藤黄酸对缺氧下多发性骨髓瘤细胞HIF-1α/VEGF的调控和机制研究

发布时间：2021-08-08 20:13

　　目的缺氧是很多肿瘤组织共有的表现,其具有诱导肿瘤细胞代谢改变,促进血管新生,增强浸润转移及产生耐药等特性。在血液系统恶性疾病中,同样可以发现瘤细胞处于一个缺氧微环境。缺氧可以激活重要的转录因子缺氧诱导因子-1 α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）表达,是导致多发性骨髓瘤（mutiple myeloma,MM）血管新生能力增强的重要因素,而血管新生与MM疾病进展和预后密切相关。藤黄酸是藤黄中提取的有效成分,在众多实体瘤体内外实验中均显示出良好的抗肿瘤效果。本研究主要探讨藤黄酸是否可以抑制缺氧时MM的HIF-1 α及其下游血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达,并探讨相关具体分子机制。方法通过对藤黄酸、汉黄芩和姜黄素三种中药有效成分进行CCK-8细胞增殖实验,选取对MM细胞无明显细胞毒性浓度,在缺氧条件下干预MM细胞,通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清VEGF表达含量变化,实时荧光定量PCR检测不同缺氧时间对MM细胞VEGF基因表达变化、药物对缺氧培养MM细胞HIF-1 α... 

【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 前言
    1 多发性骨髓瘤与缺氧
    2 藤黄酸抗肿瘤的机制
    3 本课题的研究任务
第二章 文献综述 缺氧与HIF-1 α的研究进展
    1 缺氧与血管新生
    2 HIF-1 α的激活及对下有基因的诱导
    3 HIF-1 α在非肿瘤疾病中的作用
    4 HIF-1 α与肿瘤
    5 MM中缺氧与HIF-1 α作用
第三章 材料与方法
    1 主要实验试剂
    2 主要仪器耗材
    3 实验室器械准备
    4 试验方法
        4.1 细胞系和培养条件
        4.2 瑞氏染色
        4.3 细胞增殖-毒性试验
        4.4 酶联免疫吸附试验
        4.5 逆转录PCR检测
        4.6 实时荧光定量PCR检测
        4.7 Western Blot方法检测细胞各蛋白表达水平
        4.8 裸鼠皮下移植瘤模型的建立
        4.9 肿瘤生长测量和抑制率
        4.10 病理组织学检测
        4.11 免疫荧光染色
        4.12 统计学方法
第四章 实验结果
    1 MM细胞株瑞氏染色形态观察
    2 CCK-8法检测三种中药成分不同浓度时对MM细胞株影响
    3 缺氧对MM细胞VEGF mRNA表达水平的影响
    4 三种中药成分对MM细胞常氧和缺氧下VEGF mRNA影响
    5 常氧与缺氧下藤黄酸对MM细胞VEGF分泌的影响
    6 常氧与缺氧下藤黄酸对U266细胞VEGF蛋白表达的影响
    7 常氧与缺氧下藤黄酸对U266细胞HIF-1 αmRNA表达的影响
    8 常氧与缺氧下藤黄酸对U266细胞HIF-1 α蛋白表达的影响
    9 免疫荧光染色观察藤黄酸对U266细胞在缺氧下HIF-1 α的影响
    10 PI3K/Akt/mTOR通路涉及缺氧下HIF-1 α/VEGF蛋白的合成
    11 PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂对HIF-1 α/VEGF表达的影响
    12 PI3K/Akt/mTOR通路对HIF-1 α/VEGF mRNA影响
    13 藤黄酸对U266细胞裸鼠体内成瘤的影响
    14 CD31,VEGF和HIF-1 α在裸鼠移植瘤中的表达情况
第五章 讨论
    1 多发性骨髓瘤与缺氧
    2 藤黄酸对HIF-1 α/VEGF的抑制作用
    3 藤黄酸下调HIF-1 α/VEGF的作用机制
第六章 总结与展望
    1 总结
    2 展望
参考文献
博士阶段发表文章
个人简介
致谢



本文编号：3330607