Ad5F11p-GFP对免疫细胞生物学特性的影响及Ad5F11p-WT1/CAR的构建和鉴定
发布时间：2021-08-22 02:20
嵌合抗原受体（Chimeric antigen receptors,CAR）由单链抗体的可变区和免疫细胞信号分子组成。将CAR以基因工程的方法表达于免疫细胞表面再过继输注的治疗方式称为CAR疗法,CAR疗法是一种新型的过继性免疫效应细胞治疗（ACT）策略,涉及到重新定向免疫细胞、诱导其攻击肿瘤细胞的过程。Ad5F11p-GFP载体是一种在Ad5（5型腺病毒）基础上建立的,携带报告基因GFP和Ad11p靶向性基因的新型重组腺病毒。本研究用Ad5F11p-GFP以不同的MOI（感染复数）感染原代NK细胞、CIK细胞以及免疫细胞系NK-92细胞;用流式细胞术检测荧光阳性细胞比例,进行荧光显微镜照相,用台盼蓝染色计数分析细胞的增殖,并用LDH法检测NK-92对白血病细胞系K562和HL-60的杀伤作用。结果表明:25MOI的Ad5F11p-GFP对NK-92的感染效率可以达到大约90%,200MOI Ad5F11p-GFP对CIK感染效率不到40%,Ad5F11p-GFP对原代NK细胞的感染效率更低;同一MOI Ad5F11p-GFP在48h和96h感染效率基本不变;感染Ad5F11p-GFP...
【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CAR的基本结构
图 2-1 骨架质粒 AdEasy-1/F1lp 的结构Figure 2-1 The struction of plasmid AdEasy - 1 / F1lp2.2.2 细胞的获得与培养1.Ficoll 法分离人外周血单个核细胞
图 2-2 原代免疫细胞的鉴定。Fig 2-2 Identification of primary immune cells.A：CIK 细胞 B：原代 NK图2-3为Ad5F11p-GFP 48h时不同MOIs感染三种免疫细胞所测的感染-92 最敏感，10MOI Ad5F11p-GFP 对 NK-92 细胞的感染效率是 68.9%，2
本文编号：3356803
【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CAR的基本结构
图 2-1 骨架质粒 AdEasy-1/F1lp 的结构Figure 2-1 The struction of plasmid AdEasy - 1 / F1lp2.2.2 细胞的获得与培养1.Ficoll 法分离人外周血单个核细胞
图 2-2 原代免疫细胞的鉴定。Fig 2-2 Identification of primary immune cells.A：CIK 细胞 B：原代 NK图2-3为Ad5F11p-GFP 48h时不同MOIs感染三种免疫细胞所测的感染-92 最敏感，10MOI Ad5F11p-GFP 对 NK-92 细胞的感染效率是 68.9%，2
本文编号：3356803
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