NMHCⅡA在前列腺癌转移中的作用及LncRNA调控轴筛选
发布时间：2021-09-02 23:06
前列腺癌是临床常见的男性恶性肿瘤之一,其发生发展与患者年龄以及雄激素水平密切相关,随着我国人民生活质量水平不断提高,人民平均寿命延长,我国前列腺癌的发病率呈现持续增长趋势。前列腺癌患者易发生转移与复发,这也是导致患者死亡的主要原因。因此探寻前列腺癌转移相关机制,对于前列腺癌的防治具有重要意义。非肌细胞肌球蛋白Ⅱ（Nonmuscle MyosinⅡ,NMⅡ）由两条重链（Nonmuscle myosin heavy chain,NMHC）、两条基本轻链（Essential Light Chain,ELC）和两条调节轻链（Regulatory Light Chain,RLC）组成。NMHC能够与肌动蛋白结合,通过自身磷酸化直接调控细胞运动。人类NMHCⅡ包括三种亚型,分别为NMHCⅡA、NMHCⅡB以及NMHCⅡC。NMHCⅡA由MYH9基因编码,在机体的免疫应答、细胞的迁移、黏附及肿瘤转移等病理生理过程中发挥重要作用。然而在前列腺癌中,NMHCⅡA是否能够影响癌细胞转移目前并不清楚。长非编码RNA（long noncoding RNA,lncRNA）是一类长度超过200单位核苷酸的非编码R...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Oncomine数据库分析NMHCⅡA编码基因MYH9的表达。
采用western Blot检测良性前列腺增生细胞系BPH-1、前列腺癌细胞系PC3及前列腺癌细胞系PC3高转移型亚细胞系PC3M中NMHCⅡA的蛋白表达水平,结果显示：与前列腺癌细胞PC3、PC3M相比,良性前列腺增生细胞BPH-1中NMHCⅡA表达水平较低,差别具有统计学意义（P＜0.05）；与前列腺癌细胞PC3M相比,前列腺癌细胞PC3中NMHCⅡA表达较低,差别具有统计学意义（P＜0.05）。（图3.2）3.2 稳定转染细胞株的构建、筛选及鉴定
利用含有 GFP、针对MYH9基因（NMHCⅡA编码基因）的慢病毒（sh MYH9）及含有 GFP的阴性对照病毒（空载）分别感染前列腺癌细胞PC3M,感染成功后细胞发绿色荧光。用嘌呤霉素筛选出稳定感染细胞后,扩增培养,使用荧光显微镜观察可见稳定感染的细胞发出绿色荧光,计算可得各组细胞感染效率均达到80%以上。（图3.3）3.2.2 稳定感染细胞株的鉴定
本文编号：3379904
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
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Oncomine数据库分析NMHCⅡA编码基因MYH9的表达。
采用western Blot检测良性前列腺增生细胞系BPH-1、前列腺癌细胞系PC3及前列腺癌细胞系PC3高转移型亚细胞系PC3M中NMHCⅡA的蛋白表达水平,结果显示：与前列腺癌细胞PC3、PC3M相比,良性前列腺增生细胞BPH-1中NMHCⅡA表达水平较低,差别具有统计学意义（P＜0.05）；与前列腺癌细胞PC3M相比,前列腺癌细胞PC3中NMHCⅡA表达较低,差别具有统计学意义（P＜0.05）。（图3.2）3.2 稳定转染细胞株的构建、筛选及鉴定
利用含有 GFP、针对MYH9基因（NMHCⅡA编码基因）的慢病毒（sh MYH9）及含有 GFP的阴性对照病毒（空载）分别感染前列腺癌细胞PC3M,感染成功后细胞发绿色荧光。用嘌呤霉素筛选出稳定感染细胞后,扩增培养,使用荧光显微镜观察可见稳定感染的细胞发出绿色荧光,计算可得各组细胞感染效率均达到80%以上。（图3.3）3.2.2 稳定感染细胞株的鉴定
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