GEP100和胰腺导管腺癌周围神经侵犯的相关性分析及机制探讨

发布时间：2021-08-30 16:47

　　背景和目的:胰腺导管腺癌发病率逐年上升,5年生存率<5%。对于可切除无转移的患者,手术并术后辅助化疗是目前最有效的方法,但术后复发率高。周围神经侵犯是胰腺癌标志性病理改变之一,在PDAC中PNI的比例高达100%,是术后复发转移的主要原因之一。探讨胰腺癌周围神经侵犯的相关机制对其术后治疗及预防复发具有极其重要的意义。本研究探讨了GEP100在胰腺癌神经侵犯中的作用及相关机制。材料与方法:首先,利用胰腺癌组织标本,检测了GEP100和神经周围侵犯的相关性。调取2013至2017年间浙江大学医学院附属第二医院肝胆外科行WHIPPLE手术切除、病例资料完善、病理确诊为胰腺导管腺癌的47例病例,免疫组化技术进行GEP100标记染色,并统计学分析GEP100表达强度和胰腺癌神经周围侵犯的相关性。其次,利用Western Blot和RT-PCR技术检测GEP100蛋白和m RNA在不同胰腺癌细胞株中的表达,选择出用来实验的细胞株Panc-1;并利用sh RNA敲低GEP100在胰腺癌细胞株Panc-1中的表达,建立胰腺癌细胞（PCs）-小鼠背根神经节（DRG）共同培养模型检测GEP100对于... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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免疫组化染色:a.正常组织中GEP100弱表达；b.胰腺癌组织中GEP100高

浙江大学硕士学位论文结果153.2敲低GEP抑制了胰腺癌细胞向小鼠背根神经节的迁移能力3.2.1体外胰腺癌细胞-小鼠DRG共同培养模型的建立。图2胰腺癌细胞-DRG共同培养体系的建立：A：脊柱组织分离。B：找到DRG。C：分离DRG。D:DRG的培养。E：DRG神经纤维的生长。F：肿瘤细胞和DRG共同培养模型，上室为胰腺癌细胞，下室为DRG在基质胶中。3.2.2GEP100敲低抑制了胰腺癌细胞向DRG的迁移为了选取实验用的合适的细胞株，首先我们检测了不同细胞株中GEP100的表达情况。GEP100有两个剪切异构体，分子量分别为150kDa和120kDa。图3可见敲低GEP100抑制了胰腺癌细胞Panc-1向DRG的迁移。其中A显示在不同的细胞株中可以检测到GEP100的两个不同的剪切异构体的蛋白表达。B显示GEP100的mRNA也表达于各个细胞株中，而在Panc-1中的表达水平最高。因此，我们选取Panc-1开展后续的实验。C显示GEP100siRNA可以敲降两个剪切异构

浙江大学硕士学位论文 结果 体的蛋白表达。 为了检测 GEP100 敲降对于胰腺癌细胞向 DRG 迁移的影响，首先我们确认DRG 可以促进 Panc-1 细胞的迁移（如图 4），D 所示，DRG 可以促进胰腺癌细胞迁移能力提高 36%。而 GEP100siRNA 则抑制 Panc-1 细胞向 DRG 的迁移（E）。


本文编号：3373145