MicroRNA-301b-3p通过抑制转录辅助因子退变样蛋白4促进肝细胞癌生长的机制研究

发布时间：2021-11-21 16:56

　　MicroRNA（miRNA）是人类肝细胞癌（HCC）肿瘤生长和转移的关键调节因子。越来越多的证据表明,miR-301b-3p在各种类型的人类癌症中起着驱动器的作用。然而,miR-301b-3p的表达模式及其功能作用以及在肝癌中的潜在分子机制仍然知之甚少。我们的研究发现,与邻近的非肿瘤组织相比,HCC组织中的miR-301b-3p表达显著上调。临床相关性分析显示,高水平的miR-301b-3p与肿瘤大小和晚期肿瘤淋巴结转移阶段密切相关。重要的是,高水平的miR-301b-3p预测肝癌患者的整体生存率显著下降。敲低miR-301b-3p抑制细胞增殖,导致细胞周期停滞在G2/M期,并诱导Huh7和Hep3B细胞凋亡。此外,敲低miR-301b-3p抑制了小鼠肝癌的生长。从机制上讲,miR-301b-3p直接与转录辅助因子退变样蛋白4（VGLL4）的3’UTR结合并对其表达负调控。在肝癌组织中,VGLL4 mRNA的低表达与miR-301b-3p水平呈负相关。值得注意的是,敲低VGLL4显著抑制细胞增殖,导致G2/M期停滞并促进HCC细胞凋亡。因此,敲低VGLL4可以挽救miR-301b-3... 

【文章来源】：蚌埠医学院安徽省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

通过qRT-PCR在HCC组织（n=80）和相邻的非肿瘤组织（n=80）之间检测到

致癌作用。接下来，miR-301b-3p 在 Huh7 和 Hep3B 细胞中均被其抑制剂敲低（P<0.05，图 2A）。CCk-8 和细胞克隆形成试验表明，敲低 miR-301b-3p 明显降低了 HCC 细胞的增殖（P<0.05，图 2B 和 C）。此外，流式细胞仪检测表明，miR-301b-3p 的敲低显著的增加了凋亡的 Huh7 和 Hep3B 细胞的百分比（P<0.05，图 2D）。细胞周期分布分析表明，在 Huh7 和 Hep3B 细胞中，miR-301b-3p 的敲低导致细胞周期停滞在 G2/M 期（P<0.05，图 2E）。因此，miR-301b-3p 通过调节细胞增殖、细胞周期进程和细胞凋亡在肝癌中发挥致癌作用。 图 2: mi R‐301b‐3p 敲低抑制肝细胞癌（HCC）细胞增殖，导致 G2/M 期阻滞并诱导凋亡。

图 2A:将 mi R‐301b‐3p 抑制剂或阴性对照（NC）转导到 Huh7 和 Hep3B 细胞中，并进行 q RT‐PCR 检测 mi R‐301b‐3p 的表达。通过 t 检验，* P ＜0.05。图 2B：CCK-8 实验表明，mi R-301b-3p 敲低抑制了 HCC 细胞的增殖。通过 ANOVA 或 t 检验， * P <0.05 。

【参考文献】：
期刊论文
[1]DNA methylation,microRNAs,and their crosstalk as potential biomarkers in hepatocellular carcinoma[J]. Sumadi Lukman Anwar,Ulrich Lehmann.  World Journal of Gastroenterology. 2014(24)



本文编号：3509884