miR-26a/26b靶向调控唾液酸糖基转移酶ST8SIA4在乳腺癌增殖及侵袭中的作用
发布时间：2021-11-14 20:05
乳腺癌是女性易发的恶性肿瘤之一,也是造成女性死亡的主要原因。据统计,2012年世界范围内新发病例大约170万,而其中死亡病例就已接近50万[1]。来自中国抗癌协会的统计数字显示,目前我国乳腺癌的发病率以每年3%的速度递增,且呈现年轻化的趋势,而且逐渐成为城市中死亡率增长最快的癌症。因此,为降低乳腺癌患者的死亡率,不仅仅是要早期治疗,更重要的是有效防止其恶性进展。乳腺癌是起源于乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤,原位乳腺癌并不致命,如果能够做到早期发现、早期诊断及早期治疗,乳腺癌或可成为疗效最佳的实体肿瘤之一。但乳腺癌的早期症状往往并不明显,这就使很多患者错失最佳治疗时机,乳腺癌细胞一旦脱离原发病灶,极易通过血液或淋巴液进行播散,形成远处转移,严重影响乳腺癌患者的生存质量和生存率。糖链与细胞膜的蛋白质、脂质相连,几乎覆盖细胞膜的整个外表面[2],它决定了细胞的“面部特征”。唾液酸化修饰是以单磷酸胞苷活化的唾液酸（CMP-Neu5Ac）为底物,经唾液酸糖基转移酶（sialyltransferase,ST）催化,将底物中的唾液酸残基（Neu5Ac）转移到细胞膜糖蛋白或糖脂末端的过程。唾液酸残基（Neu...
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：98 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
1.实验材料
1.1 实验对象
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
2. 实验方法
2.1 细胞培养
2.2 膜蛋白提取和N-糖链的制备
2.3 质谱仪检测甲基化的N-糖链
2.4 慢病毒制备及转染
2.5 RNA提取和实时荧光定量PCR分析(qRT-PCR)
2.6 蛋白提取和免疫印迹分析
2.7 CCK-8 细胞增殖实验
2.8 划痕试验
2.9 细胞侵袭实验
2.10 免疫荧光实验
2.11 裸鼠体内成瘤实验
2.12 免疫组织化学
2.13 双荧光素酶实验
2.14 统计学分析
第一部分 质谱分析乳腺癌组织和细胞株表面N-糖链的组成差异
结果
1.乳腺癌组织和癌旁组织膜蛋白N-糖链的组成
2.乳腺癌细胞株及正常乳腺上皮细胞膜蛋白N-糖链的组成
讨论
结论
第二部分 实时荧光定量PCR检测组织和细胞株唾液酸糖基转移酶(ST) 基因mRNA的表达及ST8SIA4在组织和细胞株中蛋白的表达
结果
1. 唾液酸糖基转移酶（ST）基因在乳腺癌和癌旁组织中的表达
2. 唾液酸糖基转移酶（ST）基因在乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MCF-7 及正常乳腺上皮细胞株MCF-10A中的表达
3. ST8SIA4在乳腺癌组织及细胞株中的表达
讨论
结论
第三部分 特异性下调MDA-MB-231 细胞中的ST8SIA4的表达，观察其对乳腺癌细胞体外的增殖和侵袭能力、体内成瘤性的影响
结果
1. ST8SIA4的表达调控对乳腺癌MDA-MB-231 细胞体外增殖和侵袭能力的影响
2. ST8SIA4的表达调控对乳腺癌MDA-MB-231 细胞体内成瘤性的影响
讨论
结论
第四部分 mi R-26a和miR-26b对ST8SIA4的靶向调控作用
结果
1. miR26a和miR26b在乳腺癌组织及细胞株中的表达
2.miR-26a和miR-26b的表达调控介导ST8SIA4表达
3. ST8SIA4为miR-26a和miR-26b的靶基因
讨论
结论
第五部分 mi R-26a/b靶向调控ST8SIA4的表达对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响
结果
1. miR-26a/26b靶向调控ST8SIA4的表达对MDA-MB-231 细胞增殖和侵袭能力的影响
2. miR-26a/26b靶向调控ST8SIA4的表达对MCF-7 细胞增殖和侵袭能力的影响
讨论
结论
全文讨论
全文结论
参考文献
综述
参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]TRAIL分子靶点在肺癌治疗中的研究及应用[J]. 刘乾,马玲娣,王勇. 中国肺癌杂志. 2009(03)
[2]细胞膜表面糖链结构与肿瘤转移的关系[J]. 丁怡甜,邢艳丽,辛现良,耿美玉. 现代生物医学进展. 2007(06)
[3]Correlation of glycosyltransferases mRNA expression in extrahepatic bile duct carcinoma with clinical pathological characteristics[J]. Xiao-Ling Jin, Shu-Sen Zheng, Bing-Sheng Wang and Hui-Li Chen Nanjing, China Department of General Surgery, Nanjing First Hospi- tal Affiliated to Nanjing Medical University, Nanjing 210006, China ; Department of Hepatobiliary Surgery, First Affiliated Hospital, Zhe- jiang University School of Medicine, Hangzhou 310003, China ; Department of General Surgery, Zhongshan Hospital, Fudan Universi- ty, Shanghai 200032 , China; and Key Laboratory of Glycocon- jugate Research, Ministry of Health, Department of Biochemistry, Fudan University School of Medicine, Shanghai 200032, China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2004(02)
博士论文
[1]ST3GAL家族和ST6GALNAC家族在人慢性粒细胞白血病多药耐药性中的作用[D]. 李岩.大连医科大学 2015
硕士论文
[1]miR-224-3p靶向调控岩藻糖基转移酶FUT4在乳腺癌多药耐药中的研究[D]. 冯晓斌.大连医科大学 2016
本文编号：3495273
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：98 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
1.实验材料
1.1 实验对象
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器
2. 实验方法
2.1 细胞培养
2.2 膜蛋白提取和N-糖链的制备
2.3 质谱仪检测甲基化的N-糖链
2.4 慢病毒制备及转染
2.5 RNA提取和实时荧光定量PCR分析(qRT-PCR)
2.6 蛋白提取和免疫印迹分析
2.7 CCK-8 细胞增殖实验
2.8 划痕试验
2.9 细胞侵袭实验
2.10 免疫荧光实验
2.11 裸鼠体内成瘤实验
2.12 免疫组织化学
2.13 双荧光素酶实验
2.14 统计学分析
第一部分 质谱分析乳腺癌组织和细胞株表面N-糖链的组成差异
结果
1.乳腺癌组织和癌旁组织膜蛋白N-糖链的组成
2.乳腺癌细胞株及正常乳腺上皮细胞膜蛋白N-糖链的组成
讨论
结论
第二部分 实时荧光定量PCR检测组织和细胞株唾液酸糖基转移酶(ST) 基因mRNA的表达及ST8SIA4在组织和细胞株中蛋白的表达
结果
1. 唾液酸糖基转移酶（ST）基因在乳腺癌和癌旁组织中的表达
2. 唾液酸糖基转移酶（ST）基因在乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MCF-7 及正常乳腺上皮细胞株MCF-10A中的表达
3. ST8SIA4在乳腺癌组织及细胞株中的表达
讨论
结论
第三部分 特异性下调MDA-MB-231 细胞中的ST8SIA4的表达，观察其对乳腺癌细胞体外的增殖和侵袭能力、体内成瘤性的影响
结果
1. ST8SIA4的表达调控对乳腺癌MDA-MB-231 细胞体外增殖和侵袭能力的影响
2. ST8SIA4的表达调控对乳腺癌MDA-MB-231 细胞体内成瘤性的影响
讨论
结论
第四部分 mi R-26a和miR-26b对ST8SIA4的靶向调控作用
结果
1. miR26a和miR26b在乳腺癌组织及细胞株中的表达
2.miR-26a和miR-26b的表达调控介导ST8SIA4表达
3. ST8SIA4为miR-26a和miR-26b的靶基因
讨论
结论
第五部分 mi R-26a/b靶向调控ST8SIA4的表达对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响
结果
1. miR-26a/26b靶向调控ST8SIA4的表达对MDA-MB-231 细胞增殖和侵袭能力的影响
2. miR-26a/26b靶向调控ST8SIA4的表达对MCF-7 细胞增殖和侵袭能力的影响
讨论
结论
全文讨论
全文结论
参考文献
综述
参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]TRAIL分子靶点在肺癌治疗中的研究及应用[J]. 刘乾,马玲娣,王勇. 中国肺癌杂志. 2009(03)
[2]细胞膜表面糖链结构与肿瘤转移的关系[J]. 丁怡甜,邢艳丽,辛现良,耿美玉. 现代生物医学进展. 2007(06)
[3]Correlation of glycosyltransferases mRNA expression in extrahepatic bile duct carcinoma with clinical pathological characteristics[J]. Xiao-Ling Jin, Shu-Sen Zheng, Bing-Sheng Wang and Hui-Li Chen Nanjing, China Department of General Surgery, Nanjing First Hospi- tal Affiliated to Nanjing Medical University, Nanjing 210006, China ; Department of Hepatobiliary Surgery, First Affiliated Hospital, Zhe- jiang University School of Medicine, Hangzhou 310003, China ; Department of General Surgery, Zhongshan Hospital, Fudan Universi- ty, Shanghai 200032 , China; and Key Laboratory of Glycocon- jugate Research, Ministry of Health, Department of Biochemistry, Fudan University School of Medicine, Shanghai 200032, China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2004(02)
博士论文
[1]ST3GAL家族和ST6GALNAC家族在人慢性粒细胞白血病多药耐药性中的作用[D]. 李岩.大连医科大学 2015
硕士论文
[1]miR-224-3p靶向调控岩藻糖基转移酶FUT4在乳腺癌多药耐药中的研究[D]. 冯晓斌.大连医科大学 2016
本文编号：3495273
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