miR-200c通过靶向调节AHNAK抑制胰腺癌细胞的侵袭

发布时间：2021-10-10 05:34

　　目的:探讨在胰腺癌细胞中,miRNA-200c（miR-200c）对AHNAK基因的表达及细胞侵袭能力的影响。方法:在胰腺癌细胞SW1990和PANC-1中,转染miR-200c类似物（miR-200c mimics）及其阴性对照（Scramble）24小时后,利用实时定量PCR检测miR-200c是否过表达成功;采用Transwell侵袭实验,来检测miR-200c过表达后SW1990和PANC-1细胞侵袭力的变化;采用TargetScan、PicTar和miranda数据库预测miR-200c的靶基因。使用miranda数据库预测靶基因AHNAK的3’非翻译区（3’UTR）与miR-200c的结合位点;构建靶基因AHNAK的3’UTR（野生型3’UTR）与miR-200c的结合位点突变的序列（突变型3’UTR）。在SW1990及PANC-1细胞中,按照上述分组进行转染实验,按照Dual-luciferase试剂盒说明书检测萤火虫和海肾荧光素酶活性的变化,验证miR-200c与AHNAK的3’非翻译区（3’UTR）的结合能力;并用蛋白免疫印迹（Western Blotting）实验检... 

【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
前言
文献综述
第一章 实验材料和方法
    (一)实验材料
        1.研究对象
        2.实验试剂
        3.仪器设备
        4.试剂配制
    (二)实验方法
        1.细胞培养
        2.细胞转染
        3.实时定量PCR
        4.Transwell细胞侵袭实验
        5.生物信息学方法预测miR-200c靶基因
        6.双荧光素酶报告基因实验
        7.蛋白免疫印迹
        8.统计学分析
第二章 实验结果
    2.1 实时定量PCR检测miR-200c的表达
    2.2 miR-200c过表达对胰腺癌细胞侵袭的影响
    2.3 AHNAK是 miR-200c的靶标
    2.4 miR-200c过表达下调了AHNAK蛋白的表达
第三章 讨论
结论
本次实验的意义和不足
致谢
参考文献
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]Noncoding RNAs and pancreatic cancer[J]. Juan-Fei Peng,Yan-Yan Zhuang,Feng-Ting Huang,Shi-Neng Zhang.  World Journal of Gastroenterology. 2016(02)



本文编号：3427751