Reversine通过诱导细胞凋亡和多倍体形成抑制人肝癌细胞HepG2的生长

发布时间：2021-11-27 04:17

　　肝癌对人类健康危害严重,发病率和病死率高,我国是肝癌的高发区,肝癌相关死亡率居全球前列。肝癌早期缺乏典型临床症状,多数患者起病时即为肝癌中晚期,失去了外科手术治疗的机会。而外科手术以外的介入、放疗及生物治疗等疗效不甚理想,且肝癌恶性程度高易复发和转移,中晚期肝癌的治疗仍是世界难题,因此,开发有效药物治疗具有重要意义。人工合成的小分子嘌呤类似物reversine在包括人前列腺癌、甲状腺癌、乳腺癌、非小细胞肺癌及人尿路上皮细胞肿瘤等中均被证实具有抗肿瘤作用,并且reversine被证实是ATP竞争性Aurora激酶抑制剂。通过对文献回顾所知目前reversine对肝癌的研究还未见系统报导,在本研究中,拟探讨了 reversine对人肝癌细胞HepG2生长的影响作用及其相关机制,为寻找新的肝细胞癌治疗靶点提供理论依据。本课题探讨了 reversine对人肝癌细胞HepG2增殖、克隆形成、细胞凋亡和细胞DNA含量的影响。人肝癌细胞HepG2细胞株经不同浓度reversine（0.1μM-1.6μM）处理后,应用MTS法检测其对细胞的增殖能力的影响;采用克隆形成实验评估reversine作用于人... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【图文】：

图２：?Ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ可以抑制人肝癌细胞ＨｅｐＧ２的增殖

ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ?（Ｏ．ｌｐＭ、０＿２ｐＭ、０．４｛ｉＭ、０．８｜ｉＭ、ｌ＿６ｎＭ）处理人肝癌细胞?ＨｅｐＧ２，??以ＤＭＳ？作为对照。处理１－２周后，于倒置相差显微镜下观察，当细胞形成适??当大小的克隆时，用结晶紫染色并计算细胞克隆数目，结果如图３。与对照组??（ＤＭＳＯ）相比，ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ处理组的肝癌细胞的克隆数目及大小均显著减小??（Ｐ＜０．０５），且较高浓度（０．２－１．６ｇＭ）处理的肝癌细胞几乎不能形成肉眼可见的??２５??

我们使用ＤＡＰＩ对细胞核进行染色后于荧光显微镜下发现，经ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ??处理后的细胞出现多核现象，且多核细胞的数量与给药浓度呈正相关关系，结果??如图４。??—??■■■??图４：?Ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ处理ＨｅｐＧ２细胞后，ＨｅｐＧ２细胞出现多核现象。??Ｆｉｇ．４：?Ａｆｔｅｒ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ?ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ，ｔｈｅ?ＨｅｐＧ２?ｂｅｃａｍｅ?ｍｕｌｔｉｎｕｃｌｅｓ．??随后，我们采用ＰＩ对细胞核内ＤＮＡ进行染色标记，利用流式细胞术分别对??处理组及对照组细胞进行ＤＮＡ含量检测，用ＣｅｌｌＱｕｅｓｔ?Ｐｒｏ软件分析所有细胞中??处于二倍体（２Ｎ），四倍体（４Ｎ）和＾八倍体（８Ｎ）的细胞百分数，结果如图５。??Ｒｅｖｅｒｓｉｎｅ?处理细胞?４ｇｈ?后，实验组（Ｏ．ｌｕＭ、０＿２｜ａＭ、０＿４ｐＭ、０．８ｐＭ、丨．６＿１）??２Ｎ?细胞百分比分别为?６６．１７％、５８．６５％、４２．７４％、３１．１４％、１６．７７％，对照组为??６９．３５％。４Ｎ?细胞百分比分别为?２７．１５％、３０．１７％、３２＿７１％、３４．４０％、２９．６７％


本文编号：3521547