LncRNA CRNDE在肝细胞癌中的作用机制研究
发布时间：2021-08-18 10:35
背景:肝细胞癌（Hepatocelluar carcinoma,HCC）发生迅速,恶性程度非常高,预后极差。虽然目前肝癌的治疗手段不断进步,但每年仍有约75万人死于HCC。因此,揭示其潜在发病机制对于提高治疗效率尤为重要。研究发现多种长链非编码RNA（Long non-coding RNAs,lncRNAs）在肝癌中表达失调,其异常表达与肿瘤相关。目前已有研究报道lncRNA-结直肠肿瘤差异表达基因（colorectal neoplasia differentially expressed,CRNDE）在HCC中表达升高,但是其在HCC中的作用及具体分子机制尚不十分明确。目的:1.明确CRNDE在HCC中的作用。2.明确CRNDE与邻近基因IRX5的关系以及IRX5的生物学功能。3.阐明CRNDE调控IRX5的表达而行使其生物学作用的分子机制。方法:第一部分:CRNDE在肝癌中的表达及其生物学功能研究1.FISH技术检测CRNDE的定位情况。2.QRT-PCR检测肝癌组织和肝癌细胞系中CRNDE的表达。3.在肝癌细胞中转染CRNDE过表达质粒和感染sh-CRNDE慢病毒。克隆形成、MT...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：133 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
QRT-PCR分析CRNDE在肝癌组织与癌旁组织中的表达差异（N:癌旁组织，T:肿瘤组织）
T- PCR 分析 CRNDE 在肝癌细胞系与 L02 细胞中的表达rent expressions of CRNDE in HCC cell lines and L02 cellby qRT-PCR.胞内定位 lncRNA 依赖于其细胞定位而发挥作用，据此，我 在肝癌细胞内的定位情况。结果显示，在肝癌细 1.3)。E 干扰效率最佳的干扰序列 4 条干扰序列(shRNA1-shRNA4)及 sh-NC 序列转染集病毒液。然后将病毒液分别感染 SMMC7721 和方法检测每条 shRNA 对 CRNDE 的干扰效果序列的干扰效果最为明显（P<0.01）（图 1.4）sh-CRNDE)进行下一步实验。
41图 1.4 QRT-PCR 检测不同序列的 CRNDE-shRNA 干扰效果(**P<0.01)Figure 1.4 Interference effect of different CRNDE-shRNAs were analyzed byqRT-PCR(**P<0.01).2.5 验证 CRNDE 过表达转染效率将 pcDNA3.1-CRNDE 质粒转染 SMMC7721 和 HepG2 细胞后， 48ｈ后，提取细胞总 RNA。结果显示，转染了 pcDNA3.1-CRNDE 质粒的两种细胞中的CRNDE 表达明显升高，证明 CRNDE 过表达成功（图 1.5）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]lncRNA作为竞争性内源RNA调控肝癌及中药作用机制研究进展[J]. 史苗娟,郭鑫昕,商嘉玮,苏式兵,张辉. 上海中医药杂志. 2017(11)
[2]《肝细胞癌外科治疗方法的选择专家共识》解读[J]. 陈孝平,张志伟. 中华外科杂志. 2017 (01)
[3]Molecular targeted therapy for hepatocellular carcinoma:Current and future[J]. Jung Woo Shin,Young-Hwa Chung. World Journal of Gastroenterology. 2013(37)
本文编号：3349728
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：133 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
QRT-PCR分析CRNDE在肝癌组织与癌旁组织中的表达差异（N:癌旁组织，T:肿瘤组织）
T- PCR 分析 CRNDE 在肝癌细胞系与 L02 细胞中的表达rent expressions of CRNDE in HCC cell lines and L02 cellby qRT-PCR.胞内定位 lncRNA 依赖于其细胞定位而发挥作用，据此，我 在肝癌细胞内的定位情况。结果显示，在肝癌细 1.3)。E 干扰效率最佳的干扰序列 4 条干扰序列(shRNA1-shRNA4)及 sh-NC 序列转染集病毒液。然后将病毒液分别感染 SMMC7721 和方法检测每条 shRNA 对 CRNDE 的干扰效果序列的干扰效果最为明显（P<0.01）（图 1.4）sh-CRNDE)进行下一步实验。
41图 1.4 QRT-PCR 检测不同序列的 CRNDE-shRNA 干扰效果(**P<0.01)Figure 1.4 Interference effect of different CRNDE-shRNAs were analyzed byqRT-PCR(**P<0.01).2.5 验证 CRNDE 过表达转染效率将 pcDNA3.1-CRNDE 质粒转染 SMMC7721 和 HepG2 细胞后， 48ｈ后，提取细胞总 RNA。结果显示，转染了 pcDNA3.1-CRNDE 质粒的两种细胞中的CRNDE 表达明显升高，证明 CRNDE 过表达成功（图 1.5）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]lncRNA作为竞争性内源RNA调控肝癌及中药作用机制研究进展[J]. 史苗娟,郭鑫昕,商嘉玮,苏式兵,张辉. 上海中医药杂志. 2017(11)
[2]《肝细胞癌外科治疗方法的选择专家共识》解读[J]. 陈孝平,张志伟. 中华外科杂志. 2017 (01)
[3]Molecular targeted therapy for hepatocellular carcinoma:Current and future[J]. Jung Woo Shin,Young-Hwa Chung. World Journal of Gastroenterology. 2013(37)
本文编号：3349728
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3349728.html
