SSAT通过AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭

发布时间：2021-12-28 05:34

　　实验背景:肝癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是全世界范围内与癌症相关的最常见的死亡原因之一。通常情况下,肝癌患者早期没有明显症状,被诊断时多已发展到晚期阶段,已不适合手术治疗。因此,晚期肝癌治疗方法的选择受到了极大的限制。此外,由于术后复发率及转移率较高,肝癌患者的五年存活率仍然不能令人满意。因此,认识肝癌转移的作用机制对肝癌的治疗具有非常重要的指导意义。多胺是一类在哺乳动物细胞中含量丰富,参与细胞生长、分化等生理过程且发挥关键作用的生物小分子,包括腐胺（Putrescine,PUT）,亚精胺（Spermidine,SPD）,以及精胺（Spermine,SPM）。已有大量文献表明肿瘤的发生发展与多胺的含量具有相关性。因此,多胺是一个十分有潜力的抗肿瘤靶点。精胺/亚精胺N¹-乙酰转移酶（Spermidine/spermine N¹-acetyltransferase,SSAT）是真核细胞中多胺分解代谢的限速酶,是维持多胺浓度平衡的关键酶。但是目前SSAT在肝癌中具体的生物学功能及作用机制仍然不清楚。实验目的:以3种... 

【文章来源】：河南大学河南省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
第二章 试剂和仪器
    2.1 一般试剂及材料
        2.1.1 细胞培养所需试剂
        2.1.2 细菌培养试剂
        2.1.3 Western blotting主要试剂
        2.1.4 高效液相色谱法主要试剂
        2.1.5 其他主要试剂及材料
    2.2 细胞株
    2.3 质粒与siRNA
    2.4 菌株
    2.5 试剂及溶液的配制
        2.5.1 细菌培养主要试剂
        2.5.2 细胞培养主要试剂
        2.5.3 HPLC所用试剂的配制
        2.5.4 Western blotting所用试剂的配制
    2.6 主要仪器
第三章 实验方法
    3.1 细胞株的培养
    3.2 质粒、DNA的转化及提取
    3.3 细胞转染实验
    3.4 MTT法测定细胞生长曲线
    3.5 细胞克隆形成实验
    3.6 伤口愈合实验
    3.7 细胞迁移实验
    3.8 细胞侵袭实验
    3.9 多胺含量的测定
    3.10 蛋白的提取及浓度测定
    3.11 SDS-PAGE具体步骤
    3.12 统计学分析
第四章 实验结果
    4.1 SSAT高表达以及敲减肝癌细胞株的构建
    4.2 SSAT调控肝癌细胞中多胺含量
    4.3 SSAT调控肝癌细胞的增殖和克隆能力
    4.4 SSAT调控肝癌细胞的迁移和侵袭
    4.5 AKT通路参与SSAT对肝癌细胞的调控
    4.6 β-catenin通路参与SSAT对肝癌细胞的调控
    4.7 SSAT通过多胺含量降低调节AKT/GSK-3β/β-catenin活性
    4.8 SSAT通过AKT/GSK-3β/β-catenin通路调控肝癌细胞
结论
讨论
参考文献
附录
致谢



本文编号：3553503