LncRNA AFAP1-AS1通过调控miR-21/PTEN轴影响乳腺癌增殖和迁移的机制研究

发布时间：2021-10-28 19:02

　　目的:寻找乳腺癌的特异性分子标志是乳腺癌诊断和治疗的要点,非编码RNA作为新型靶点,在肿瘤治疗中的作用受到越来越多的关注。通过生物信息学分析寻找乳腺癌的特异性lncRNA标志物,发现AFAP1-AS1和是乳腺癌增殖和迁移的潜在标志物,miR-21是它的潜在靶点。旨在研究AFAP1-AS1对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响,探讨AFAP1-AS1对miR-21是否具有靶向作用,阐明AFAP1-AS1参与乳腺癌进程的机制是否与调控miR-21/PTEN轴有关,以期为乳腺癌治疗寻找新的分子标志和有效靶点。方法:使用生物信息学方法寻找乳腺癌的lncRNA标志物;采用qRT-PCR检测mRNA的水平;Western blot实验检测蛋白的水平;采用LF-2000对乳腺癌细胞进行多种序列的瞬时转染。采用MTT、克隆形成和EdU实验检测乳腺癌细胞的增殖能力;划痕实验、Transwell实验检测乳腺癌细胞的迁移能力。采用RNA pull down实验研究AFAP1-AS1与miR-21的结合;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-21对PTEN的靶向作用。用无胸腺裸鼠构建乳腺癌异种移植瘤模型,研究AFA... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：120 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－２．沉默ＡＦＡＰｌ－ＡＳｌ对乳腺癌细胞增殖的影响??Ａ．?ＭＴＴ实验检测沉默ＡＦＡＰｌ－ＡＳｌ对乳腺癌细胞增殖的影响；Ｂ．克隆形成实验检测沉默??ＡＦＡＰＩ－ＡＳ１?对乳腺癌细胞增殖的影响

?第二章?ＡＦＡＰ１－ＡＳ１通过乾向调节ｍｉＲ－２１影响乳腺癌细胞的增殖和迁移???ＮＣ?ｓｉＲＮＡ－１?ｓｉＲＮＡ－２?ｓｉＲＮＡ－３??■■■■??咖咖ＨＨ??■■■■??ＭＤＡ－ＭＢ－２３１?ＤＡＰＩ?．，二?＜?｜?ｈ＇?，?］??■■■■??ＭＣＦ－７?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１??５０－ｊ?８０－??＾?￣ｒ?３??Ｓ－４０－?Ｍ?？？６０－?＾??Ｉｆ?－?■?．．?＾?ｉｆ?Ｉ??！！２〇－?■丁?．?ｔ?ｉｉ４０．?■?ｔ?，＊??〇？〇?ａ?〇?２〇－??？?＾?１０－?？?〇■??〇Ｊ＿??〇Ｊ＿???ＪＶ?Ｊｂ?ｖＯ?ＪＳ?ＪＶ?Ｊｂ??／?／?／?，，，??图２－３．?ＥｄＵ实验检测沉默ＡＦＡＰｌ－ＡＳｌ对乳腺癌细胞增殖的影响；＊，Ｐ＜０．０５；＊＊，Ｐ＜０．０１：??＊＊＊，?Ｐ＜０．００１〇??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３．?ＥｄＵ?ａｓｓａｙ?ｗａｓ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｄｅｔｅｃｔ?ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＡＦＡＰ１－ＡＳ１?ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ?ｏｎ?ｔｈｅ??ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｂｒｅａｓｔ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ．?＊，?Ｐ＜０．０５；?＊＊，?Ｐ＜０．０１；?＊＊＊，?Ｐ＜０．００１〇??３０??

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本文编号：3463205