hUC-MSC-EVs对乳腺癌细胞生物学特性影响的研究

发布时间：2021-11-17 22:01

　　目的:乳腺癌是我国女性中最常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率均处于女性恶性肿瘤的首位,严重危害女性的生命健康。随着医学技术的发展,目前临床上乳腺癌的治疗方法主要包括外科手术治疗、放化疗、内分泌治疗等,虽然在乳腺癌疾病的早期诊断和治疗措施方面得以改善,但未能降低乳腺癌的死亡率。因此,探讨如何提高对乳腺癌的治疗水平具有重要的临床意义。目前,随着间质干细胞（Mesenchymal Stem Cells,MSCs）在肿瘤治疗中的潜在价值得到了越来越多研究者的关注,现研究表明MSCs可通过其分泌体参与肿瘤进展和肿瘤微环境的调节。胞外囊泡（Extracellular Vesicles,EVs）是由多种类型的细胞分泌的膜性纳米囊泡,在生理和病理条件下都能介导细胞间的通讯。然而,关于它们相互作用的潜在机制和功能,仍然存在许多未解之谜。本研究旨在探讨人脐带间质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）来源的EVs（hUCMSC-EVs）对人乳腺癌细胞增殖、迁移的影响及机制研究。方法:（1）从医院取来新鲜的脐带组织,采用组织块贴壁法分离... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
中英文注释表
第一章 绪论
    1.1. 概述
    1.2. 间质干细胞生物学特性
    1.3. 间质干细胞在肿瘤微环境中的促肿瘤作用
    1.4. 间质干细胞的抗肿瘤作用
    1.5. 胞外囊泡
    1.6. 间质干细来源的胞外囊泡
    1.7. 胞外囊泡与肿瘤
    1.8. 胞外囊泡应用
第二章 研究目的、方法、方案及意义
    2.1 研究目的
    2.2 研究方法和内容
    2.3 研究意义
第三章 间质干细胞分离培养以及EVS的提取与鉴定
    3.1. 试剂材料与仪器
        3.1.1. 标本来源及细胞
        3.1.2. 所有试剂和材料
        3.1.3. 主要实验仪器
    3.2. 相关溶液的配制
        3.2.1 PBS 的配制(1000 ml)
        3.2.2 L-DMEM培养液(1000 ml)
        3.2.3 0.25% 胰酶的配制(1000 ml)
        3.2.4 冻存液的配制(10 ml)
        3.2.5 4% 多聚甲醛的配制
        3.2.6 Western-blot相关溶液的配制
    3.3. 实验方法
        3.3.1. hUC-MSCs分离培养及传代
        3.3.2. 细胞的冻存与复苏
        3.3.3. hUC-MSCs表面标记鉴定
        3.3.4. hUC-MSCs多向分化潜能鉴定
        3.3.5. hUC-MSCs来源EVs的分离和纯化
        3.3.6. hUC-MSC-EVs扫描电镜检测
        3.3.7. hUC-MSC-EVs透射电镜检测
        3.3.8. hUC-MSC-EVs表面标记鉴定
        3.3.9. hUC-MSC-EVs粒径测定
        3.3.10. Western blot
    3.4. 实验结果
        3.4.1. 细胞分离培养和鉴定
        3.4.2. 细胞多向分化潜能鉴定
        3.4.3. 细胞表面标记鉴定
        3.4.4. hUC-MSC-EVs形态学特征
        3.4.5. 粒径分析仪检测hUC-MSC-EVs大小
        3.4.6. 流式细胞术检测hUC-MSC-EVs表面标记
        3.4.7. Western blot检测hUC-MSC-EVs标志蛋白
    3.5. 讨论
第四章 HUC-MSC-EVS对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响
    4.1. 试剂材料与仪器
        4.1.1. 标本来源及细胞
        4.1.2. 所有试剂和材料
        4.1.3. 主要实验仪器
    4.2. 相关溶液的配制
        4.2.1. H-DMEM培养液(1000 ml)
        4.2.2. MTT的配制
    4.3. 实验方法
        4.3.1. hUC-MSC-EVs内化实验
        4.3.2. MTT
        4.3.3. 平板克隆
        4.3.4. 划痕实验
        4.3.5. Transwell
        4.3.6. Transwell侵袭实验
        4.3.7. Western blot
        4.3.8. 统计学分析
    4.4. 实验结果
        4.4.1. hUC-MSC-EVs内化实验
        4.4.2. hUC-MSC-EVs对乳腺癌细胞增殖的影响
        4.4.3. hUC-MSC-EVs对乳腺癌细胞迁移的影响
        4.4.4. hUC-MSC-EVs对乳腺癌细胞侵袭的影响
        4.4.5. hUC-MSC-EVs对乳腺癌细胞相关蛋白的影响
    4.5. 讨论
第五章 HUC-MSC-EVS对乳腺癌细胞增殖和迁移的机制研究
    5.1. 试剂材料与仪器
        5.1.1. 标本来源及细胞
        5.1.2. 所有试剂和材料
        5.1.3. 主要实验仪器
    5.2. 相关溶液的配制
    5.3. 实验方法
        5.3.1. 统计学分析
    5.4. 实验结果
        5.4.1. hUC-MSC-EVs对U0126处理后的乳腺癌细胞增殖的影响
        5.4.2. hUC-MSC-EVs对U0126处理后的乳腺癌细胞迁移的影响
        5.4.3. hUC-MSC-EVs对U0126处理后的乳腺癌细胞侵袭的影响
        5.4.4. hUC-MSC-EVs对U0126处理后的乳腺癌细胞相关蛋白的影响
    5.5. 讨论
第六章 主要结论与展望
    6.1. 主要结论
    6.2. 展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文、获奖及参加会议
    一、发表论文情况
    二、获奖情况
    三、参加会议情况


【参考文献】：
期刊论文
[1]MAGI1 inhibits migration and invasion via blocking MAPK/ERK signaling pathway in gastric cancer[J]. Shuqin Jia,Jiajia Lu,Tingting Qu,Yi Feng,Xiaohong Wang,Caixia Liu,Jiafu Ji.  Chinese Journal of Cancer Research. 2017(01)



本文编号：3501711