高糖环境通过调控ENO1表达在胃癌细胞上皮-间质转化中的作用研究

发布时间：2021-11-14 23:58

　　目的:越来越多的研究表明,高糖血症与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关。但其在胃癌中的具体机制仍不清楚。本研究旨在探讨高糖环境对胃癌细胞上皮-间质转化（EMT）的影响以及潜在的作用机制。方法:使用来自GEO和TCGA数据库的表达数据检测糖酵解相关酶和EMT相关转录因子的表达情况。利用小分子干扰RNA（si RNA）转染下调胃癌细胞ENO1的表达。免疫组织化学,蛋白质印迹和荧光定量PCR分析用于检测目的基因蛋白质或m RNA水平的表达情况。使用CCK-8,划痕实验以及Transwell实验评估胃癌细胞的增殖,迁移和侵袭能力。结果:高浓度葡萄糖能够增强胃癌细胞的增殖,迁移和侵袭能力。在糖酵解酶相关基因中,ENO1在胃癌组织中表达上调最明显,且与患者不良预后有关。ENO1的表达也随着葡萄糖浓度的增加而上调。此外,下调ENO1表达可以部分逆转高糖对胃癌恶性表型的影响。Snail介导的EMT可以被高糖血症所促进,并受到下调ENO1表达的抑制。TGF-β/Smad信号通路参与了以上过程的调控。结论:高糖血症诱导的ENO1过表达通过TGF-β/Smad信号通路促进胃癌细胞的EMT进程。 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CCK8实验检测不同浓度的葡萄糖培养对胃癌AGSandMGC803细胞增殖能力的影响

202934_at HK2 0.435741 1.92E-01 -0.5911105 201030_x_at LDHB 0.273184 8.04E-02 -0.708974 1553837_at PGAM5 0.060965 4.86E-03 -0.8898033 206603_at GLUT4 0.198491 4.53E-02 -1.3422707 209696_at FBP1 0.018156 4.22E-04 -1.3654888 206844_at FBP2 0.04158 2.29E-03 -4.0148564 204704_s_at ALDOB 0.009369 1.12E-04 -4.5435921

安徽医科大学硕士学位论文243.2.2ENO1在胃癌组织中的表达情况及其与临床病理参数的关系为了明确ENO1在胃癌组织和癌旁正常组织中表达的差异性，我们对121例胃癌组织和30例癌旁正常组织进行了免疫组化染色。结果显示ENO1主要表达在细胞浆中，细胞核也有少量表达。统计分析发现免疫组化结果提示ENO1蛋白在69.4％（84/121）的胃癌组织中高表达，而癌旁正常组织则有86.7％（26/30）显示出低表达（P<0.001）。具有不同表达水平的ENO1的代表性图像和统计分析如图4A和4B所示。临床病理相关性研究的结果显示胃癌组织中ENO1的异常高表达与淋巴结转移（P=0.003）、远处转移（P=0.015）、TNM分期（P<0.001）以及术前血糖水平（P=0.039）显着相关（表2）。Westernblot结果也显示新鲜胃癌组织中的ENO1表达水平明显高于癌旁正常组织（图4C）。图4ENO1在胃癌组织中的表达情况。A.ENO1免疫组化代表性图片（放大倍数200×）；B.免疫组化分析结果；C.Westernblot检测胃癌组织和癌旁正常组织中ENO1的表达。Fig.4TheexpressionofENO1inGCtissues.A.RepresentativeENO1IHCstaininginGCspecimens(200×magnification);B.ThestatisticalanalysisofENO1expressioninGCandadjacentnormaltissues;C.WesternblotanalysisdetectedENO1expressioninGCandadjacentnormaltissues.

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3495615