靶向骨髓基质细胞自噬克服慢性淋巴细胞性白血病细胞对伏立诺他耐药的机制研究
发布时间：2021-11-05 23:28
【目的】体外共培养模拟慢性淋巴系白血病（Chronic lymphocytic leukemia,CLL）骨髓微环境以探讨骨髓基质细胞介导伏立诺他（Vorinostat,Vor）化疗耐药的机制,从而揭示Vor临床治疗CLL病人失败的原因,进而提出克服骨髓微环境导致的CLL化疗耐药,改善CLL病人临床治疗效果的新方案。【方法】体外采用CLL患者外周血新鲜分离的原代细胞与人类骨髓基质细胞系NKtert进行共培养,以此构建细胞共培养体系模拟CLL病人白血病微环境化疗耐药新模型;流式细胞术检测单培养和共培养CLL细胞对化疗药物Vor的药物敏感性;流式细胞术、腺病毒转染技术、Western blot技术检测共培养CLL和NKtert细胞的自噬及线粒体自噬水平;流式细胞术联合体外H2O2检测试剂盒测定共培养CLL和NKtert细胞的活性氧水平;外源性添加H2O2和抗氧化剂探究细胞自噬与高氧化应激态的相关性;体外检测共培养CLL和NKtert细胞的耗氧量、葡萄糖摄取率以及糖酵解相关蛋白的变化以解析细胞自噬与糖酵解...
【文章来源】： 南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：53 页
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
中英文缩略词表
第1章 引言
第2章 材料与方法
2.1 主要试剂
2.2 主要仪器
2.3 研究对象
2.4 细胞计数
2.5 单培养及共培养体系的构建
2.6 细胞存活率的测定
2.7 流式细胞仪测定ROS
2.8 线粒体质量测定
2.9 Western blot分析
2.10 细胞内LC3 分布测定
2.11 O2 水平对CLL细胞存活率的影响
2.12 耗氧率测定
2.13 葡萄糖摄取率测定
2.14 乳酸测定
2.15 β-羟丁酸（酮体）测定
2.16 细胞内ATP含量测定
2.17 siRNA转染
2.18 统计学分析
第3章 结果
3.1 Vor诱导共培养下CLL细胞存活增加
3.2 自噬抑制诱导共培养下CLL细胞存活降低
3.3 共培养下Vor诱导NKtert细胞自噬及线粒体自噬
3.4 Vor诱导CLL细胞内ROS水平升高
3.5 共培养下ROS促进NKtert细胞自噬及线粒体自噬
3.6 共培养下Vor激活NKtert细胞启动糖酵解
3.7 共培养下糖酵解产物辅助CLL细胞存活
3.8 Vor联合自噬抑制改善CLL治疗效果
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
1.前言
2.骨髓微环境促进化疗药物处理后白血病细胞的死亡
3.活性氧同造血及白血病进展的关系
4.靶向自噬克服白血病耐药
5.靶向活性氧克服白血病耐药性
6.活性氧诱导自噬治疗白血病
7.结论与展望
参考文献
【参考文献】：
期刊论文
[1]Role of autophagy in tumorigenesis,metastasis,targeted therapy and drug resistance of hepatocellular carcinoma [J]. Fang Huang,Bing-Rong Wang,Yi-Gang Wang. World Journal of Gastroenterology. 2018(41)
[2]Reactive oxygen species: A double-edged sword in oncogenesis [J]. Jin-Shui Pan, Jian-Lin Ren, Division of Gastroenterology, Zhongshan Hospital Xiamen University, Xiamen 361004, Fujian Province, China; Gastroenterology Institute of Xiamen University, Xiamen 361004, Fujian Province, China; Gastroenterology Center of Xiamen, Xiamen 361004, Fujian Province, China Mei-Zhu Hong, Division of Infectious Diseases, the 174th Hospital of PLA, Xiamen 361003, Fujian Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2009(14)
本文编号：3478713
【文章来源】： 南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：53 页
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
中英文缩略词表
第1章 引言
第2章 材料与方法
2.1 主要试剂
2.2 主要仪器
2.3 研究对象
2.4 细胞计数
2.5 单培养及共培养体系的构建
2.6 细胞存活率的测定
2.7 流式细胞仪测定ROS
2.8 线粒体质量测定
2.9 Western blot分析
2.10 细胞内LC3 分布测定
2.11 O2 水平对CLL细胞存活率的影响
2.12 耗氧率测定
2.13 葡萄糖摄取率测定
2.14 乳酸测定
2.15 β-羟丁酸（酮体）测定
2.16 细胞内ATP含量测定
2.17 siRNA转染
2.18 统计学分析
第3章 结果
3.1 Vor诱导共培养下CLL细胞存活增加
3.2 自噬抑制诱导共培养下CLL细胞存活降低
3.3 共培养下Vor诱导NKtert细胞自噬及线粒体自噬
3.4 Vor诱导CLL细胞内ROS水平升高
3.5 共培养下ROS促进NKtert细胞自噬及线粒体自噬
3.6 共培养下Vor激活NKtert细胞启动糖酵解
3.7 共培养下糖酵解产物辅助CLL细胞存活
3.8 Vor联合自噬抑制改善CLL治疗效果
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
1.前言
2.骨髓微环境促进化疗药物处理后白血病细胞的死亡
3.活性氧同造血及白血病进展的关系
4.靶向自噬克服白血病耐药
5.靶向活性氧克服白血病耐药性
6.活性氧诱导自噬治疗白血病
7.结论与展望
参考文献
【参考文献】：
期刊论文
[1]Role of autophagy in tumorigenesis,metastasis,targeted therapy and drug resistance of hepatocellular carcinoma [J]. Fang Huang,Bing-Rong Wang,Yi-Gang Wang. World Journal of Gastroenterology. 2018(41)
[2]Reactive oxygen species: A double-edged sword in oncogenesis [J]. Jin-Shui Pan, Jian-Lin Ren, Division of Gastroenterology, Zhongshan Hospital Xiamen University, Xiamen 361004, Fujian Province, China; Gastroenterology Institute of Xiamen University, Xiamen 361004, Fujian Province, China; Gastroenterology Center of Xiamen, Xiamen 361004, Fujian Province, China Mei-Zhu Hong, Division of Infectious Diseases, the 174th Hospital of PLA, Xiamen 361003, Fujian Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2009(14)
本文编号：3478713
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3478713.html
