miR-34a通过调控FOXM1及MTA2对肺腺癌恶性生物学行为的影响
发布时间：2021-08-14 02:44
[目 的]研究miR-34a在体外和体内对肺腺癌细胞侵袭、迁移、增殖及克隆等恶性生物学行为的影响,以及miR-34a在肺腺癌恶性生物学行为中的可能靶点,并在组织样本层面验证miR-34a、MTA2、FOXM1的表达量及miR-34a与MTA2、FOXM1的相关性。[方法]1、通过生物合成剂miR-34a-mimics过表达miR-34a,通过CCK实验、平板克隆形成实验比较各组细胞克隆、增殖形成能力,综合评价miR-34a对肺腺癌A549、XWLC-05细胞克隆、增殖能力的影响。2、细胞划痕实验、Transwell迁移实验评价miR-34a对肺腺癌细胞A549、XWLC-05细胞迁移能力的影响。3、Transwel l侵袭实验检测各组细胞侵袭能力,评价mi R-34a对肺腺癌细胞A549、XWLC-05细胞侵袭能力的影响。4、通过生物信息学分析,初步筛选出MYC、MTA2、FOXM1、FOXP1、MDM4、MYB、ULBP2、SIRT1这八个与miR-34a相关性较大的靶基因,采用实时荧光定量聚合酶链反应法（RT-qPCR）检测miR-34a、MYC、MTA2、FOXM1、FOXP1、...
【文章来源】：昆明医科大学云南省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?Ａ：?ｍｉｍｉｃｓ转染肺腺癌ＸＷＬＣ－０５细胞４８ｈ后ＧＦＰ荧光表达图１００Ｘ??
Ａ?Ｂ??Ａ５４９?ＸＷＬＣ－０５??１５－，?．．．?１Ｓｉ??５?ｍｉｒ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ?ｃ?ｍｉｒ－３４ａ－ｍｉｍ＇ｃｓ??＇？Ｓ?ＮＣ?｜?／?ＮＣ??§１０．?－ＢＬＡＮＫ?－１〇．?／／?令?ＢＬＡＮＫ??〇?１?ｉ?ｉ?ｉ?■?ｉ?ｉ?〇?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｒ??Ｎ?＜Ｖ?Ｖ?＾?Ｋ?＜Ｖ?Ｖ?？）?ｆｃ??Ｔｉｍｅ?二?Ｄａｙ?匚?ＴｉｍｅｃＤａｙ］??图３?Ａ?ＣＣＫ－８方法检测ｍｉＲ－３４ａ对Ａ５４９细胞增殖能力的影响??图３?Ｂ?ＣＣＫ－８方法检测ｍｉＲ－３４ａ对ＸＷＬＣ－０５细胞增殖能力的影响??３．?ｍｉＲ－３４ａ可抑制Ａ５４９、ＸＷＬＣ－０５细胞的侵袭能力??本实验采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭法以Ｍａｔｒｉｇｅｌ胶来模拟体内基底膜成分，通过此方??法检测空白组、ＮＣ组、ｍｉＲ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ组细胞的侵袭能力；如图４所示，各组??穿透细胞数分别为：Ａ５４９细胞：空白组（９６０．?４?±?２１．?１７?Ｎ＝５）?／ＨＰ；?ＮＣ组（９９６．?？??±?３３．５６?Ｎ＝５）／ＨＰ；ｍｉＲ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ?组（２７９．８?±?２１．５６?Ｎ＝５）／ＨＰＱｍｉＲ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ??组侵袭细胞数显著低于空白组及ＮＣ组（Ｐ＜０．?０５），空白组与ＮＣ组间侵袭细胞数??差异无显著性（Ｐ＞〇．?０５）。??ＸＷＬＣ－０５?细胞：空白组（２５３．?０?±?１１．?５８?Ｎ＝５）?／ＨＰ；?ＮＣ?组（２７６．?８?±?５．?４２６?Ｎ＝５）??／ＨＰ；?ｍｉＲ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ?组（６５．?６０?±?１．６３１?Ｎ＝５）?
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本文编号：3341611
【文章来源】：昆明医科大学云南省
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?Ａ：?ｍｉｍｉｃｓ转染肺腺癌ＸＷＬＣ－０５细胞４８ｈ后ＧＦＰ荧光表达图１００Ｘ??
Ａ?Ｂ??Ａ５４９?ＸＷＬＣ－０５??１５－，?．．．?１Ｓｉ??５?ｍｉｒ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ?ｃ?ｍｉｒ－３４ａ－ｍｉｍ＇ｃｓ??＇？Ｓ?ＮＣ?｜?／?ＮＣ??§１０．?－ＢＬＡＮＫ?－１〇．?／／?令?ＢＬＡＮＫ??〇?１?ｉ?ｉ?ｉ?■?ｉ?ｉ?〇?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｒ??Ｎ?＜Ｖ?Ｖ?＾?Ｋ?＜Ｖ?Ｖ?？）?ｆｃ??Ｔｉｍｅ?二?Ｄａｙ?匚?ＴｉｍｅｃＤａｙ］??图３?Ａ?ＣＣＫ－８方法检测ｍｉＲ－３４ａ对Ａ５４９细胞增殖能力的影响??图３?Ｂ?ＣＣＫ－８方法检测ｍｉＲ－３４ａ对ＸＷＬＣ－０５细胞增殖能力的影响??３．?ｍｉＲ－３４ａ可抑制Ａ５４９、ＸＷＬＣ－０５细胞的侵袭能力??本实验采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭法以Ｍａｔｒｉｇｅｌ胶来模拟体内基底膜成分，通过此方??法检测空白组、ＮＣ组、ｍｉＲ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ组细胞的侵袭能力；如图４所示，各组??穿透细胞数分别为：Ａ５４９细胞：空白组（９６０．?４?±?２１．?１７?Ｎ＝５）?／ＨＰ；?ＮＣ组（９９６．?？??±?３３．５６?Ｎ＝５）／ＨＰ；ｍｉＲ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ?组（２７９．８?±?２１．５６?Ｎ＝５）／ＨＰＱｍｉＲ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ??组侵袭细胞数显著低于空白组及ＮＣ组（Ｐ＜０．?０５），空白组与ＮＣ组间侵袭细胞数??差异无显著性（Ｐ＞〇．?０５）。??ＸＷＬＣ－０５?细胞：空白组（２５３．?０?±?１１．?５８?Ｎ＝５）?／ＨＰ；?ＮＣ?组（２７６．?８?±?５．?４２６?Ｎ＝５）??／ＨＰ；?ｍｉＲ－３４ａ－ｍｉｍｉｃｓ?组（６５．?６０?±?１．６３１?Ｎ＝５）?
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