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miR-16-5p靶向VEGFA抑制HepG2肝癌细胞增殖、侵袭及迁移的研究

发布时间:2021-10-26 06:10
  目的:检测miR-16-5p在原发性肝癌(以下简称“肝癌”)组织样本及细胞中的表达,探索其对肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,并研究相关分子机制。方法:1.通过qRT-PCR检测肝癌组织标本及配对的癌旁组织标本;正常肝细胞及肝癌细胞中miR-16-5p的表达情况。2.采用RTCA系统、Tranwwell小室侵袭实验和细胞划痕实验来检测过表达miR-16-5p后对HepG2人肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。3.使用生物信息学在线数据库预测miR-16-5p下游靶基因并用双荧光素酶报告基因及Western bolt等技术进行验证。4.WB检测过表达miR-16-5p对EMT相关蛋白表达的影响。5.细胞实验检测共同转染VEGFA对miR-16-5p功能的影响。结果:1.与癌旁组织相比,miR-16-5p在肝癌组织中的表达明显降低,差异存在统计学意义(P<0.01);在HepG2、HuH-7人肝癌细胞株中的表达较HL-7702人正常肝细胞株明显降低,差异存在统计学意义(P<0.001);2.上调miR-16-5p的表达后,HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的能力均显著减弱,差异存... 

【文章来源】:皖南医学院安徽省

【文章页数】:69 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

miR-16-5p靶向VEGFA抑制HepG2肝癌细胞增殖、侵袭及迁移的研究


AmiR-16-5p在肝癌组织及癌旁组织中的表达

细胞株,转染,细胞


皖南医学院硕士学位论文24图1BmiR-16-5p在HL-7702、HepG2及Huh-7细胞株中的表达2.HepG2细胞转染miR-16-5p效率检测使用瞬时转染,在HepG2细胞过表达miR-16-5p后用qRT-PCR检测细胞中miR-16-5p表达量,结果如图2所示。与NC组和空白组(Control)相比,转染mimics组中miR-16-5p的表达量显著升高,差异存在统计学意义(p<0.001)。并且可稳定表达72h-96h,可进行后续实验。图2HepG2细胞转染miR-16-5p效率检测

转染,细胞,效率


皖南医学院硕士学位论文24图1BmiR-16-5p在HL-7702、HepG2及Huh-7细胞株中的表达2.HepG2细胞转染miR-16-5p效率检测使用瞬时转染,在HepG2细胞过表达miR-16-5p后用qRT-PCR检测细胞中miR-16-5p表达量,结果如图2所示。与NC组和空白组(Control)相比,转染mimics组中miR-16-5p的表达量显著升高,差异存在统计学意义(p<0.001)。并且可稳定表达72h-96h,可进行后续实验。图2HepG2细胞转染miR-16-5p效率检测

【参考文献】:
期刊论文
[1]肝癌流行现况和趋势分析[J]. 应倩,汪媛.  中国肿瘤. 2020(03)
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[4]2018全球癌症统计报告解读[J]. 王宁,刘硕,杨雷,张希,袁延楠,李慧超,季加孚.  肿瘤综合治疗电子杂志. 2019(01)
[5]miR-429对CRKL表达的靶向调控作用研究[J]. 郭春梅,刘淑清,孙明忠.  大连医科大学学报. 2018(03)
[6]miRNA-138在TGF-β1诱导的乳腺癌上皮间质转化发生中的作用[J]. 梁冰,刘灿,王峰.  郑州大学学报(医学版). 2017(06)
[7]miR-15a-5p和miR-16-5p在骨肉瘤组织中的表达分析[J]. 蔡承魁,田丽颖,韩康,贠喆,马保安.  现代生物医学进展. 2017(20)
[8]原发性肝癌诊疗规范(2017年版)[J]. National Health and Family Planning Commission of the People’s Republic of China;.  临床肝胆病杂志. 2017(08)
[9]MicroRNAs as possible biomarkers for diagnosis and prognosis of hepatitis b- and c-related-hepatocellularcarcinoma[J]. Sirio Fiorino,Maria Letizia Bacchi-Reggiani,Michela Visani,Giorgia Acquaviva,Adele Fornelli,Michele Masetti,Andrea Tura,Fabio Grizzi,Matteo Zanello,Laura Mastrangelo,Raffaele Lombardi,Luca Di Tommaso,Arrigo Bondi,Sergio Sabbatani,Andrea Domanico,Carlo Fabbri,Paolo Leandri,Annalisa Pession,Elio Jovine,Dario de Biase.  World Journal of Gastroenterology. 2016(15)
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博士论文
[1]miR-16-5p在乳腺癌组织中的表达及对细胞生长、侵袭和凋亡的影响[D]. 曲蕴慧.郑州大学 2017

硕士论文
[1]利用实时细胞分析技术检测前列腺与胰腺癌细胞药物敏感性及Trim46基因低表达对胰腺癌细胞Capan-2的增殖和迁移能力的抑制[D]. 靳亚西.北京协和医学院 2017



本文编号:3458984

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