miR-143在结肠癌组织中的差异表达及其对结肠癌细胞凋亡和迁移的影响

发布时间：2021-11-17 08:53

　　目的·研究微小RNA-143（miR-143）在人结肠癌及癌周正常组织中的表达,探索其对结肠癌HCT116、RKO细胞功能的影响及下游靶基因的预测。方法·设计合成并构建miR-143慢病毒表达载体,稳定转染人结肠癌HCT116、RKO细胞。实时荧光定量PCR检测人结肠癌、癌周正常组织、慢病毒感染后HCT116和RKO细胞中miR-143的表达。Annexin V-APC单染法及流式细胞仪检测感染前后细胞凋亡能力。Transwell法检测感染前后HCT116、RKO细胞迁移能力的改变。Western blotting方法检测FOSL2蛋白的表达。结果·miR-143在结肠癌组织中的表达量显著低于癌周正常组织（0.339±0.454 vs 1.003±0.003）（U=16.000,Z=-4.231,P=0.000）。上调miR-143后,HCT116细胞凋亡率显著高于阴性对照组（P=0.000）,RKO细胞凋亡率显著高于阴性对照组（P=0.000）。上调miR-143后,HCT116迁移细胞数显著低于阴性对照组（P=0.000）。miR-143下调后,RKO迁移细胞数显著高于阴性对照组（... 

【文章来源】：上海交通大学学报(医学版). 2017,37(03)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 标本和细胞
    1.2 主要试剂和仪器
    1.3 慢病毒载体构建与包装
        1.3.1 mi R-143上调慢病毒载体构建
        1.3.2 mi R-143下调慢病毒载体构建
    1.4 细胞培养和细胞感染
    1.5总RNA抽提
        1.4.1 收取样品及TRIzol裂解
        1.4.2 抽提总RNA
    1.6 反转录和实时荧光定量PCR
    1.7 细胞凋亡检测
    1.8 Transwell迁移实验
    1.9 Western blotting检测HCT116细胞中FOSL2蛋白表达
    1.1 0 统计学分析
2 结果
    2.1 组织及细胞中mi R-143表达量
        2.1.1 组织中mi R-143表达
        2.1.2 病毒感染后HCT116、RKO细胞中mi R-143表达
    2.2 上调mi R-143对肠癌细胞凋亡的影响
    2.3 mi R-143对结肠癌细胞迁移的影响
    2.4 mi R-143对FOSL2蛋白的作用
3 讨论



本文编号：3500575