二甲双胍预处理对顺铂诱导人卵巢颗粒细胞损伤的保护机制研究
发布时间：2021-11-17 14:32
目的:观察二甲双胍是否可以减轻顺铂导致的颗粒细胞损伤,探讨二甲双胍在顺铂导致颗粒细胞损伤中的保护作用及其可能机制。方法:1. 颗粒细胞培养及鉴定:选取卵巢功能正常因男方因素或输卵管因素行体外受精-胚胎移植的患者,取卵时留取卵泡液,离心分离出颗粒细胞。将颗粒细胞用含15%胎牛血清的DMEM/F12培养基置于培养箱中培养。采用免疫细胞化学法鉴定人卵巢颗粒细胞FSHR的表达。2.在体外人卵巢颗粒细胞培养体系中,加入不同浓度顺铂（2.5μg/m L、5μg/m L、10μg/m L、20μg/m L）作用24小时后通过CCK8检测方法筛选出最佳损伤浓度。分别采用不同浓度二甲双胍（1m M、2m M、5m M、10 m M、20 m M）预先保护2小时后,加入终筛选出的最佳损伤浓度顺铂作用24小时后,通过CCK8检测方法筛选二甲双胍的最佳保护浓度。3.实验共分为3组,分别为对照组:正常培养基培养24小时。实验组:含1 m M二甲双胍培养基预先处理2小时,加入终浓度10μg/m L顺铂继续培养24小时。模型组:含10μg/m L顺铂的培养基培养24小时,4.采用化学发光法测定三组颗粒细胞上清液雌二...
【文章来源】：河北医科大学河北省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人卵巢颗粒细胞24小时培养(×200)
图 1 人卵巢颗粒细胞 24 小时培养(×200) Fig.1 Morphology of human ovarian granulosa cells cultured for 24 hours .Magnification×200
252.免疫细胞化学法鉴定：图3,4结果显示：细胞核成蓝色，胞浆成棕褐色着色，FSHR阳性率高于90%。结果提示：实验分离培养细胞为人卵巢颗粒细胞。图3人卵巢颗粒细胞阴性对照(×400)Fig.3NegativecontrolofHumanovariangranulosacells(×400)图4人卵巢颗粒细胞FSHR免疫化学染色(×200)Fig.4ImmunocytochemistryfordetectionFSHRofHumanovariangranulosacells.Magnification×2003.顺铂浓度筛选：图5结果显示：不同浓度顺铂（2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL）处理24小时后颗粒细胞抑制率分别为（16.30±1.47）%、（25.50±11.53）%、（36.89±1.68）%、（52.92±1.22）%；差异有统计学意义（P<0.05）。在给药时间相同时，随着顺铂浓度增加细胞抑制率也升高，且呈剂量依赖性。选择细胞抑制率小于50%且最接近50%的浓度为10μg/mL为损伤最适浓度。
【参考文献】：
期刊论文
[1]二仙汤抗化疗性卵巢早衰氧化应激的效应观察[J]. 饶晨晨,高文雅,陶仕英,崔丽霞,石丹宁,牛建昭,赵丕文,孙丽萍,王燕霞. 湖南中医药大学学报. 2019(05)
[2]人胎盘间充质干细胞移植对化疗所致卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响[J]. 侯巧妮,马会明,相丽,何艳桃,徐仙,陈冬梅,张雪玉. 山东大学学报(医学版). 2019(02)
[3]间充质干细胞来源外泌体在氧化应激损伤中的研究进展[J]. 翟骁,王一然,朱明向,王奇金. 第二军医大学学报. 2018(07)
[4]子宫内膜异位症相关不孕诊治指南解读[J]. 张琬琳,王晓红. 实用妇产科杂志. 2018(05)
[5]重视多囊卵巢综合征患者的生活方式调整[J]. 王笑臣,杨菁. 中华妇产科杂志. 2018 (01)
[6]多囊卵巢综合征辅助生殖治疗策略的优化[J]. 魏代敏,潘烨,石玉华. 中华妇产科杂志. 2018 (01)
[7]多囊卵巢综合征中国诊疗指南[J]. Endocrinology Subgroup and Expert Panel, Chinese Society of Obstetrics and Gyneocology, Chinese Medical Association;. 中华妇产科杂志. 2018 (01)
[8]早发性卵巢功能不全的临床诊疗中国专家共识[J]. 陈子江,田秦杰,乔杰,刘嘉茵,杨冬梓,黄荷凤,梁晓燕,秦莹莹,伍琼芳,杨晓葵,肖红梅,陈士岭,姚元庆,徐丛剑,曹云霞,张以文,庄广伦,陈贵安,林金芳,李尚为,朱桂金,章晓梅,华克勤,阮祥燕,吴洁,郁琦,孙赟. 中华妇产科杂志. 2017 (09)
[9]化疗药物卵巢毒性的研究进展[J]. 张婷,贺婉红,俸灵林. 中国药理学与毒理学杂志. 2016(08)
[10]化疗药物致卵巢损伤的表型分析及可能机制[J]. 吕晓丹,李莹,张璐,王学芹,马旭,夏红飞. 生殖医学杂志. 2016(06)
硕士论文
[1]活性氧荧光探针的设计、合成及生物成像应用研究[D]. 张楠.济南大学 2019
[2]荧光染料的功能调控及其生物成像应用[D]. 王彩霞.河南师范大学 2018
[3]基于PI3K/AKT信号通路探讨左归丸含药血清对顺铂所致的人卵巢颗粒细胞损伤的保护机制研究[D]. 杨静.暨南大学 2017
本文编号：3501114
【文章来源】：河北医科大学河北省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人卵巢颗粒细胞24小时培养(×200)
图 1 人卵巢颗粒细胞 24 小时培养(×200) Fig.1 Morphology of human ovarian granulosa cells cultured for 24 hours .Magnification×200
252.免疫细胞化学法鉴定：图3,4结果显示：细胞核成蓝色，胞浆成棕褐色着色，FSHR阳性率高于90%。结果提示：实验分离培养细胞为人卵巢颗粒细胞。图3人卵巢颗粒细胞阴性对照(×400)Fig.3NegativecontrolofHumanovariangranulosacells(×400)图4人卵巢颗粒细胞FSHR免疫化学染色(×200)Fig.4ImmunocytochemistryfordetectionFSHRofHumanovariangranulosacells.Magnification×2003.顺铂浓度筛选：图5结果显示：不同浓度顺铂（2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL）处理24小时后颗粒细胞抑制率分别为（16.30±1.47）%、（25.50±11.53）%、（36.89±1.68）%、（52.92±1.22）%；差异有统计学意义（P<0.05）。在给药时间相同时，随着顺铂浓度增加细胞抑制率也升高，且呈剂量依赖性。选择细胞抑制率小于50%且最接近50%的浓度为10μg/mL为损伤最适浓度。
【参考文献】：
期刊论文
[1]二仙汤抗化疗性卵巢早衰氧化应激的效应观察[J]. 饶晨晨,高文雅,陶仕英,崔丽霞,石丹宁,牛建昭,赵丕文,孙丽萍,王燕霞. 湖南中医药大学学报. 2019(05)
[2]人胎盘间充质干细胞移植对化疗所致卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响[J]. 侯巧妮,马会明,相丽,何艳桃,徐仙,陈冬梅,张雪玉. 山东大学学报(医学版). 2019(02)
[3]间充质干细胞来源外泌体在氧化应激损伤中的研究进展[J]. 翟骁,王一然,朱明向,王奇金. 第二军医大学学报. 2018(07)
[4]子宫内膜异位症相关不孕诊治指南解读[J]. 张琬琳,王晓红. 实用妇产科杂志. 2018(05)
[5]重视多囊卵巢综合征患者的生活方式调整[J]. 王笑臣,杨菁. 中华妇产科杂志. 2018 (01)
[6]多囊卵巢综合征辅助生殖治疗策略的优化[J]. 魏代敏,潘烨,石玉华. 中华妇产科杂志. 2018 (01)
[7]多囊卵巢综合征中国诊疗指南[J]. Endocrinology Subgroup and Expert Panel, Chinese Society of Obstetrics and Gyneocology, Chinese Medical Association;. 中华妇产科杂志. 2018 (01)
[8]早发性卵巢功能不全的临床诊疗中国专家共识[J]. 陈子江,田秦杰,乔杰,刘嘉茵,杨冬梓,黄荷凤,梁晓燕,秦莹莹,伍琼芳,杨晓葵,肖红梅,陈士岭,姚元庆,徐丛剑,曹云霞,张以文,庄广伦,陈贵安,林金芳,李尚为,朱桂金,章晓梅,华克勤,阮祥燕,吴洁,郁琦,孙赟. 中华妇产科杂志. 2017 (09)
[9]化疗药物卵巢毒性的研究进展[J]. 张婷,贺婉红,俸灵林. 中国药理学与毒理学杂志. 2016(08)
[10]化疗药物致卵巢损伤的表型分析及可能机制[J]. 吕晓丹,李莹,张璐,王学芹,马旭,夏红飞. 生殖医学杂志. 2016(06)
硕士论文
[1]活性氧荧光探针的设计、合成及生物成像应用研究[D]. 张楠.济南大学 2019
[2]荧光染料的功能调控及其生物成像应用[D]. 王彩霞.河南师范大学 2018
[3]基于PI3K/AKT信号通路探讨左归丸含药血清对顺铂所致的人卵巢颗粒细胞损伤的保护机制研究[D]. 杨静.暨南大学 2017
本文编号：3501114
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