活性维生素D经Bmi-1介导在抑制乳腺癌移植瘤生长和骨转移中的作用和机制研究
发布时间：2021-07-03 13:06
研究背景:乳腺癌是一种常见的女性恶性肿瘤,是全球第二大导致女性恶性肿瘤患者死亡的疾病。乳腺癌的诊断和治疗尽管不断取得进展,但并未整体生存率得到显著提高,主要原因是乳腺癌容易产生远处转移。临床试验表明,骨是乳腺癌最常见的远处转移器官,约70%的乳腺癌患者在自然病程中会发生骨转移。乳腺癌骨转移发生后,由于骨结构的破坏增加,容易发生骨骼相关不良事件,严重影响患者的生活质量。更为严重的是,乳腺癌一旦转移到骨,就无法治愈。一项正在进行的临床研究表明,维生素D缺乏是乳腺癌骨转移的常见危险因素,而维生素D水平正常者发生骨转移的概率显著降低。然而,活性维生素D缺乏在乳腺癌发生和骨转移发生发展中的作用机制未见报道。研究目的:1)明确活性维生素D在抑制乳腺癌细胞生长和骨转移中的作用;2)明确活性维生素D经Bmi-1介导在抑制乳腺癌移植瘤生长和骨转移中的作用;3)揭示活性维生素D在抑制乳腺癌发生和骨转移的作用机制,为活性维生素D用于临床防治乳腺癌及其骨转移提供实验和理论依据。研究方法:使用鼠源乳腺癌TM40D细胞株通过外源性1,25（OH）2D3处理,采用CCK-...
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
三组小鼠乳腺癌TM40D造模产生骨骼转移病理检查图例（200×）
图 5. X 线和微 CT 检测胫骨溶骨性骨破坏图例X 线和微 CT 检测显示，三组小鼠胫骨中均有溶骨性破坏（乳腺癌细胞TM40D 移植成功），溶骨性面积：胫骨内生长成瘤面积 Cyp27b1-/-BCBM 对照组> Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干预组> WT BCBM 组。5. 1,25(OH)2D3通过抑制乳腺癌细胞诱导破骨细胞骨吸收降低其溶骨性骨破坏为了明确l,25(OH)2D3抑制乳腺癌细胞溶骨性骨破坏作用是否与其抑制乳腺癌细胞诱导的破骨细胞增殖活化促进骨吸收有关，我们使用TRAP组织化学染色观察了TRAP阳性细胞在溶骨性病变区域的数目变化。结果显示：与WT乳腺癌骨转移对照组小鼠相比，TRAP阳性细胞数在Cyp27b1-/-乳腺癌骨转移对照组显著增加；与Cyp27b1-/-对照组相比，Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干预组的破骨细胞数显著减少(图6A & B)。这些结果说明1,25(OH)2D3能够通过抑制乳腺癌细胞诱导的破骨细胞增殖活化促进骨吸收而降低其溶骨性骨破坏。A
南京医科大学博士学位论文34图6. 三组溶骨性病变区域的破骨细胞染色图例（200×）(A)三组溶骨性病变区域的破骨细胞染色结果显微图像。(B)三组破骨细胞染色结果统计图。***：P <0.001，与WT对照组相比。###：P <0.001，与Cyp27b1-/-对照组相比。6. 1,25(OH)2D3体内外能够明显下调Bmi-1在乳癌细胞中的表达为了明确l,25(OH)2D3抑制乳腺癌骨转移后的生长成瘤和溶骨性骨破坏是否与其下调Bmi-1在乳癌细胞中的表达有关，我们利用Western blot方法比较分析了有或者无10-8M l,25(OH)2D3处理的培养72h的TM40D细胞及WT、Cyp27b1-/-乳腺癌骨转移对照组和Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干预组骨内瘤组织样本中Bmi-1蛋白表达水平的变化。结果显示：Bmi-1蛋白表达水平在l,25(OH)2D3处理的TM40D中(图7)及在Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干预组样本中均较对照组显著下调，而在Cyp27b1-/-乳腺癌骨转移对照组显著上调(图8)。这些体内外结果说明l,25(OH)2D3能够下调Bmi-1在乳癌骨转移组织中的表达。图7. l,25(OH)2D3下调Bmi-1在乳癌细胞中?
【参考文献】：
期刊论文
[1]Diagnosis and surgical management of breast cancer metastatic to the spine[J]. Derek G Ju,Alp Yurter,Ziya L Gokaslan,Daniel M Sciubba. World Journal of Clinical Oncology. 2014(03)
[2]Molecular pathogenesis of bone metastases in breast cancer: Proven and emerging therapeutic targets[J]. Nadia Rucci,Patrizia Sanità,Simona Delle Monache,Edoardo Alesse,Adriano Angelucci. World Journal of Clinical Oncology. 2014(03)
[3]中国2000年及2005年恶性肿瘤发病死亡的估计与预测[J]. 杨玲,李连弟,陈育德,D.M.Parkin. 中国卫生统计. 2005(04)
本文编号：3262639
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
三组小鼠乳腺癌TM40D造模产生骨骼转移病理检查图例（200×）
图 5. X 线和微 CT 检测胫骨溶骨性骨破坏图例X 线和微 CT 检测显示，三组小鼠胫骨中均有溶骨性破坏（乳腺癌细胞TM40D 移植成功），溶骨性面积：胫骨内生长成瘤面积 Cyp27b1-/-BCBM 对照组> Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干预组> WT BCBM 组。5. 1,25(OH)2D3通过抑制乳腺癌细胞诱导破骨细胞骨吸收降低其溶骨性骨破坏为了明确l,25(OH)2D3抑制乳腺癌细胞溶骨性骨破坏作用是否与其抑制乳腺癌细胞诱导的破骨细胞增殖活化促进骨吸收有关，我们使用TRAP组织化学染色观察了TRAP阳性细胞在溶骨性病变区域的数目变化。结果显示：与WT乳腺癌骨转移对照组小鼠相比，TRAP阳性细胞数在Cyp27b1-/-乳腺癌骨转移对照组显著增加；与Cyp27b1-/-对照组相比，Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干预组的破骨细胞数显著减少(图6A & B)。这些结果说明1,25(OH)2D3能够通过抑制乳腺癌细胞诱导的破骨细胞增殖活化促进骨吸收而降低其溶骨性骨破坏。A
南京医科大学博士学位论文34图6. 三组溶骨性病变区域的破骨细胞染色图例（200×）(A)三组溶骨性病变区域的破骨细胞染色结果显微图像。(B)三组破骨细胞染色结果统计图。***：P <0.001，与WT对照组相比。###：P <0.001，与Cyp27b1-/-对照组相比。6. 1,25(OH)2D3体内外能够明显下调Bmi-1在乳癌细胞中的表达为了明确l,25(OH)2D3抑制乳腺癌骨转移后的生长成瘤和溶骨性骨破坏是否与其下调Bmi-1在乳癌细胞中的表达有关，我们利用Western blot方法比较分析了有或者无10-8M l,25(OH)2D3处理的培养72h的TM40D细胞及WT、Cyp27b1-/-乳腺癌骨转移对照组和Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干预组骨内瘤组织样本中Bmi-1蛋白表达水平的变化。结果显示：Bmi-1蛋白表达水平在l,25(OH)2D3处理的TM40D中(图7)及在Cyp27b1-/-+l,25(OH)2D3干预组样本中均较对照组显著下调，而在Cyp27b1-/-乳腺癌骨转移对照组显著上调(图8)。这些体内外结果说明l,25(OH)2D3能够下调Bmi-1在乳癌骨转移组织中的表达。图7. l,25(OH)2D3下调Bmi-1在乳癌细胞中?
【参考文献】：
期刊论文
[1]Diagnosis and surgical management of breast cancer metastatic to the spine[J]. Derek G Ju,Alp Yurter,Ziya L Gokaslan,Daniel M Sciubba. World Journal of Clinical Oncology. 2014(03)
[2]Molecular pathogenesis of bone metastases in breast cancer: Proven and emerging therapeutic targets[J]. Nadia Rucci,Patrizia Sanità,Simona Delle Monache,Edoardo Alesse,Adriano Angelucci. World Journal of Clinical Oncology. 2014(03)
[3]中国2000年及2005年恶性肿瘤发病死亡的估计与预测[J]. 杨玲,李连弟,陈育德,D.M.Parkin. 中国卫生统计. 2005(04)
本文编号：3262639
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