假尿嘧啶合成酶PUS7在胃癌发生发展中的作用及机制研究

发布时间：2021-09-12 18:39

　　胃癌是全球高发病率、高致死率的恶性肿瘤之一,虽然近年来全球胃癌的发病人数逐年递减,但是中国胃癌的发病率和死亡率却居高不下。由于早期胃癌常常没有明显的症状,患者就诊时多为中晚期,其预后一般较差。因此,探索胃癌发生发展过程中的分子调控机制,有助于发现胃癌早期诊断的生物标记物和治疗靶标,对于提高胃癌患者生存率具有重要意义。RNA修饰是指发生在RNA碱基上的各种化学修饰,可影响RNA的稳定、代谢和翻译等过程。RNA修饰在生物体的正常生理功能调控中发挥重要作用,其异常与疾病的发生发展密切相关。假尿嘧啶修饰（pseudouridylation）是最早被发现、丰度最高的RNA修饰类型之一。假尿嘧啶合成酶（pseudouridine synthase,PUS）是能够将尿嘧啶转换成假尿嘧啶的酶,可在RNA代谢和细胞生物学功能调节中发挥重要的作用。然而,假尿嘧啶修饰在恶性肿瘤中的调控作用及其分子机制尚未有研究。我们在胃癌样本中分析所有已报道的假尿嘧啶合成酶的m RNA表达水平,发现与癌旁组织相比,胃癌组织中假尿嘧啶合成酶PUS7的m RNA表达存在显著的表达差异。同时,我们利用免疫组化方法在组织芯片（90... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

1PUS7mRNA在胃癌临床样本中表达升高

浙江大学硕士学位论文实验结果343.1.2PUS7蛋白在胃癌样本中显著低表达假尿嘧啶合成酶主要通过其蛋白来发挥生物学功能，在检测PUS7在胃癌组织中的RNA表达水平变化后，我们进一步检测其蛋白水平的变化。首先，我们对30对胃癌及癌旁蛋白样品进行Westernblot检测，并对PUS7的蛋白水平进行定量分析。结果显示，相较于癌旁组织，PUS7的蛋白水平在胃癌组织显著下降（图3.1.2A-B）。同时，我们还利用免疫组化方法在组织芯片中检测PUS7的蛋白表达水平，结果显示，在胃癌组织中PUS7的染色强度较正常组织较弱，提示PUS7蛋白的表达在临床组织胃癌样本中，较癌旁组织有下降趋势（图3.1.3A）。针对90对胃癌及其癌旁组织样本的数据进行统计分析，发现胃癌组织中的PUS7蛋白显著低于癌旁组织（图3.1.3B）。综上所述，PUS7mRNA在胃癌组织中高表达，其蛋白在胃癌组织中显著低表达。图3.1.2PUS7蛋白在胃癌临床样本中的表达情况。利用Westernblot技术检测样本中PUS7蛋白表达情况，以β-actin作为内参。图中随机选取三对展示，并将30对样本中PUS7蛋白表达变化进行统计后，绘制成表格。（B）将30对样本蛋白表达绘制成柱状图，坐标轴上方表示癌组织中PUS7表达上调，坐标轴下方表示癌组织中PUS7表达下调。

浙江大学硕士学位论文实验结果35图3.1.3PUS7蛋白在胃癌临床组织芯片中的表达情况。（A）利用免疫组化方法在胃癌组织芯片中检测PUS7的蛋白表达情况。红棕色为PUS7抗体染色区域，蓝紫色为核染区域。（B）统计胃癌组织样本中PUS7蛋白水平染色强度，将结果绘制成配对统计图。每项实验独立重复三次，**表示P小于0.01，统计学差异显著（Student"sttest)。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Recent developments and innovations in gastric cancer[J]. Mehmet Mihmanli,Enver Ilhan,Ufuk Oguz Idiz,Ali Alemdar,Uygar Demir.  World Journal of Gastroenterology. 2016(17)



本文编号：3394742