Hippo信号通路在结直肠癌中的表达及临床意义[D]. 梁坤.青岛大学 2014
本文编号：3260489
【文章来源】：华北理工大学河北省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图2两组细胞Transwell迁移实验结果（结晶紫染色，200倍）
-101.2结果1.2.1细胞划痕实验和细胞迁移实验结果结果显示，与对照组相比，缺氧组细胞的划痕面积和迁移细胞数明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。见图1、图2和表1图1两组胰腺癌细胞划痕实验结果（100倍）图2两组细胞Transwell迁移实验结果（结晶紫染色，200倍）表1细胞划痕实验和迁移实验结果（x±s）组别划痕面积（%）迁移细胞数（个）对照组35.247±5.612135.268±12.323缺氧组69.586±7.235a268.249±23.147a注：与对照组相比，aP<0.05对照组缺氧组对照组缺氧组培养0h培养24h
-11-1.2.2Transwell细胞侵袭实验结果与对照组相比，缺氧组侵袭细胞数明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。见图3和表2。图3Transwell侵袭实验检结果（结晶紫染色，200倍）表2两组细胞Transwell细胞侵袭实验结果（x±s）组别侵袭细胞数（个）对照组412.362±11.246缺氧组652.314±15.862a注：与对照组相比，aP<0.051.2.3缺氧对胰腺癌细胞功能的影响（1）对EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin表达的影响与对照组相比，缺氧组E-cadherin蛋白和mRNA表达水平明显降低，Vimentin蛋白和mRNA表达水平明显升高，差异均具有统计学意义（P<0.05）。见图4、图5和表3。对照组缺氧组
【参考文献】：
期刊论文
[1]Hippo信号通路与肿瘤发生的研究进展[J]. 邱勤明,石秋燕,王江,杨莉佳,潘巍巍. 四川生理科学杂志. 2016(01)
[2]YAP与肿瘤干细胞相关性研究进展[J]. 李海欣,何娜,郑红. 中国肿瘤临床. 2015(14)
[3]Hippo通路中Yes相关蛋白在胰腺癌中的表达及意义[J]. 李晓宇,田字彬,单信芝,张翠萍,刘晓英,徐永红,李新华,武军,赵文君,李丹. 世界华人消化杂志. 2013(28)
[4]Hippo信号通路在恶性肿瘤及干细胞中的作用[J]. 李敏睿,张盛洪,钟碧慧. 胃肠病学和肝病学杂志. 2013(04)
[5]不同缺氧状态对人肝癌HepG2细胞侵袭和转移能力的影响[J]. 余桂芳,严跃红,王瑞鑫,曾文铤,朱科伦. 中国病理生理杂志. 2012(02)
[6]哺乳动物Hippo信号通路:肿瘤治疗的新标靶[J]. 许传铭,万福生. 遗传. 2012(03)
[7]上皮-间质转化研究进展[J]. 张华东,黄勇,李宏伟,熊正文. 中国现代医学杂志. 2011(31)
[8]上皮间质转化与肿瘤侵袭转移关系的研究进展[J]. 孙丹,辛彦. 现代肿瘤医学. 2011(10)
[9]Hippo-YAP信号通路与胃癌相关性研究[J]. 张靖,朱金水. 国际消化病杂志. 2011(04)
[10]HIF-1α、VEGF、VEGFR2在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义[J]. 蒋晓东,戴鹏,宋大安,吴瑾,黎世秋. 临床肺科杂志. 2011(03)
博士论文
[1]低氧微环境调控Hippo信号通路的机制及其在肿瘤发生过程中的作用[D]. 马彪.南开大学 2016
[2]Hippo通路效应蛋白YAP调控基因转录的机制与功能研究[D]. 刘欢.浙江大学 2015
[3]沉默缺氧诱导因子HIF-1α基因对视网膜母细胞瘤生长与凋亡的影响[D]. 夏天.郑州大学 2013
[4]MicroRNA-210对缺氧状态下肾癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其分子机制研究[D]. 李松超.中南大学 2012
硕士论文
[1]缺氧对食管鳞癌细胞IL-6、TGF-β1的影响及间质转化的作用[D]. 姚进超.郑州大学 2016
[2]小干扰RNA沉默YAP基因对人牙周膜干细胞生物学行为的影响[D]. 唐翠竹.山东大学 2016
[3]Hippo信号通路在结直肠癌中的表达及临床意义[D]. 梁坤.青岛大学 2014
本文编号：3260489
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