TUG1-miR-299-3p axis在胰腺癌中的调控功能及其机制研究

发布时间：2021-07-08 12:25

　　胰腺癌（Pancreatic cancer）是世界范围内最恶性的疾病之一。胰腺癌早期,多数患者无明显症状或体征,直到肿瘤细胞转移到其他器官后发展为晚期才被诊断出来。因此,寻找胰腺癌发生发展、早期诊断及预后相关的新的生物学指标,对于早期发现胰腺癌并改善胰腺癌患者的预后具有重要意义。随着基因组和转录组测序技术的进步,鉴定出许多新型非蛋白编码转录产物,在这些大量非蛋白质编码转录物中,长链非编码RNA（lncRNA）是一类新型的非蛋白质编码转录物,长度超过200个核苷酸,在多种病理生理过程中具有重要的调节作用。研究发现,TUG1是一种新型的长链非编码RNA,长度为7.1-kb,位于染色体22q12,首次发现被认为是一种新型的视网膜非编码RNA,为各种恶性肿瘤中的关键致癌基因。随着对TUG1研究增多,TUG1在多种肿瘤中被发现,然而目前在胰腺癌中TUG1的研究仍处于起步阶段,在胰腺癌发生发展中作用机制尚不明确,有待进一步阐释。miR-299-3p是miRNAs的一种,目前国内外文献对其有较少报道。有研究表明,miR-299-3p在骨肉瘤组织中表达下调,与肿瘤细胞增殖、凋亡以及化疗等有关。生物信息... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：122 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

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?第一部分ＴＵＧ１和ｍｉＲ－２９９－３ｐ在胰腺癌中的表达及临床意义研究???Ｉ?＾￣￣－￣￣Ｉ??＜〇?６－，?Ｉ?１??曰?■■??？?２－?？？？?■土－??？?參鲁?■■??ＣＣ?〇Ｊ??，?，???Ｎｏｒｍａｌ?Ａｄｊａｃｅｎｔ?Ｔｕｍｏｒ??图１－１?ｑＲＴ－ＰＣＲ检测胰腺癌组织和癌旁正常组织（ｎ＝３１）及正常组织（ｎ＝８）中ＴＵＧｌ表达??７尺平，＊Ｐ＜０．０５??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?ｑＲＴ－ＰＣＲ?ｗａｓ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｄｅｔｅｃｔ?ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＴＵＧｌ?ｉｎ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ?ｃａｎｃｅｒ?ｔｉｓｓｕｅｓ，??ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（ｎ?＝?３１）?ａｎｄ?ｎｏｒｍａｌ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（ｎ?＝?８），?＜?０．０５．??４．２?ＴＵＧｌ在胰腺癌恶性等级（ＴＮＭ分期）中的表达??为探讨胰腺癌不同分期中的ＴＵＧｌ表达水平，检测结果发现，与Ｉ＋ＩＩ期胰??腺癌患者相比，丨ＩＩ＋ＩＶ期胰腺癌患者癌组织中ＴＵＧ?１的表达显著增加，表明ＴＵＧ?１??的表达可能与肿瘤的ＴＮＭ分期有关系（Ｐ＜０．〇５）结果见图１－２。??６－｜?｜?＂?１??－?？？？？？??（Ｄ??＞??？?—??４－??—?？？??卜?■?Ｊ??＞?２－?ｍ９??０）??０Ｊ?１?？？?１?????Ｓｔａｇｅ１／２?Ｓｔａｇｅ３／４??图１－２ＴＵＧ１在胰腺癌恶性等级（ＴＮＭ分期）中的表达，＊Ｐ＜〇．〇５??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＴＵＧｌ?ｉｎ?ｍａｌｉｇｎａｎｔ?ｇｒ

?第二部分?ＴＵＧ１和ｍｉＲ－２９９－３ｐ在胰腺癌细胞中的功能研究???将重组慢病毒载体质粒（ｐｌｅｎｔｉ－ｓｈ－ＴＵＧｌ、ｐｌｅｎｔｉ－ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ）与包装质??粒共转染２９３Ｔ细胞后，观察细胞荧光表达情况，如图２－９所示，９５％细胞表现??有绿色荧光，表明慢病毒包装成功。收集病毒，经浓缩后进行对重组慢病毒进??行滴度测定，经测定ＬＶ－ｓｈ－ＴＵＧｌ、ＬＶ－ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ病毒滴定值为５．２７ｘｌ〇８??和６．３５ｘｌ〇８ＴＵ／ｍＬ，二者滴度之间没有显著性差异。??ＬＶ－ｓｈ－ＴＵＧ１?ＬＶ－ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ??．??Ｂｒｉｇｈｔ?＿晷：。繼滅顏Ａ＇?．?：?．孤忒??ＧＦＰ｜＾ｇ｜＾＾??图２－９重组慢病毒载体和包装质粒共转染２９３Ｔ细胞（１０〇ｘ）??Ｆｉｇｕｒｅ?２－９?２９３Ｔ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｃｏ－ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｌｅｎｔｉｖｉｍｓ?ｖｅｃｔｏｒ?ａｎｄ?ｐａｃｋａｇｉｎｇ??ｐｌａｓｍｉｄｓ?（１０〇ｘ）．??４．４稳定细胞系的构建??用重组慢病毒ＬＶ－ｓｈ－ＴＵＧｌ感染ＰＡＮＣ－１和ＢＸＰＣ－３细胞，得到ｓｈ－ＴＵＧｌ??细胞，然后用ＬＶ－ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ感染ｓｈ－ＴＵＧｌ细胞，得到??ｓｈ－ＴＵＧｌ＋ａｎｔｉ－ｍｉＲ－２９９－３ｐ细胞，于显微镜下观察细胞中荧光表达情况，结果如??图２－１０所示，９０％细胞中有绿色荧光表现，说明重组慢病毒感染效率较高，所??感染得到的细胞可以用于后续功能分析。??４４??

【参考文献】：
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本文编号：3271563