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MAP9对EB病毒相关胃癌细胞增殖、凋亡的调控

发布时间:2021-07-17 08:23
  目的:检测MAP9(microtube-associated protein 9)基因在EB病毒(Epstein Barr virus,EBV)感染的胃癌阴性和阳性细胞株中蛋白表达高低,探究MAP9表达的差异对EBV感染的胃癌阴性和阳性细胞增殖、凋亡产生可能的影响,为确定EBV在感染肿瘤发生中的作用,对进一步研究MAP9对EBV感染相关肿瘤的发生调控和发展机制提供了新的研究依据和实验思路。方法:采用蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测MAP9在EBV胃癌阳性细胞株和EBV胃癌阴性细胞株中的表达水平;用小干扰RNA(si RNA)干扰阳性胃癌细胞系GT38中MAP9基因的表达,Western blotting方法检测干扰效果和细胞周期素依赖性激酶(CDK6、CDK2、p21、p27)在干扰MAP9前后的表达变化情况,细胞增殖活性和毒性实验(cell counting kit-8)检测细胞增殖的变化,细胞流式技术检测干扰前后的细胞周期、细胞凋亡。采用质粒转染方法建立MAP9过表达EBV阴性胃癌AGS细胞株模型。实验数据采用合适的统计学方法进行处理和分析。结果:(1)EB... 

【文章来源】:青岛大学山东省

【文章页数】:54 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

MAP9对EB病毒相关胃癌细胞增殖、凋亡的调控


Westernblotting分析MAP9在EBV阳性和阴性细胞系中蛋白表达水平

效果图,转染,效果,灰度值


结果13图2Westernblotting检测siRNA转染效果Fig.2WesternblottinganalysistheeffectofsiRNAtransfection(图A:Westernblotting结果;图B:灰度值分析)3干扰MAP9能够促进CDK6、CDK2表达上调敲除MAP9基因后,用Westernblotting方法检测到在EBV阳性胃癌细胞GT38中周期蛋白CDK6和CDK2表达水平均升高(图3A)。结果分析差异均具有统计学意义(F=79.350、102.800,P<0.001)。由此表明,在EBV阳性胃癌细胞中,下调MAP9的表达能促进CDK6、CDK2蛋白的表达。灰度值分析柱状图是三次独立实验的统计结果。图3干扰MAP9能够促进CDK6、CDK2蛋白的表达Fig.3InterferencewithMAP9canpromotetheexpressionofCDK6,CDK2protein(图A:Westernblotting结果;图B:灰度值分析)

柱状图,蛋白,灰度值,胃癌


结果13图2Westernblotting检测siRNA转染效果Fig.2WesternblottinganalysistheeffectofsiRNAtransfection(图A:Westernblotting结果;图B:灰度值分析)3干扰MAP9能够促进CDK6、CDK2表达上调敲除MAP9基因后,用Westernblotting方法检测到在EBV阳性胃癌细胞GT38中周期蛋白CDK6和CDK2表达水平均升高(图3A)。结果分析差异均具有统计学意义(F=79.350、102.800,P<0.001)。由此表明,在EBV阳性胃癌细胞中,下调MAP9的表达能促进CDK6、CDK2蛋白的表达。灰度值分析柱状图是三次独立实验的统计结果。图3干扰MAP9能够促进CDK6、CDK2蛋白的表达Fig.3InterferencewithMAP9canpromotetheexpressionofCDK6,CDK2protein(图A:Westernblotting结果;图B:灰度值分析)

【参考文献】:
期刊论文
[1]MAP9对EB病毒阳性胃癌细胞生物学行为影响[J]. 孙菁阳,肖华,潘晓雯,刘雯,张忠广.  青岛大学学报(医学版). 2020(04)
[2]Inhibitory effect of Polo-like kinase 1 depletion on mitosis and apoptosis of gastric cancer cells[J]. Xue-Hua Chen Ying Qu Xiao-Qing Zhang Qu Cai Bing-Ya Liu Zheng-Gang Zhu,Department of Surgery,Shanghai Institute of Digestive Surgery,Ruijin Hospital,Medical School of Shanghai Jiao Tong University,Shanghai 200025,ChinaBin Lan,Department of Surgical Oncology,the First Affiliated Hospital,Fujian Medical University,Fuzhou 350005,Fujian Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2006(01)

硕士论文
[1]EB病毒对胃癌中Caveolin-1表达的调控作用和机制研究[D]. 贺荟静.青岛大学 2019
[2]EBV相关胃癌中EBV对MAP9表达影响的研究[D]. 肖华.青岛大学 2018
[3]靶向敲除EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)编码基因重组慢病毒的构建和应用[D]. 匡晓晶.青岛大学 2017



本文编号:3287812

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