趋化因子CCL19调控AKT信号通路促进A549侵袭转移的作用研究

发布时间：2021-10-25 00:27

　　[目的]探索CCL19诱导肺腺癌细胞上皮间质转化及侵袭转移的作用及机制。[方法]（1）实验分组如下:空白对照组（A549细胞）、A549细胞加DMSO组、A549细胞加CCL19组、A549细胞加MK2206组、A549细胞加CCL19和MK2206组。（2）CCK8实验检测不同分组A549细胞增殖能力的变化。（3）模拟失巢性凋亡模型,流式细胞术检测不同分组A549细胞凋亡的变化。（4）划痕实验检测不同分组A549细胞的迁移能力的变化。（5）Transwell实验检测不同分组 A549 细胞侵袭的变化。（6）WB 实验检测 pan-AKT、p-AKT（Thr308）、p-AKT（Ser473）、snail、N-cad及E-cad的蛋白表达情况。（7）免疫组化实验检测不同地区临床肺癌组织中MMP-9及CCL19的表达。（8）GraphPad Prism 6统计软件对数据进行统计学分析。[结果]（1）CCK8实验检测发现CCL19不影响A549细胞的增殖（P>0.05）,加入MK2206后细胞增殖明显受到抑制（P<0.05）。（2）流式细胞术检测发现加入CCL19后A549失巢... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１不同分组对Ａ５４９细胞增殖能力影响的柱状分析图??ＣＣＫ－８实验检测不同分组Ａ５４９细胞增殖能力的变化，两两比较采用配对ｔ??

取对数生长期细胞接种于包被ｐｏｌｙ－ＨＥＭＡ的６孔板中，按分组分别加入??ＤＭＳＯ、ＣＣＬ１９和ＭＫ２２０６，常规培养４８小时后，ｌＯＯＯｒｐｍ离心５ｍｉｎ，收集细??胞，进行流式细胞仪检测。结果显示，加入ＣＣＬ１９后，与对照组相比，细胞凋??亡率降低，差异有统计学意义（Ｐ＜〇．〇５），而加入ＭＫ２２０６后，与对照组相比，??细胞凋亡率未见明显变化，差异没有统计学意义（７＞＞〇．〇５）。结果提示，ＣＣＬ１９??能够抑制细胞的失巢性凋亡，而ＭＫ２２０６不能抑制细胞的失巢性凋亡。??Ａ?Ｂ??

图３不同分组对Ａ５４９细胞失巢性凋亡影响的柱状分ＦＣＭ实验检测不同分组Ａ５４９细胞凋亡状态的变化，两两比验，数据用７表示，每组实验重复三次。??３?ＣＣＬ１９及ＭＫ２２０６对Ａ５４９细胞迁移的影响??接种于６孔板的Ａ５４９细胞按分组分别加入ＤＭＳＯ、ＣＣＬ１９别于划痕换液后、２４ｈ、３６ｈ及４８ｈ拍照，计算迁移面积，结果显相比，加入ＣＣＬ１９后，细胞迁移率明显增加，差异有统计学意义加入ＭＫ２２０６后，细胞迁移率明显降低，差异有统计学意义（Ｐ＜示ＣＣＬ１９能够促进Ａ５４９细胞迁移，而ＭＫ２２０６抑制Ａ５４９细胞〇／ｍ??２４?小时

【参考文献】：
期刊论文
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[3]chemokine/chemokine receptor pair ccL20/ccR6 in human colorectal malignancy:An overview[J]. Vilma Oliveira Frick,Claudia Rubie,Ulrich Keilholz,Pirus Ghadjar.  World Journal of Gastroenterology. 2016(02)
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本文编号：3456296