Snail/FOXK1/Cyr61信号轴参与调控结直肠癌的EMT及转移
发布时间：2021-10-22 09:38
研究背景和意义越来越多的证据表明,上皮间质转化（EMT）是一个公认的从一个分化的上皮细胞可以转化为去分化状态迁移的间质表型的过程,它在胚胎发育、器官纤维化、伤口的愈合和肿瘤的转移的调控起着至关重要的作用。EMT的关键过程包括降低细胞与细胞间粘附分子E-cadherin,间质蛋白如Vimentin、N-cadherin的表达量增加,激活经典Wnt/β-catenin信号通路。新的证据表明EMT在结直肠癌侵袭和转移能力的获得中起着至关重要的作用。一些转录因子（TF）,如Twist,Snail,Slug,ZEBl/2作为主要的EMT的诱导因素,直接或间接抑制E-cadherin在结肠癌细胞中的表达。所以,靶向治疗抑制EMT对结直肠癌患者有重大意义。叉头框（Forkheadbox,FOX）K1由翼状螺旋的DNA结合结构域和N-末端和C-末端转录域构成。FOXK1是一个新的可能能够预测EMT的转录因子。先前有研究发现FOXK1是结直肠癌的抑癌基因。我们课题组的前期研究发现FOXK1诱导肿瘤细胞EMT促进结直肠癌细胞的侵袭转移能力。Snail也是一种锌指转录因子,通过直接抑制E-cadherin的...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１?（Ａ）Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ检测８对新鲜收集的结直肠癌患者组织ＦＯＸＫ１和Ｓｎａｉｌ的表达；（Ｂ）??通过比较各条带的灰度值来定量相蛋白表达的相关性；（Ｃ）Ｓｐｅａｒｍａｎ’ｓ相关分析被用于确定??
图１－２?（Ａ）Ｗｅｓｔｅｍ?ｂｌｏｔ分析Ｆ０ＸＫ１和Ｓｎａｉｌ的表达在显示的细胞系中的表达
?Ｌ〇Ｖ〇?ＳＷ１１１６??图１－２?（Ａ）Ｗｅｓｔｅｍ?ｂｌｏｔ分析Ｆ０ＸＫ１和Ｓｎａｉｌ的表达在显示的细胞系中的表达。??Ｆｉｇｕｒｅｌ－２．?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?Ｆ０ＸＫ１?ａｎｄ?Ｓｎａｉｌ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ＣＲＣ?ｃｅｌｌｓ．??４．３?ＦＯＸＫｌ是转录因子ＳｎａＵ的转录激活靶点??４．３．１?ＣｈＩＰ实验确定Ｆ０ＸＫ１启动子片段中Ｓｎａｉｌ结合位点??我们利用ＴＦｓｅａｒｃｈ软件分析得到在Ｆ０ＸＫ１转录子启动子转录其实位点上??游５００ｂｐ内存在两个ＧＴ盒，分别位于－４７６？４８２（ＧＴ盒ｌ，ＦＯＸＫｌ－ｌ），－５９卜５９７（ＧＴ??盒２，?Ｆ０ＸＫ１－２），为了证明Ｆ０ＸＫ１与Ｓｎａｉｌ结合，我们通过染色质免疫共沉淀??（ＣｈＩＰ）实验证明Ｓｎａｉｌ可以和Ｆ０ＸＫ１启动子结合，如图所示，我们分别采用??ＳＷ８０及ＬｏＶｏ两者细胞，用ＣｈＩＰ实验后获得的ＤＮＡ产物进行ＰＣＲ实验，ＰＣＲ??产物进行琼脂糖跑胶实验，结果表明：Ｓｎａｉｌ能与ＦＯＸＫ１启动子区域内的ＧＴ盒??１结合。??Ｆ０ＸＫ１?ｐｒｏｍｏｔｅｒ??Ｉｎｐｕｔ?ＩｇＧ?Ｓｎａｉｌ?Ｉｎｐｕｔ?ＩｇＧ?Ｓｎａｉｌ??ｂＩｂ＾ｂ??ＳＷ４８０?ＬｏＶｏ??图１－３使用Ｓｎａｉｌ抗体或对照ＩｇＧ进行染色质免疫沉淀（ＣｈＩＰ）。Ｓｎａｉｌ结合的ＦＯＸＫ１启??３４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]miRNA调控恶性黑色素瘤细胞上皮-间充质转化的分子网络及机制[J]. 王冬,李永君,丁楠,王均云,杨琼,杨雅冉,李艳明,方向东,赵华. 遗传. 2015(07)
[2]Cyr61和WISP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义[J]. 吕建发,邹友成,张纯伟,毛志福. 中国肺癌杂志. 2010(12)
本文编号：3450840
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１?（Ａ）Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ检测８对新鲜收集的结直肠癌患者组织ＦＯＸＫ１和Ｓｎａｉｌ的表达；（Ｂ）??通过比较各条带的灰度值来定量相蛋白表达的相关性；（Ｃ）Ｓｐｅａｒｍａｎ’ｓ相关分析被用于确定??
图１－２?（Ａ）Ｗｅｓｔｅｍ?ｂｌｏｔ分析Ｆ０ＸＫ１和Ｓｎａｉｌ的表达在显示的细胞系中的表达
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【参考文献】：
期刊论文
[1]miRNA调控恶性黑色素瘤细胞上皮-间充质转化的分子网络及机制[J]. 王冬,李永君,丁楠,王均云,杨琼,杨雅冉,李艳明,方向东,赵华. 遗传. 2015(07)
[2]Cyr61和WISP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义[J]. 吕建发,邹友成,张纯伟,毛志福. 中国肺癌杂志. 2010(12)
本文编号：3450840
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