当前位置:主页 > 医学论文 > 肿瘤论文 >

肺癌中E3泛素连接酶TRIM7促进NF-κB通路中p65蛋白降解的功能研究

发布时间:2021-11-24 20:27
  第一部分 肺癌中E3泛素连接酶TRIM7促进p65蛋白降解的功能研究trim 7(tripartite motif-containing 7)基因编码了 GNIP1,GNIP2,GNIP3 和TRIM7等至少4个亚型的蛋白质。其中,氨基酸序列最长的亚型GNIP1已经被报道在肺癌中发挥着原癌基因的作用。TRIM7是现在已知四个亚型中氨基酸序列最短的蛋白,其在羧基端(C末端)有15个碱基与GNIP1不同。然而有趣的是,我们的研究显示TRIM7在肺癌中的功能与GNIP1截然相反。与癌旁组织相比,TRIM7在肺癌组织中是低表达的,且与肺癌的临床分级负相关。此外,肿瘤异种移植实验也证实TRIM7能够抑制小鼠皮下肿瘤的生长。在细胞中,TRIM7能够显著地抑制肺癌细胞系的增殖和迁移,同时促进癌细胞的凋亡。进一步研究发现,TRIM7能与NF-κB信号通路中的p65蛋白相互作用并泛素化修饰p65蛋白,通过TRIM7羧基末端的15个氨基酸与p65蛋白相互结合并添加泛素分子,导致p65蛋白经泛素化依赖性的26S蛋白酶体降解,最终抑制NF-κB信号通路的转导。这些研究结果揭示了一个新的由TRIM7参与的NF-... 

【文章来源】:南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】:117 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

肺癌中E3泛素连接酶TRIM7促进NF-κB通路中p65蛋白降解的功能研究


图2.?1?TRIM7在部分非小细胞肺癌细胞系中低表达??A、图示描述人类GNIP1和TRIM7蛋白的结构

非小细胞肺癌,病人,蛋白,肺癌


?第一部分第2章TR1M7在肺癌中呈现低表达???胞肺癌中TRIM7蛋白的表达情况,我们使用非小细胞肺癌组织芯片,通过免疫??组化的方法检测了?82例非小细胞肺癌病人癌组织及癌旁组织中TRIM7蛋白的表??达。通过统计分析,我们发现TRIM7表达水平有随着非小细胞肺癌临床分期等??级提高而降低的趋势(图2.2BO,同时有62对组织的癌组织中TRIM7表达水??平低于癌旁组织(图2.2D)。这说明TRJM7蛋白水平在非小细胞肺癌中是低表??达的。??A?1#?2#?3#?4#??八?,?、?, ̄、?, ̄、?Z^、??、T?N?T?N?JT^?N?T??TKIM7^|^?p*?"7*?f:'::?Si?11??P?八c“n?*?111111?mmmm?w?rnmmm?mmmm?mmm??P-Actin?^一?::一^丨丨一??NT?NT?NT?NT??^^^^??5#?6#?7#?8#??B?Stage?I?Stage?II?Stage?111??Tumor?tissue??;"?!yix?'_L?.?_?.?*?.??*?????-?八.《?.?■?.??■w?丨'??Adjacent???(i?.?.?.?'?\:-?,??normal?tissue?:?,?;.?I?'?■?^?'????.-v.::..人??C?…?D??l?200]?^?'? ̄T"?■?Stage?I?〇?|15??I?1叫?f?.?iif]?Silagllll?1||?丨|||??ijlio(111?PFilli

细胞,非小细胞肺癌,过表达,划痕


第一部分第3章影响非小细胞肺癌细胞的增殖、凋亡、周期以及迁移等表型??解细胞提取RNA反转录生成cDNA,用于实时定量PCR检测CDC25C、CCND1、CCNE1??和XIAP等凋亡和周期相关基因的表达。D、NQ-H1299细胞分别转染pCMV6空载质粒、??tGFP-TRIM7质粒。48小时后,裂解细胞提取总蛋白通过蛋白免疫印迹检测凋亡(左图)和??周期(右图)相关蛋白的表达。??3.?4.?3过表达TRIM7影响非小细胞肺癌细胞迁移??我们将10cm培养皿中的NCI-H1299细胞接种至6孔板,使贴壁后细胞密度??至70%-80%。然后用PCMV64GFP-TRJM7质粒转染细胞,24小时细胞密度达??到90%-100%后进行划痕。之后分别在0、12、24小时对同一位置用显微镜拍照。??我们发现,与对照组相比,过表达TRIM7后细胞“伤痕”的愈合速度明显变慢(图??3.3A)。结果统计如图3.3B所示。这表明过表达TRIM7显著地抑制了?NCI-H1299??细胞的迁移能力。??A?Oh?12?h?24?h??Vector??TRIM7??B??CD?100l?w?.??c?■?Vector??i?80-?■?TRIM7??0)??X:??"D?60 ̄??爹?A??s?2〇-?■?_??12h?24h??图3.?3过表达TRIM7影响非小细胞肺癌细胞迁移??A、细胞划痕实验。NCI-H1299细胞分别转染pCMV6空载质粒、tGFP-TRIM7质粒。24-48??小时,待细胞密度达到90%-100%进厅划痕操作。PBS洗去悬浮细胞后加入含1%FBS的培??24??


本文编号:3516697

资料下载
论文发表

本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3516697.html


Copyright(c)文论论文网All Rights Reserved | 网站地图 |

版权申明:资料由用户57041***提供,本站仅收录摘要或目录,作者需要删除请E-mail邮箱bigeng88@qq.com