ChiMR1-DOX抗体偶联药物的制备及其抗肿瘤效应

发布时间：2021-08-11 22:44

　　为了制备得到能够识别EGFRvⅢ的ChiMR1-阿霉素（DOX）抗体偶联药物,并研究其抗肿瘤活性。本研究利用葡聚糖T10为连接子,将其与阿霉素及ChiMR1抗体在室温下进行缩合反应,生成ChiMR1-DOX抗体偶联药物,并通过分别测定DOX小分子和抗体ChiMR1的浓度以确定其偶联比。利用ELISA和MTS法检测ChiMR1-DOX抗体偶联药物对DK-MG细胞（表达EGFRvⅢ）和U-87MG细胞（表达EGFR）的亲和性和杀伤效果,研究ChiMR1-DOX抗体偶联药物的靶向性和抗肿瘤活性。其中Western blotting结果表明ChiMR1-DOX抗体偶联药物在72 kD左右出现一条弥散条带,而ChiMR1抗体和阴性对照无此条带,表明ChiMR1抗体与DOX通过葡聚糖T10偶联成功。ChiMR1-DOX抗体偶联药物中DOX的浓度为0.162 mg/mL,ChiMR1的浓度为0.802 mg/mL,其偶联比约为1∶10。细胞ELISA结果显示ChiMR1-DOX抗体偶联药物能准确识别表达EGFRvⅢ的DK-MG细胞,而不能识别表达EGFR抗体的U-87MG细胞。MTS实验结果表明制备... 

【文章来源】：基因组学与应用生物学. 2020,39(08)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

偶联药物的Western blotting鉴定

以DK-MG细胞(EGFRvⅢ抗原)和U-87MG细胞(EGFR抗原)为受试细胞，利用抗体与抗原的特异性结合，应用MTS法考察Chi MR1-DOX抗体偶联药物对DK-MG和U-87MG细胞的生长影响。结果显示：不同浓度的DOX作用于DK-MG和U-87MG细胞后，随着DOX浓度的增加，均能不同程度的抑制DK-MG和U-87MG细胞的生长，说明DOX对肿瘤细胞具有较高的毒性，但无靶向性；不同浓度的Chi MR1抗体作用于DK-MG和U-87MG细胞后，不影响DK-MG和U-87MG细胞的生长，说明Chi MR1抗体无细胞毒性；不同浓度的Chi MR1-DOX抗体偶联药物用于DK-MG和U-87MG细胞后，随着Chi MR1-DOX抗体偶联药物浓度的增加，能显著性抑制DK-MG的生长，而对U-87MG细胞的生长基本无作用，说明Chi MR1-DOX抗体偶联药物能特异性抑制肿瘤细胞的生长(表1;表2)。图3 阿霉素的标准曲线

阿霉素的标准曲线

【参考文献】：
期刊论文
[1]茶多糖对阿霉素抑制肺癌A549细胞增殖作用的影响[J]. 魏楠,朱强强,陈际名,李彤,李亦凡,黄业伟,马啸,王宣军,盛军.  茶叶科学. 2016(05)

博士论文
[1]几种抗CD20抗体偶联药物的制备与生物学活性初步研究[D]. 李朝辉.浙江大学 2013



本文编号：3337037