PIWI蛋白互作RNA-004800对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响及相关机制研究

发布时间：2021-08-09 13:51

　　研究目的:多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是最常见的一类恶性浆细胞肿瘤,由于单克隆浆细胞恶性增殖、广泛浸润并分泌大量单克隆免疫球蛋白（M蛋白）从而引起广泛骨质破坏、感染、贫血、高钙血症及肾功能不全。近年来,随着新药的临床应用以及自体干细胞移植的广泛开展对初诊及难治复发患者的缓解率及无病生存期得到明显改善。然而,MM仍然是一种无法治愈的疾病。因此,需要我们进一步探索MM的发生、发展的分子机制,寻找到更新、更有效的诊断和治疗靶点提供重要的生物学依据。PIWI蛋白互作RNA（PIWI interacting RNA,pi RNA）是一类新发现的nc RNA,长度为21-35 nt。它通常与Argonaute蛋白的PIWI亚家族结合发挥作用并与生殖系发育中的转座子沉默有关。尽管过去的研究认为pi RNA仅在性腺细胞中起作用,但最近的研究表明,pi RNA在多种肿瘤中存在差异表达,并有效的控制不同类型肿瘤的生物学功能,如肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和分化,可能成为肿瘤的潜在生物标志物。在多发性骨髓瘤方面,关于pi RNA的作用机制研究很少,目前仅有一个pi RNA,pi RN... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：80 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

小RNA实验操作流程图

中国医科大学博士学位论文11B.吸取10μl混匀的DNA样品缓慢打入琼脂糖凝胶孔道中，避免枪头扎到胶；C.打开电泳仪，调整参数，恒压100V，电流调至最大，运行时间设置为2h，开始实验。4）凝胶成像电泳结束后，将琼脂糖凝胶居中放入凝胶成像仪，选择自动曝光，得到成像结果。2.3统计学分析实验数据通过GraphPadPrism7.0软件进行统计图绘制及统计学分析，采用t检验对两组临床样本进行比较，使用单因素方差分析ANOVA进行多样本组间统计学分析。所有数据均采用平均值±标准误(mean±SE)表示。p<0.05具有统计学有意义。3结果3.1外泌体小RNA测序筛选MM中显著高表达的piRNA测序结果表明：MM患者及正常人外泌体小RNA测序筛选出1521个表达上调的piRNAs及498个表达下调的piRNAs（FoldChange≥2.0，p-value＜0.05）。MM患者与正常人骨髓上清液外泌体中表达上调最明显的16个piRNAs聚类热图如图1.1所示。图1.13例MM患者及3例正常人骨髓样本中外泌体小RNA测序分析及鉴定出16个显著上调的piRNAs。

外泌体的鉴定


本文编号：3332185