MCMV诱导鼠T细胞淋巴瘤EL4细胞凋亡及其作用机制

发布时间：2021-09-12 17:18

　　目的:观察鼠T细胞淋巴瘤细胞株EL4细胞能否被小鼠巨细胞病毒（Murine cytomegalovirus,MCMV）感染及其感染前后对EL4细胞形态的变化及凋亡的影响。方法:分别以感染复数（multiplicity of infection,MOI）为1、10、100的MCMV smith株感染EL4细胞,于感染后1、3和5 d收集细胞;设立正常对照组、MOI=1感染组、MOI=10感染组、MOI=100感染组;另外设有更昔洛韦（ganciclovir,GCV）组、MCMV+GCV组。应用瑞氏-姬姆萨染色后光学显微镜下观察细胞形态,台盼蓝抗染法计数细胞存活率,实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR,RT-qPCR）检测感染细胞内MCMV DNA基因拷贝数,流式细胞技术检测细胞凋亡,RT-qPCR检测感染细胞P53、P21、cFlip、Caspase8的mRNA表达水平,Western blot检测Caspase8、P53、BAX、BCL-2、Cleaved-Caspase3的蛋白表达水平。结果:瑞氏-姬姆萨染色后光学显微镜下可见被MCMV感染的EL4... 

【文章来源】：中国实验血液学杂志. 2018,26(04)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
材料和方法
    试剂与仪器
    细胞培养
    动物饲养
    MCMV病毒扩增
    实验步骤
    细胞形态学变化的相差显微镜术观察
    细胞存活率的台盼蓝染色法测定
    MCMV DNA和感染ELA细胞相关基因实时荧光定量PCR检测
    细胞凋亡的Annexin V FITC/PI双染染色检测
    蛋白表达的Western blot检测
    统计学分析
结果
    细胞形态的变化
    细胞内MCMV DNA拷贝数变化
    MCMV感染对EL4细胞存活率、凋亡的影响
    MCMV感染EL4细胞后凋亡蛋白P53和Caspase8、周期蛋白P21、抗凋亡蛋白c Flip mRNA表达水平的影响
    MCMV感染EL4细胞凋亡蛋白P53、BAX/BCL-2、Cleaved-caspase3、Caspase8的表达水平
    更昔洛韦 (GCV) 对MCMV感染的EL4细胞凋亡及相关凋亡蛋白的影响
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Human cytomegalovirus protects multiple myeloma cell line KM3 cells from apoptosis induced by growth factor withdrawal[J]. 魏国庆,林茂芳,黄河,蔡真.  Chinese Medical Journal. 2004(06)



本文编号：3394626