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ERK1/2信号转导通路在胃泌素依赖型大肠癌组织中的作用及机制研究

发布时间:2021-09-09 07:10
  目的:本研究通过在体外细胞培养上,应用RNA干扰技术沉默ERK1/2基因后,分析其总的ERK基因的mRNAs、下游靶向蛋白表达、及其磷酸化水平变化,探讨胃泌素是否通过ERK1/2信号分子信号转导通路实现对大肠癌细胞增殖的调控,旨在进一步明确胃泌素调控大肠癌发生发展的分子机制,为部分激素依赖性大肠癌的个体化治疗提供理论依据。方法:通过慢病毒感染细胞构建CCKBR阳性的细胞稳转株CACO2,应用RTQ-PCR检测大肠癌细胞株CACO2中胃泌素受体(CCKBR)的表达情况,通过MTT法观察不同浓度五肽胃泌素对细胞生长的影响情况,由此确定五肽胃泌素作用于大肠癌细胞株CACO2浓度范围,实验共分四组:A组:为空白对照组,加入无血清培养基DMEM。B组:为阴性干扰组,无关阴性对照序列-shRNA转染细胞,4-6小时后换1%胎牛血清培养基DMEM,再培养24h。C组:为胃泌素组,加入含胃泌素(25.00mg/L)培养基DMEM。D组:为转染shRNA质粒干扰+胃泌素组,4-6小时后换含胃泌素(25.00 mg/L)培养基DMEM,再培养24h。由上海吉凯基因构建ERK1/2-shRNA,转染后观察转... 

【文章来源】:皖南医学院安徽省

【文章页数】:59 页

【学位级别】:硕士

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摘要
ABSTRACT
前言
研究材料和方法
    一、实验材料
    二、试剂名称及配制
    三、实验方法
    四、统计学分析
结果
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
作者简介及读研期间主要科研成果
致谢



本文编号:3391659

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