氧化应激条件下肺癌细胞中S100A16核转位促进核糖体生成的研究

发布时间：2021-11-18 05:23

　　目的:肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。根据病理分型,肺癌可分为非小细胞肺癌（NSCLC）和小细胞肺癌（SCLC）。肺癌的发生与吸烟、职业暴露、空气污染及肺部感染性疾病有关,但确切的机制尚不明确。因此,了解肺癌的发病机制对于疾病的早期诊断具有重要意义。研究表明在肺癌发生发展过程中,肺癌细胞对于氧化应激呈现出“两面性”,一方面在肺癌发生的早期,氧化应激可以诱导肺癌的发生,促进细胞的增殖;另一方面在肺癌的进展期,肺癌细胞则表现出很强的抗氧化应激能力,进而抵抗细胞凋亡及对化疗药物产生耐药性。因此探讨肺癌细胞对氧化应激刺激的抵抗效应有助于了解肺癌的恶性进程以及对放化疗抵抗的机制。前期工作中发现,肺癌细胞高表达S100家族蛋白——S100A16,且与肺癌细胞转移入脑后的生存活力相关。S100家族蛋白是应激蛋白,有文献报道其参与急性及慢性炎症应激反应,而且与诸多肿瘤的发生、发展密切相关。作为S100家族的一员,有关S100A16的研究是有限的,有研究表明,在乳腺癌细胞中,S100A16可以上调Notch1,ZEB1,ZEB2的表达,诱导乳腺癌细胞发生上皮细胞间质化改变,促进乳腺癌的侵袭和转移... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同肿瘤细胞株中S100A16表达水平检测

中国医科大学硕士学位论文15图3.2细胞在正常以及氧化刺激时S100A16蛋白的表达水平3.3过氧化氢刺激作用下S100A16在肺癌细胞内分布的改变前述实验表明H2O2处理后的A549细胞和NCI-H446细胞内S100A16的表达水平明显增高，提示其为应激反应蛋白。随后，我们利用免疫荧光的方法在激光共聚焦显微镜下观察S100A16在细胞内分布的情况。如图3.3结果显示，给予H2O2处理的A549细胞内S100A16由细胞质内弥散分布转变为向细胞核内富集，并呈现核仁区分布的现象。为进一步验证前述现象，我们采用了细胞不同组分分离的方法，分离纯化了H2O2处理前后的A549细胞及NCI-H446细胞的不同组分，即细胞质及细胞核组分，利用westernblot的方法分析不同组分中S100A16的表达情况，图3.3（2）结果表明，给予H2O2处理后，肺癌细胞内的S100A16在细胞质中的水平减少，而在细胞核组分中含量增加，同免疫荧光的实验结果呈现一致性。图3.3（1）H2O2刺激后免疫荧光观察S100A16在肺癌细胞内分布情况图为A549细胞转染了pEGFP-N1质粒和pEGFP-N1/S100A16质粒后72小时给与H2O2刺激，于激光共聚焦显微镜下观察S100A16分布情况。

中国医科大学硕士学位论文15图3.2细胞在正常以及氧化刺激时S100A16蛋白的表达水平3.3过氧化氢刺激作用下S100A16在肺癌细胞内分布的改变前述实验表明H2O2处理后的A549细胞和NCI-H446细胞内S100A16的表达水平明显增高，提示其为应激反应蛋白。随后，我们利用免疫荧光的方法在激光共聚焦显微镜下观察S100A16在细胞内分布的情况。如图3.3结果显示，给予H2O2处理的A549细胞内S100A16由细胞质内弥散分布转变为向细胞核内富集，并呈现核仁区分布的现象。为进一步验证前述现象，我们采用了细胞不同组分分离的方法，分离纯化了H2O2处理前后的A549细胞及NCI-H446细胞的不同组分，即细胞质及细胞核组分，利用westernblot的方法分析不同组分中S100A16的表达情况，图3.3（2）结果表明，给予H2O2处理后，肺癌细胞内的S100A16在细胞质中的水平减少，而在细胞核组分中含量增加，同免疫荧光的实验结果呈现一致性。图3.3（1）H2O2刺激后免疫荧光观察S100A16在肺癌细胞内分布情况图为A549细胞转染了pEGFP-N1质粒和pEGFP-N1/S100A16质粒后72小时给与H2O2刺激，于激光共聚焦显微镜下观察S100A16分布情况。


本文编号：3502293