赖氨酸特异性去甲基化酶1在卵巢癌细胞自噬中的作用机理研究

发布时间：2021-09-02 00:20

　　目的本论文旨在探究赖氨酸特异性去甲基化酶1（LSD1）与自噬体蛋白LC3在卵巢癌组织中的表达以及相互关系,并探讨LSD1在人卵巢癌细胞自噬中的作用及其具体调控机制,为探寻卵巢癌发病机理及其分子靶向治疗提供一种新的思路。方法1、利用生物信息学,通过卵巢癌患者的癌症基因组图谱（TCGA）数据库、Oncomine数据库、Kaplan-Meier绘图仪等分析软件对卵巢癌组织中LSD1和LC3基因的表达进行分析。2、通过基因表达谱交互分析（GEPIA）软件对LSD1与LC3基因表达的相关性进行分析。3、利用GST-LC3B pulldown实验检测LSD1的SWIRM结构域与卵巢癌细胞内的自噬体蛋白LC3的相互作用。4、通过免疫荧光染色法检测LSD1与LC3在卵巢癌细胞内的定位情况。5、采用蛋白质免疫共沉淀法检测卵巢癌HO8910和SKOV3细胞内LC3蛋白的甲基化水平,以及LSD1对LC3甲基化的影响。6、在蛋白合成抑制剂cycloheximide（CHX）处理条件下,采用免疫印迹法检测LSD1敲低对LC3蛋白稳定性的影响。7、在溶酶体抑制剂Chloroquine（CQ）或蛋白酶体抑制剂MG1... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

自噬过程模式图[58]

赖氨酸特异性去甲基化酶1在卵巢癌细胞自噬中的作用机理研究4图1.1自噬过程模式图[58]Fig1.1Theautophagypatterndiagramshowsthestagesandmolecules图1.2自噬体蛋白LC3的成熟过程[59]Figure1.2MaturationprocessofautophagosomeproteinLC3自噬是一把双刃剑[60]，自噬既能在不利环境中维持肿瘤细胞存活，又能在肿瘤发展的不同阶段抑制其发生和转移[61]。自噬可能参与癌细胞的生存或死亡[62]。此外，自噬的正常调节有利于肿瘤抑制蛋白或者癌基因的表达[63]。mTOR和AMPK可以负调控抑癌因子，导致自噬的诱导和对癌变起始阶段的抑制[64]。相反，mTOR、I类PI3K和AKT可激活癌基因，从而抑制自噬，增强肿瘤形成[65]。

FIREHOSE分析LSD1(KDM1A)和LC3(MAP1LC3B)表达谱


本文编号：3377931