黑色素瘤细胞来源外泌体PD-L1通过非免疫途径促进肿瘤生长
发布时间：2021-07-05 20:06
恶性黑色素瘤是最常见的恶性肿瘤之一,其发病率以每年3-5%的速度快速增长。肿瘤细胞上调表面程序性死亡-配体1（programmed cell death-ligand 1,PD-L1）的表达并通过与T细胞表面的程序性死亡蛋白1（programmed cell death 1,PD-1）相互作用引起免疫检查点反应以逃避免疫监视。目前,靶向PD-1/PD-L1的药物在治疗肿瘤包括转移性黑色素瘤方面展现出很好的前景,但是患者反应率较低,其具体机制尚不清楚。研究发现,PD-L1不仅高表达于多数肿瘤细胞,也富集于肿瘤细胞分泌的外泌体中,并参与机体免疫系统的抑制。最新研究表明,黑色素瘤细胞PD-L1表达上调,即使在缺乏适应性免疫的情况下仍然促进肿瘤的生长,提示PD-L1除具有免疫抑制作用外,还具有促进肿瘤细胞增殖的能力。我们前期在黑色素瘤细胞系中过表达PD-L1,同样可以促进细胞的增殖能力。据此,我们推测肿瘤细胞PD-L1具有促进细胞增殖的能力,其分泌外泌体到微环境中,所携带的PD-L1除参与免疫抑制外,还促进肿瘤细胞的增殖。为了证实我们的推测,本课题首先利用Tamaxifen诱导的Braf
【文章来源】：山东师范大学山东省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
外泌体的生物发生及其自母细胞的释放[19]
33.2.外泌体的形态和分子组成外泌体的形态可以通过电子显微镜（electronmicroscope，EM）确定，其形态为杯状囊泡结构，直径30-120nm（图1-2A）。每个外泌体都带有亲本细胞的印记，其内容物包括DNA，mRNA，微小RNA以及酶和可溶性因子，它们均具有生物活性，并且能够在靶细胞中执行功能性应答并重新编程核酸[16,20]（图1-2B）。此外，TSG101、Alix、HSP70、CD9、CD63和CD81是在外泌体中高度富集的特异性蛋白，常被用作鉴定外泌体的标记物[21]。以上为一般外泌体的特征，肿瘤外泌体具有自己的独特性，其分子货物部分来源于亲代肿瘤细胞的表面[22]。由于癌细胞倾向于表达和利用各种免疫抑制分子来钝化抗肿瘤免疫反应[23]，肿瘤来源的外泌体富含免疫抑制蛋白，包括死亡受体配体（例如FasL或TRAIL），检查点受体配体（例如PD-L1），抑制性细胞因子（例如IL10和TGF-β1）等。已有文献报道，转移性黑色素瘤和前列腺癌的外泌体中富含大量的PD-L1[5,24]。图1-2外泌体形态和分子组成[19]Figure1-2Exosomemorphologyandthemolecularcontent[19]山东师范大学硕士学位论文
43.3.外泌体与其细胞靶点的通讯前肿瘤来源的外泌体可以将携带前肿瘤的信息传输到其他恶性细胞或正常细胞中[25,26]。外泌体利用以下一种或多种机制与靶细胞相互作用：（a）通过表面分子指导信号传导以激活细胞内信号传导；（b）与靶细胞膜融合，然后将蛋白或基因转移到细胞中；（c）调节外泌体的吞噬作用及内吞；（d）受体介导的内吞作用[27]。图1-3总结了受体细胞摄取外泌体的各种途径以及细胞摄取后的结果。图1-3外泌体通过几种途径与靶细胞相互作用[19]。Figure1-3Exosomesmayinteractwithtargetcellsbyoneofseveralpathways[19].3.4.外泌体的纯化及表征为了深入了解外泌体的生理功能，外泌体的纯化和定量对于满足基础研究和临床应用的需求至关重要。外泌体的纯化主要分为五类：基于密度和大小的超速离心（ultracentrifugation，UC）、依赖大小的超滤和体积排阻色谱（sizeexclusionchromatograph，SEC）等、基于密度的密度梯度离心分离以及利用外泌体上特定标记的免山东师范大学硕士学位论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]运用抗PD-L1抗体治疗晚期癌症患者的安全性与疗效评价[J]. 姜孝新,Julie R.Brahmer,Scott S.Tykodi,Laura Q.M.Chow. 肿瘤药学. 2012(03)
本文编号：3266739
【文章来源】：山东师范大学山东省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
外泌体的生物发生及其自母细胞的释放[19]
33.2.外泌体的形态和分子组成外泌体的形态可以通过电子显微镜（electronmicroscope，EM）确定，其形态为杯状囊泡结构，直径30-120nm（图1-2A）。每个外泌体都带有亲本细胞的印记，其内容物包括DNA，mRNA，微小RNA以及酶和可溶性因子，它们均具有生物活性，并且能够在靶细胞中执行功能性应答并重新编程核酸[16,20]（图1-2B）。此外，TSG101、Alix、HSP70、CD9、CD63和CD81是在外泌体中高度富集的特异性蛋白，常被用作鉴定外泌体的标记物[21]。以上为一般外泌体的特征，肿瘤外泌体具有自己的独特性，其分子货物部分来源于亲代肿瘤细胞的表面[22]。由于癌细胞倾向于表达和利用各种免疫抑制分子来钝化抗肿瘤免疫反应[23]，肿瘤来源的外泌体富含免疫抑制蛋白，包括死亡受体配体（例如FasL或TRAIL），检查点受体配体（例如PD-L1），抑制性细胞因子（例如IL10和TGF-β1）等。已有文献报道，转移性黑色素瘤和前列腺癌的外泌体中富含大量的PD-L1[5,24]。图1-2外泌体形态和分子组成[19]Figure1-2Exosomemorphologyandthemolecularcontent[19]山东师范大学硕士学位论文
43.3.外泌体与其细胞靶点的通讯前肿瘤来源的外泌体可以将携带前肿瘤的信息传输到其他恶性细胞或正常细胞中[25,26]。外泌体利用以下一种或多种机制与靶细胞相互作用：（a）通过表面分子指导信号传导以激活细胞内信号传导；（b）与靶细胞膜融合，然后将蛋白或基因转移到细胞中；（c）调节外泌体的吞噬作用及内吞；（d）受体介导的内吞作用[27]。图1-3总结了受体细胞摄取外泌体的各种途径以及细胞摄取后的结果。图1-3外泌体通过几种途径与靶细胞相互作用[19]。Figure1-3Exosomesmayinteractwithtargetcellsbyoneofseveralpathways[19].3.4.外泌体的纯化及表征为了深入了解外泌体的生理功能，外泌体的纯化和定量对于满足基础研究和临床应用的需求至关重要。外泌体的纯化主要分为五类：基于密度和大小的超速离心（ultracentrifugation，UC）、依赖大小的超滤和体积排阻色谱（sizeexclusionchromatograph，SEC）等、基于密度的密度梯度离心分离以及利用外泌体上特定标记的免山东师范大学硕士学位论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]运用抗PD-L1抗体治疗晚期癌症患者的安全性与疗效评价[J]. 姜孝新,Julie R.Brahmer,Scott S.Tykodi,Laura Q.M.Chow. 肿瘤药学. 2012(03)
本文编号：3266739
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