Gefitinib酸性改造增敏其对非小细胞肺癌疗效
发布时间：2021-10-23 16:04
背景:全世界的统计数据表明,肺癌仍然是导致癌症发生率和癌症死亡率较高的主要原因（占癌症死亡总数的18.4%）和最常被诊断出的癌症类型（占癌症总数的11.6%）[1]。非小细胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC）是其中最主要的一类,约占所有肺癌的75–80%[2]。表皮生长因子受体（EGFR,epidermal growth factor receptor）及其信号通路的突变激活是NSCLC最常见的驱动因素。靶向EGFR的小分子酪氨酸激酶受体抑制剂（TKI）在非小细胞肺癌的治疗中取得了非常好的疗效。然而无论前期治疗效果多么显著,大多数病人只能维持半年到一年的有效期,就会产生耐受,使病人获益受限,因此确定EGFR-TKIs对非小细胞肺癌的耐药的具体作用机制,并据此设计相应逆转耐药的策略对NSCLC治疗具有十分重要的意义。目前临床上已根据研究设计了相应的策略用于逆转NSCLC EGFR-TKIs耐药,取得了卓越的疗效,然而再次耐药仍然不可避免,这表明存在其他尚未明确的耐药机制。我们前期研究发现,无论是第一代的EGFR-TKI Gefitinib,还是第三代...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Gefi-RB的合成（A）吉非替尼（90mg，0.2mmol）加入到5ml甲磺酸中搅拌，向溶液中加入甲硫氨酸（49.5mg，0.33mmol）
浙江大学硕士学位论文正文实验结果21减压浓缩，即化合物2。2号化合物溶解在二氯甲烷（20ml）中，逐滴缓慢加入3-溴丙胺氢溴酸盐（219mg，1mmol）和溶于二氯甲烷（2ml）的三乙胺（0.556ml，4mmol）室温搅拌24小时，用有机溶剂萃取，硫酸镁干燥。真空浓缩溶剂。（C）化合物1（43.2mg，0.1mmol）溶于二甲基甲酰胺（DMF5ml）中，添加K2CO3（55.2mg，0.4mmol），在室温下搅拌0.5小时。加入中间体3（84.3mg，0.15mmol）。加热至80℃并搅拌过夜。有机溶剂萃取，硫酸镁干燥。真空浓缩溶剂。（D）Gefi-RB的核磁氢谱图结果。3.2Gefi-RB与溶酶体共定位用罗丹明B标记的Gefi-RB以及溶酶体示踪剂LysoTracker共同处理细胞。发现Gefi-RB（红色）与LysoTracker溶酶体示踪剂（蓝色）呈现明显共定位（图2，A），这表明吉非替尼的确在溶酶体中富集。进一步我们想确认Gefitinib的溶酶体积聚是否与EGFR的功能有关，我们在siRNA敲低EGFR的表达同时再次检测Gefi-RB的定位，结果发现敲低EGFR表达对Gefitinib的溶酶体定位基本没有影响（图2，B）。因此，我们可以得出结论，Gefitinib在溶酶体中发生积聚，且这种聚集很不依赖于EGFR自身内吞现象。图2Gefi-RB与溶酶体共定位
浙江大学硕士学位论文正文实验结果23图3Gefi-2OH的合成（A）向溶于20ml二氯甲烷的3，5-二甲氧基苯甲酰氯（2g，10mmol）溶液中加入三乙胺（1.5ml，15mmol）和3-溴-1-丙醇（1.07ml，5mmol），将混合物在室温搅拌5小时。用水冲洗反应物，干燥（硫酸镁），过滤，得到4号化合物，为无色油状物。将中间体4号化合物（604mg，2mmol）溶于二氯甲烷（10ml）。加入三氯化铝（1333mg，10mmol），再加入碘化钠（150mg，1mmol）。室温搅拌6-12小时，将反应用饱和NH4Cl水溶液（1ml）淬灭，萃取，洗涤并用硫酸镁干燥，过滤并将溶剂在真空下蒸发，得到淡黄色油状的脱甲基产物5。（B）化合物5核磁氢谱图结果。（C）将中间体5（274mg，1mmol）和对甲苯磺酸吡啶鎓（50.2mg，0.2mmol）在室温下于10ml二氯甲烷中搅拌0.5小时，将3,4-二氢-α-吡喃（0.91mL，10mmol）溶解在5ml二氯甲烷中，加入反应体系中。室温搅拌4-6小时，洗涤，干燥，并真空蒸发。得到中间体6，为无色油状物。（D）化合物6核磁氢谱图结果。（E）碱性中和的吉非替尼类似物（Gefi-2OH）的合成：向
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagy and multidrug resistance in cancer[J]. Ying-Jie Li,Yu-He Lei,Nan Yao,Chen-Ran Wang,Nan Hu,Wen-Cai Ye,Dong-Mei Zhang,Zhe-Sheng Chen. Chinese Journal of Cancer. 2017(08)
本文编号：3453483
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Gefi-RB的合成（A）吉非替尼（90mg，0.2mmol）加入到5ml甲磺酸中搅拌，向溶液中加入甲硫氨酸（49.5mg，0.33mmol）
浙江大学硕士学位论文正文实验结果21减压浓缩，即化合物2。2号化合物溶解在二氯甲烷（20ml）中，逐滴缓慢加入3-溴丙胺氢溴酸盐（219mg，1mmol）和溶于二氯甲烷（2ml）的三乙胺（0.556ml，4mmol）室温搅拌24小时，用有机溶剂萃取，硫酸镁干燥。真空浓缩溶剂。（C）化合物1（43.2mg，0.1mmol）溶于二甲基甲酰胺（DMF5ml）中，添加K2CO3（55.2mg，0.4mmol），在室温下搅拌0.5小时。加入中间体3（84.3mg，0.15mmol）。加热至80℃并搅拌过夜。有机溶剂萃取，硫酸镁干燥。真空浓缩溶剂。（D）Gefi-RB的核磁氢谱图结果。3.2Gefi-RB与溶酶体共定位用罗丹明B标记的Gefi-RB以及溶酶体示踪剂LysoTracker共同处理细胞。发现Gefi-RB（红色）与LysoTracker溶酶体示踪剂（蓝色）呈现明显共定位（图2，A），这表明吉非替尼的确在溶酶体中富集。进一步我们想确认Gefitinib的溶酶体积聚是否与EGFR的功能有关，我们在siRNA敲低EGFR的表达同时再次检测Gefi-RB的定位，结果发现敲低EGFR表达对Gefitinib的溶酶体定位基本没有影响（图2，B）。因此，我们可以得出结论，Gefitinib在溶酶体中发生积聚，且这种聚集很不依赖于EGFR自身内吞现象。图2Gefi-RB与溶酶体共定位
浙江大学硕士学位论文正文实验结果23图3Gefi-2OH的合成（A）向溶于20ml二氯甲烷的3，5-二甲氧基苯甲酰氯（2g，10mmol）溶液中加入三乙胺（1.5ml，15mmol）和3-溴-1-丙醇（1.07ml，5mmol），将混合物在室温搅拌5小时。用水冲洗反应物，干燥（硫酸镁），过滤，得到4号化合物，为无色油状物。将中间体4号化合物（604mg，2mmol）溶于二氯甲烷（10ml）。加入三氯化铝（1333mg，10mmol），再加入碘化钠（150mg，1mmol）。室温搅拌6-12小时，将反应用饱和NH4Cl水溶液（1ml）淬灭，萃取，洗涤并用硫酸镁干燥，过滤并将溶剂在真空下蒸发，得到淡黄色油状的脱甲基产物5。（B）化合物5核磁氢谱图结果。（C）将中间体5（274mg，1mmol）和对甲苯磺酸吡啶鎓（50.2mg，0.2mmol）在室温下于10ml二氯甲烷中搅拌0.5小时，将3,4-二氢-α-吡喃（0.91mL，10mmol）溶解在5ml二氯甲烷中，加入反应体系中。室温搅拌4-6小时，洗涤，干燥，并真空蒸发。得到中间体6，为无色油状物。（D）化合物6核磁氢谱图结果。（E）碱性中和的吉非替尼类似物（Gefi-2OH）的合成：向
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagy and multidrug resistance in cancer[J]. Ying-Jie Li,Yu-He Lei,Nan Yao,Chen-Ran Wang,Nan Hu,Wen-Cai Ye,Dong-Mei Zhang,Zhe-Sheng Chen. Chinese Journal of Cancer. 2017(08)
本文编号：3453483
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