基于发卡核酸检测microRNA的荧光分析法及其在癌症预警中的应用

发布时间：2021-11-14 23:43

　　MicroRNA（MiRNA）在许多生物学过程中都发挥着重要的作用,被认为是一种有前景的癌症标记物。MiRNA在植物和动物的真核细胞中存在的一类内源性非编码单链RNA。MiRNA参与了人体60%以上的蛋白编码基因的调控,在许多生理过程中起着关键的作用。越来越多的证据表明,miRNA已成为临床早期诊断的一种重要的生物标志物,患者组织和血液中的异常miRNA的表达水平与多种人类疾病如癌症和心血管疾病都密切相关。随着对miRNA这些小分子作用机制的深入研究,将有助于我们更好的理解和克服人类疾病。本论文主要分为以下几部分:1.在指数等温扩增的基础上,设计了一种基于发夹探针快速、灵敏检测miRNA的方法。靶miRNA结合单链DNA模板引发指数等温扩增反应并产生大量和发卡探针1的3?突出末端互补配对的引物。这些引物的功能是不仅能通过催化发夹自组装展开发夹探针产生不同的荧光信号,而且还可以作为引物引发下一个指数等温扩增反应。通过对扩增产物的荧光检测,miRNA的检测限可以低至0.1 zmol。本实验以miR-21作为引物,并根据miR-21设计两种不同的用荧光染料标记的探针,这种基于发夹探针的循环指... 

【文章来源】：济南大学山东省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MiRNA的作用机理[12]

基于发卡核酸检测 microRNA 的荧光分析法及其在癌症预警中的应用1977年由斯坦福大学的JamesAlwine, David Kemp和GeorNorthern-blotting 法的基本原理是在与硝酸纤维素膜结合酸探针之间进行互补杂交，经洗膜显影后对条带进行分lotting 法简单易行、可以测量 RNA 的质量和数量、印迹点也不可忽视，实验耗时耗量、需要标记、灵敏度较低微的序列差异。更重要的是，Northern-blotting 法的问题化学药品如甲醛、放射性物质、溴化乙锭和紫外线的使题以及环境的安全问题[20]。

EXPAR法检测microRNA[29]


本文编号：3495592