多肽N-乙酰氨基半乳糖基转移酶ppGalNAc-T4在结直肠癌发生发展中的功能机制研究
发布时间：2021-11-01 03:39
结直肠癌（colorectal cancer,CRC）是世界范围内的第三大肿瘤,近年其发病率在我国有逐渐上升的趋势。O-糖基化的改变是肿瘤性疾病的特征性事件之一,并与肿瘤的细胞间信号传导、免疫逃避等众多过程相关。多肽N-乙酰氨基半乳糖基转移酶（ppGalNAc-Ts）是催化细胞内黏蛋白型O-糖基化起始的关键酶,在多种肿瘤中均发现了其的异常上调/下调表达。然而,目前我们对O-糖基化及与之相关的糖基转移酶在结直肠癌中的功能机制仍然知之甚少。ppGalNAc-T4是ppGalNAc-Ts的家族成员之一,其在消化道正常粘膜及结直肠癌中均有相对高水平的表达,但其在结直肠癌中的具体功能机制尚未见报道。在本项研究中,我们首先利用结肠癌的ppGalNAc-T4敲低/过表达细胞株对肿瘤行为学等表型进行分析,结果表明,ppGalNAc-T4并不影响肿瘤增殖,但促进细胞的成瘤和集落形成能力;其缺失将导致细胞出现“类EMT样改变”和侵袭迁移能力的增强。反映了ppGalNAc-T4在肿瘤细胞不同生物学行为中多样的功能。随后,我们检测了临床样本中ppGalNAc-T4的表达水平,发现其在结直肠癌疾病进程中呈现“动...
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ppGalNAc-T4在正常组织中的表达情况（RNA水平）
上海交通大学医学院硕士学位论文的 ppGalNAc-T12 在内的其他 ppGalNAc-Ts 均未见表达信号，或表达较弱果表明，本课题所采用的 ppGalNAc-T4 的抗体具有较好的特异性。2.3.2 构建 ppGalNAc-T4 过表达/敲低的稳转细胞株2.3.2.1 各结肠癌细胞系中 ppGalNAc-T4 的表达情况为了研究 ppGalNAc-T4 参与 CRC 疾病进程的具体机制，我们选取了的结肠癌细胞（SW480，SW620，HCT116，RKO，HT29），分别采用 We和 qPCR 的方法检验不同结肠癌细胞株中 ppGalNAc-T4 的表达水平，结ppGalNAc-T4 在 SW480 和 HT29 细胞系中表达较高，而在 SW620、HCT1三株细胞系中表达较低（图 2-4）。由于这 5 株细胞系的增殖、迁移、侵袭近相同，因为我们猜测 ppGalNAc-T4 可能参与调控了结肠癌细胞的行为与A B
29图 2-5: ppGalNAc-T4 敲低效率验证Figure 2-5: ppGalNAc-T4 was knockdown in SW480 and HT29 cell linesA: Western Blot 验证 SW480 中的敲低效率B: Lectin Blot 验证 SW480 敲低细胞系中糖基化水平变化C: Western Blot 验证 HT29 中的敲低效率D: Lectin Blot 验证 HT29 敲低细胞系中糖基化水平变化
【参考文献】：
期刊论文
[1]Prognostic and predictive response factors in colorectal cancer patients:Between hope and reality[J]. Chiara De Divitiis,Guglielmo Nasti,Massimo Montano,Rossella Fisichella,Rosario Vincenzo Iaffaioli,Massimiliano Berretta. World Journal of Gastroenterology. 2014(41)
[2]Genetic and epigenetic biomarkers for diagnosis, prognosis and treatment of colorectal cancer[J]. Fabio Coppedè,Angela Lopomo,Roberto Spisni,Lucia Migliore. World Journal of Gastroenterology. 2014(04)
本文编号：3469451
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ppGalNAc-T4在正常组织中的表达情况（RNA水平）
上海交通大学医学院硕士学位论文的 ppGalNAc-T12 在内的其他 ppGalNAc-Ts 均未见表达信号，或表达较弱果表明，本课题所采用的 ppGalNAc-T4 的抗体具有较好的特异性。2.3.2 构建 ppGalNAc-T4 过表达/敲低的稳转细胞株2.3.2.1 各结肠癌细胞系中 ppGalNAc-T4 的表达情况为了研究 ppGalNAc-T4 参与 CRC 疾病进程的具体机制，我们选取了的结肠癌细胞（SW480，SW620，HCT116，RKO，HT29），分别采用 We和 qPCR 的方法检验不同结肠癌细胞株中 ppGalNAc-T4 的表达水平，结ppGalNAc-T4 在 SW480 和 HT29 细胞系中表达较高，而在 SW620、HCT1三株细胞系中表达较低（图 2-4）。由于这 5 株细胞系的增殖、迁移、侵袭近相同，因为我们猜测 ppGalNAc-T4 可能参与调控了结肠癌细胞的行为与A B
29图 2-5: ppGalNAc-T4 敲低效率验证Figure 2-5: ppGalNAc-T4 was knockdown in SW480 and HT29 cell linesA: Western Blot 验证 SW480 中的敲低效率B: Lectin Blot 验证 SW480 敲低细胞系中糖基化水平变化C: Western Blot 验证 HT29 中的敲低效率D: Lectin Blot 验证 HT29 敲低细胞系中糖基化水平变化
【参考文献】：
期刊论文
[1]Prognostic and predictive response factors in colorectal cancer patients:Between hope and reality[J]. Chiara De Divitiis,Guglielmo Nasti,Massimo Montano,Rossella Fisichella,Rosario Vincenzo Iaffaioli,Massimiliano Berretta. World Journal of Gastroenterology. 2014(41)
[2]Genetic and epigenetic biomarkers for diagnosis, prognosis and treatment of colorectal cancer[J]. Fabio Coppedè,Angela Lopomo,Roberto Spisni,Lucia Migliore. World Journal of Gastroenterology. 2014(04)
本文编号：3469451
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