17-AAG-M诱导人非小细胞肺癌A549细胞差异表达miRNA的筛选及其放射敏感性的影响
发布时间：2021-10-05 02:19
目的筛选经17-AAG-M预处理的人非小细胞肺癌A549细胞在X-ray作用下差异表达的miRNA;分析出适用于联合17-AAG-M、X-ray以治疗NSCLC的miRNA;研究其在A549细胞中的作用和对放射反应能力的影响,评估其与17-AAG-M和X-ray联合治疗NSCLC的潜在适用性;并分析其对A549细胞电离辐射后DNA损伤反应（DDR）的影响。方法溶剂透析法制备17-AAG单包胶束（17-AAG-M）。高分辨透射电子显微镜观察胶束的形态特征及分布,纳米粒度及zeta电位分析仪测定胶束的粒径大小和分散度,紫外分光光度法测定浓度。芯片实验筛选经17-AAG-M预处理的A549细胞在4Gy照射后24h差异表达的miRNA。通过TCGA数据库分析可能涉及放射反应的兴趣miRNA在肿瘤中的表达情况及与LUAD临床参数的关系,预测出适用于联合17-AAG-M和X-ray以共同治疗肺癌的miRNA（目标miRNA）。利用miRbase数据库预测目标miRNA:hsa-miR-30a-3p的靶基因以进行GO及KEGG分析,通过qPCR检测A549细胞中hsa-miR-30a-3p在17-A...
【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．３．１１７－ＡＡＧ－Ｍ的表征（左：１７－ＡＡＧ－Ｍ的粒径分布图；右：１７－ＡＡＧ－Ｍ的电??
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胞差异表达ｍｉＲＮＡ的筛选及其放射敏惑性的影响?第二部分??２．１０Ｇｙ降至１．７８Ｇｙ，说明过表达ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ后Ａ５４９细胞的平均致死照射剂??量降低，细胞对Ｘ－ｒａｙ的敏感性増加，放射増敏比为１．１８＞１，ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ具??有放射增敏作用（表６）。??鉴于ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ是在１７－ＡＡＧ－Ｍ预处理的Ａ５４９细胞中筛选出与Ｘ－ｒａｙ??相关，对ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ联合１７－ＡＡＧ－Ｍ后的放射敏感性灘响亦进行了．实验：分析＇。??从图２．３．３和表５胃以看出，在４Ｇｙ、６Ｇｙ、８Ｇｙ的照射剂量下，与ＮＣ组相比，??联合组的细胞存活分数更低（ｐ＜〇．〇５）。联合组的以降至１．４２Ｇｙ，放射增敏比为??１．４８＞１?（表６）。说明ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ联合１７－ＡＡＧ－Ｍ后，Ａ５４９细胞的放射敏感??性更强。但值得注意的是克服肩区所需的准阈剂量Ｄｑ有所增大，说明联合１７－??ＡＡＧ－Ｍ后在较低的照射剂量下可能存在一定的放射抗性。??”?令?ＮＣ??ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ??ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ－１７－ＡＡＧ－Ｍ??Ｉ，??０．０１：??Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０?２?４?６?８??Ｍ?ｔｔ?（Ｃｙ）??图２．３．３过表达ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ对Ａ５４９细胞放射敏感性的影响??表５不同处理条件下Ａ５４９细胞的存活分数（％）（又土ＳＤ）???分组?〇Ｇｙ?２Ｇｙ?４Ｇｙ?６Ｇｙ?８Ｇｙ??ＮＣ?１００?土８．８０?５３．９６±５．０６ａ?２６．３０士?０．６３ａ?７．１１?士?０．３１ａ?１．３８?士?０．１６
【参考文献】：
期刊论文
[1]17AAG-Cypate聚合物胶束对A549细胞裸鼠移植瘤抑瘤效果的体内实验研究[J]. 彭逸茹,陈成龙,张楠,薛莲,于冬. 中华放射肿瘤学杂志. 2019(12)
[2]非小细胞肺癌早期诊断的潜在生物标志物:血浆miRNA-23a和miRNA-451[J]. 崔胜金,曹朝鹏,郭伟权,余蕙君,黄荣,吴云风. 南方医科大学学报. 2019(06)
[3]Down-regulation of mi R-30a-3p/5p promotes esophageal squamous cell carcinoma cell proliferation by activating the Wnt signaling pathway[J]. Bo Qi,Yan Wang,Zhi-Jun Chen,Xiang-Nan Li,Yu Qi,Yang Yang,Guang-Hui Cui,Hai-Zhou Guo,Wei-Hao Li,Song Zhao. World Journal of Gastroenterology. 2017(45)
[4]17AAG-cypate聚合物胶束对肺癌A549细胞放射敏感性影响[J]. 吴晨洁,薛莲,陈成龙,彭逸茹,罗欢欢,于冬. 中华放射肿瘤学杂志. 2017 (06)
[5]微小RNA与宫颈癌放疗敏感性的研究进展[J]. 王梦洁,刘阳晨. 癌症进展. 2016(09)
[6]肺癌侵袭和转移分子机制研究进展[J]. 刘贤忠,张丽婷,童卫泉,王帅,徐志波,陈芳. 中国医学科学院学报. 2016(01)
[7]药物17-AAG对人肺癌细胞系的放射敏感性影响[J]. 王叶,薛莲,于冬. 中华放射肿瘤学杂志. 2015 (04)
[8]miRNA的生物合成过程[J]. 李伟,金由辛. 生物化学与生物物理进展. 2005(08)
本文编号：3418804
【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．３．１１７－ＡＡＧ－Ｍ的表征（左：１７－ＡＡＧ－Ｍ的粒径分布图；右：１７－ＡＡＧ－Ｍ的电??
＿样的，Ｘ－ｒａｙ也能够增加ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ对１７－ＡＡＧ－Ｍ预??处理的Ａ５４９细胞的抑制效果（ｐ＜０．０５）。??以上ＭＴＴ实验结果表明，过表达ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ可以抑制Ａ５４９细胞活力，??并且在Ｘ－ｒａｙ和１７－ＡＡＧ－Ｍ作用下细胞毒性更强。??Ｉ￣—Ｉ?Ｉ—￣Ｉ??１００－１?｜?｜?１００－１??ｒ＿?■?■?ｒ＿?■?＿?了??『■?■?■?■?＿４。．?■?■??Ｍｕｍ?，?ｉｍｍｍ?．??Ｖ？７?／／／／??／?／?，、／??图２．３，１过表达ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ对Ａ５４９细胞活力的影响??注：Ｐ＜０．０５?力?＜０．０１?力?＜０．００１?力?＜０．０００１?力?“＊＊＊＊?”；误差线：均数土标准差??２．３．２过表达ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ对Ａ５４９细月包增殖的影响??通过对ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ的ＧＯ分析发现，某参与１调节了细胞增殖过靡。为了??确定ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ对Ａ５４９细胞增殖的影晌，并进一步检测其联合Ｘ－ｒａｙ、１７－??ＡＡＧ－Ｍ后的效应进行了克隆形成实验。如图２．３．２所示，ＮＣ组、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－??３ｐ?组、ＮＣ＋Ｘ－ｒａｙ?组和?ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ＋Ｘ－ｒａｙ?组党隆形成率分剔为?９４．００％、??２９??
胞差异表达ｍｉＲＮＡ的筛选及其放射敏惑性的影响?第二部分??２．１０Ｇｙ降至１．７８Ｇｙ，说明过表达ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ后Ａ５４９细胞的平均致死照射剂??量降低，细胞对Ｘ－ｒａｙ的敏感性増加，放射増敏比为１．１８＞１，ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ具??有放射增敏作用（表６）。??鉴于ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ是在１７－ＡＡＧ－Ｍ预处理的Ａ５４９细胞中筛选出与Ｘ－ｒａｙ??相关，对ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ联合１７－ＡＡＧ－Ｍ后的放射敏感性灘响亦进行了．实验：分析＇。??从图２．３．３和表５胃以看出，在４Ｇｙ、６Ｇｙ、８Ｇｙ的照射剂量下，与ＮＣ组相比，??联合组的细胞存活分数更低（ｐ＜〇．〇５）。联合组的以降至１．４２Ｇｙ，放射增敏比为??１．４８＞１?（表６）。说明ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ联合１７－ＡＡＧ－Ｍ后，Ａ５４９细胞的放射敏感??性更强。但值得注意的是克服肩区所需的准阈剂量Ｄｑ有所增大，说明联合１７－??ＡＡＧ－Ｍ后在较低的照射剂量下可能存在一定的放射抗性。??”?令?ＮＣ??ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ??ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ－１７－ＡＡＧ－Ｍ??Ｉ，??０．０１：??Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０?２?４?６?８??Ｍ?ｔｔ?（Ｃｙ）??图２．３．３过表达ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ对Ａ５４９细胞放射敏感性的影响??表５不同处理条件下Ａ５４９细胞的存活分数（％）（又土ＳＤ）???分组?〇Ｇｙ?２Ｇｙ?４Ｇｙ?６Ｇｙ?８Ｇｙ??ＮＣ?１００?土８．８０?５３．９６±５．０６ａ?２６．３０士?０．６３ａ?７．１１?士?０．３１ａ?１．３８?士?０．１６
【参考文献】：
期刊论文
[1]17AAG-Cypate聚合物胶束对A549细胞裸鼠移植瘤抑瘤效果的体内实验研究[J]. 彭逸茹,陈成龙,张楠,薛莲,于冬. 中华放射肿瘤学杂志. 2019(12)
[2]非小细胞肺癌早期诊断的潜在生物标志物:血浆miRNA-23a和miRNA-451[J]. 崔胜金,曹朝鹏,郭伟权,余蕙君,黄荣,吴云风. 南方医科大学学报. 2019(06)
[3]Down-regulation of mi R-30a-3p/5p promotes esophageal squamous cell carcinoma cell proliferation by activating the Wnt signaling pathway[J]. Bo Qi,Yan Wang,Zhi-Jun Chen,Xiang-Nan Li,Yu Qi,Yang Yang,Guang-Hui Cui,Hai-Zhou Guo,Wei-Hao Li,Song Zhao. World Journal of Gastroenterology. 2017(45)
[4]17AAG-cypate聚合物胶束对肺癌A549细胞放射敏感性影响[J]. 吴晨洁,薛莲,陈成龙,彭逸茹,罗欢欢,于冬. 中华放射肿瘤学杂志. 2017 (06)
[5]微小RNA与宫颈癌放疗敏感性的研究进展[J]. 王梦洁,刘阳晨. 癌症进展. 2016(09)
[6]肺癌侵袭和转移分子机制研究进展[J]. 刘贤忠,张丽婷,童卫泉,王帅,徐志波,陈芳. 中国医学科学院学报. 2016(01)
[7]药物17-AAG对人肺癌细胞系的放射敏感性影响[J]. 王叶,薛莲,于冬. 中华放射肿瘤学杂志. 2015 (04)
[8]miRNA的生物合成过程[J]. 李伟,金由辛. 生物化学与生物物理进展. 2005(08)
本文编号：3418804
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