miR-487b靶向负调控KAT6B在宫颈癌进展中的作用机制研究

发布时间：2021-07-31 02:13

　　研究背景和目的宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤,近年来,其发病趋于年轻化。目前已知,基因改变造成的功能丧失或功能获得与癌症进展相关,如基因的突变、缺失、拷贝数畸变和染色体重排等。MicroRNA是一种单链非编码RNA,在转录后调控部分关键基因发挥作用。通过激活或抑制mRNA可调控多个靶基因表达,改变细胞的增殖、侵袭、凋亡、迁移、分化等。赖氨酸乙酰转移酶（Lysine acetyltransferases,KATs）可以乙酰化组蛋白和其他非组蛋白基质,对染色质的结构和功能至关重要。在多种癌症中,也发现了KAT6B（也称为MORF和QKF）致癌基因的染色体易位。既往研究表明,miR-487b在结直肠癌、肺癌、前列腺癌、胆囊癌、胶质瘤等癌症中的失调可促进肿瘤的生长增殖,KAT6B的抑制可以在表观遗传学上诱导细胞周期退出和细胞衰老,抑制细胞增殖。在本课题中,我们拟利用细胞生物学和分子生物学技术探索miR-487b在宫颈癌细胞中的作用及其与KAT6B的关系。研究方法及材料培养人宫颈癌细胞株Hela和C33a,首先将慢病毒包裹的miR-487b前体序列的反义序列（lv-antagomiR-487b）转... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Hela细胞株转染miR-487b前体序列的反义序列（lv-antagomiR-487b）及其对照72h后，荧光显微镜下荧光表达情况；C33a细胞株转染miR-487b前体序列的反义序列

江苏大学硕士学位论文19Rt-PCR实验验证lv-antagomiR-487b转染情况图2：A.Hela细胞株转染miR-487b前体序列的反义序列（lv-antagomiR-487b）后PCR结果;B.C33a细胞株转染miR-487b前体序列的反义序列（lv-antagomiR-487b）后PCR结果。宫颈癌细胞株Hela、C33a转染lv-antagomiR-487b后，miR487b表达较对照组明显下降。统计学数据*p<0.05。4.1.2miR-487b下调促进宫颈癌细胞生长细胞生长计数实验观察细胞生长速度。按照上述铺板方式，每种细胞取同样数量接种于6孔板中，分别于铺板后第1,2,3,4,5,6天观察同一部位细胞形态并记录该区域内细胞生长数目。并根据（第1+N天计数/第1天计数），制备曲线以观察评估细胞生长趋势和速度。可以从制备的曲线中看出，miR-487b下调后，细胞增长数目较对照组多且速度快。图3：观察并计数6天内细胞生长。上图分别为下调miR-487b表达的Hela和C33a细胞和对照组生长曲线。结果显示，下调miR-487b后，促进宫颈癌细胞生长。统计学数据p<0.05。

江苏大学硕士学位论文19Rt-PCR实验验证lv-antagomiR-487b转染情况图2：A.Hela细胞株转染miR-487b前体序列的反义序列（lv-antagomiR-487b）后PCR结果;B.C33a细胞株转染miR-487b前体序列的反义序列（lv-antagomiR-487b）后PCR结果。宫颈癌细胞株Hela、C33a转染lv-antagomiR-487b后，miR487b表达较对照组明显下降。统计学数据*p<0.05。4.1.2miR-487b下调促进宫颈癌细胞生长细胞生长计数实验观察细胞生长速度。按照上述铺板方式，每种细胞取同样数量接种于6孔板中，分别于铺板后第1,2,3,4,5,6天观察同一部位细胞形态并记录该区域内细胞生长数目。并根据（第1+N天计数/第1天计数），制备曲线以观察评估细胞生长趋势和速度。可以从制备的曲线中看出，miR-487b下调后，细胞增长数目较对照组多且速度快。图3：观察并计数6天内细胞生长。上图分别为下调miR-487b表达的Hela和C33a细胞和对照组生长曲线。结果显示，下调miR-487b后，促进宫颈癌细胞生长。统计学数据p<0.05。


本文编号：3312562