结肠癌中CXCR7的表达与超声造影参数相关性及其促血管生成机制的研究
发布时间：2021-09-17 11:39
目的:结肠癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,趋化因子受体也在各种肿瘤的发生和转移中有重要作用。趋化因子受体7（Chemokine receptor 7,CXCR7）是7次跨膜G蛋白耦联受体超家族,具有趋化因子受体的典型结构,在许多肿瘤中均有表达。既往有证据表明CXCR7促进结肠癌的血管生成,但这一过程中涉及的机制尚不清楚。本研究的目的在于研究CXCR7在结肠癌中的功能。本研究通过体内和体外同时验证,并运用超声造影（Contrast-enhanced ultrasound,CEUS）技术探讨在小鼠结肠癌异种移植瘤中过表达或沉默CXCR7后灌注参数与微血管密度（microvessel density,MVD）之间的相关性。研究方法:本研究以正常结肠细胞（HCoEpic）和结肠癌RKO、HCT116、SW480、Caco-2细胞系为研究对象。首先,通过qRT-PCR和Western Blot法检测正常结肠细胞和结肠癌细胞中CXCR7的表达。其次,对筛选出的两种CXCR7表达最高和表达最低的细胞系进行沉默或过表达并通过qRT-PCR和Western Blot法检测其转染效率。再者,通过CCK-...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：94 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
HCoEpic、RKO、HCT116、SW480和Caco-2细胞中CXCR7的表达
中国医科大学博士学位论文16图1.2过表达或沉默的结肠癌细胞中CXCR7的表达A：qRT-PCR和Westernblot法检测沉默CXCR7的SW480细胞中mRNA和蛋白的表达水平降低。B：qRT-PCR和Westernblot法检测过表达CXCR7的Caco-2细胞中mRNA和蛋白的表达水平增高。数据以均数±标准差表示（n=3）。与各组阴性对照组相比，*P＜0.05、**P＜0.01和***P＜0.001为差异有统计学意义。3.2过表达或沉默CXCR7的结肠癌细胞的增殖作用3.2.1EdU法检测结肠癌细胞的增殖作用为了研究过表达或沉默CXCR7的结肠癌细胞对增殖的影响，通过EdU检测过表达或沉默CXCR7的结肠癌细胞的增殖活性。结果证明，与阴性对照组相比，沉默CXCR7的SW480细胞的EdU阳性细胞的数量显著减少（图1.3A）。相反，与阴性对照组相比，过表达CXCR7的Caco-2细胞的EdU阳性细胞的数量显著增加（图1.3B）。此外，我们注意到阴性对照组和空白对照组的结肠癌细胞之间没有显著差异（P＞0.05）。图1.3EdU法检测结肠癌细胞的增殖作用A：左图：沉默CXCR7的SW480细胞的EdU阳性细胞的代表性图像，右图：EdU阳性细胞的定量测量表明CXCR7的沉默减少了SW480细胞的增殖。B：左图：过表达CXCR7
中国医科大学博士学位论文183.3Transwell法检测过表达或沉默CXCR7的结肠癌细胞的迁移作用通过Transwell迁移实验结果显示，与阴性对照组相比，沉默CXCR7的SW480细胞的迁移能力显著降低（图1.5A）。相反，与阴性对照组相比，过表达CXCR7的Caco-2细胞的迁移能力显著增加（图1.5B）。此外，阴性对照组与空白对照组之间的差异不显著（P＞0.05）。图1.5Transwell迁移实验检测结肠癌细胞的迁移能力A：上图：沉默CXCR7的SW480细胞迁移的代表性图像；下图：迁移细胞数量的定量测量表明CXCR7的沉默减少了SW480细胞的迁移。B：上图：过表达CXCR7的Caco-2细胞迁移的代表性图像；下图：迁移细胞数量的定量测量表明CXCR7的过表达增加了Caco-2细胞的迁移。数据以均数±标准差表示（n=3）。与各组阴性对照组相比，*P＜0.05有统计学意义。放大倍数×200。3.4过表达或沉默CXCR7的肿瘤细胞对HUVEC增殖的影响3.4.1EdU法检测肿瘤细胞对HUVEC增殖的影响为了研究CXCR7对HUVEC增殖的可能影响，通过EdU检测沉默CXCR7的SW480细胞和过表达CXCR7的Caco-2细胞共培养的HUVEC的增殖活性。结果证明，与阴性对照组相比，与沉默CXCR7的SW480细胞共培养的EdU阳性HUVEC细胞的数量显著减少（图1.6A）。相反，与阴性对照组相比，与过表
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effects of CXCR7-neutralizing antibody on neurogenesis in the hippocampal dentate gyrus and cognitive function in the chronic phase of cerebral ischemia[J]. Bing-Chao Dong,Mei-Xuan Li,Xiao-Yin Wang,Xi Cheng,Yu Wang,Ting Xiao,Jukka Jolkkonen,Chuan-Sheng Zhao,Shan-Shan Zhao. Neural Regeneration Research. 2020(06)
[2]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[3]不同分子分型乳腺癌组织中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4和CXCR7的表达及临床意义[J]. 吴唯,钱立元,戴荆,丁波泥,陈学东. 中南大学学报(医学版). 2017(02)
本文编号：3398645
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：94 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
HCoEpic、RKO、HCT116、SW480和Caco-2细胞中CXCR7的表达
中国医科大学博士学位论文16图1.2过表达或沉默的结肠癌细胞中CXCR7的表达A：qRT-PCR和Westernblot法检测沉默CXCR7的SW480细胞中mRNA和蛋白的表达水平降低。B：qRT-PCR和Westernblot法检测过表达CXCR7的Caco-2细胞中mRNA和蛋白的表达水平增高。数据以均数±标准差表示（n=3）。与各组阴性对照组相比，*P＜0.05、**P＜0.01和***P＜0.001为差异有统计学意义。3.2过表达或沉默CXCR7的结肠癌细胞的增殖作用3.2.1EdU法检测结肠癌细胞的增殖作用为了研究过表达或沉默CXCR7的结肠癌细胞对增殖的影响，通过EdU检测过表达或沉默CXCR7的结肠癌细胞的增殖活性。结果证明，与阴性对照组相比，沉默CXCR7的SW480细胞的EdU阳性细胞的数量显著减少（图1.3A）。相反，与阴性对照组相比，过表达CXCR7的Caco-2细胞的EdU阳性细胞的数量显著增加（图1.3B）。此外，我们注意到阴性对照组和空白对照组的结肠癌细胞之间没有显著差异（P＞0.05）。图1.3EdU法检测结肠癌细胞的增殖作用A：左图：沉默CXCR7的SW480细胞的EdU阳性细胞的代表性图像，右图：EdU阳性细胞的定量测量表明CXCR7的沉默减少了SW480细胞的增殖。B：左图：过表达CXCR7
中国医科大学博士学位论文183.3Transwell法检测过表达或沉默CXCR7的结肠癌细胞的迁移作用通过Transwell迁移实验结果显示，与阴性对照组相比，沉默CXCR7的SW480细胞的迁移能力显著降低（图1.5A）。相反，与阴性对照组相比，过表达CXCR7的Caco-2细胞的迁移能力显著增加（图1.5B）。此外，阴性对照组与空白对照组之间的差异不显著（P＞0.05）。图1.5Transwell迁移实验检测结肠癌细胞的迁移能力A：上图：沉默CXCR7的SW480细胞迁移的代表性图像；下图：迁移细胞数量的定量测量表明CXCR7的沉默减少了SW480细胞的迁移。B：上图：过表达CXCR7的Caco-2细胞迁移的代表性图像；下图：迁移细胞数量的定量测量表明CXCR7的过表达增加了Caco-2细胞的迁移。数据以均数±标准差表示（n=3）。与各组阴性对照组相比，*P＜0.05有统计学意义。放大倍数×200。3.4过表达或沉默CXCR7的肿瘤细胞对HUVEC增殖的影响3.4.1EdU法检测肿瘤细胞对HUVEC增殖的影响为了研究CXCR7对HUVEC增殖的可能影响，通过EdU检测沉默CXCR7的SW480细胞和过表达CXCR7的Caco-2细胞共培养的HUVEC的增殖活性。结果证明，与阴性对照组相比，与沉默CXCR7的SW480细胞共培养的EdU阳性HUVEC细胞的数量显著减少（图1.6A）。相反，与阴性对照组相比，与过表
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effects of CXCR7-neutralizing antibody on neurogenesis in the hippocampal dentate gyrus and cognitive function in the chronic phase of cerebral ischemia[J]. Bing-Chao Dong,Mei-Xuan Li,Xiao-Yin Wang,Xi Cheng,Yu Wang,Ting Xiao,Jukka Jolkkonen,Chuan-Sheng Zhao,Shan-Shan Zhao. Neural Regeneration Research. 2020(06)
[2]Cancer incidence and mortality in China, 2014[J]. Wanqing Chen,Kexin Sun,Rongshou Zheng,Hongmei Zeng,Siwei Zhang,Changfa Xia,Zhixun Yang,He Li,Xiaonong Zou,Jie He. Chinese Journal of Cancer Research. 2018(01)
[3]不同分子分型乳腺癌组织中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4和CXCR7的表达及临床意义[J]. 吴唯,钱立元,戴荆,丁波泥,陈学东. 中南大学学报(医学版). 2017(02)
本文编号：3398645
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