卡铂通过PVR诱导非小细胞肺癌细胞PD-L1表达的机制研究
发布时间:2021-12-31 04:46
研究背景及目的:肺癌是我国发病率和死亡率较高的疾病,其中约85%为非小细胞肺癌(non-small cell Lung cancer,NSCLC)。以铂类为基础的联合化疗是目前临床应用最为广泛的化疗方案,然而长期使用铂类药物常出现耳毒性、肾毒性等副作用及耐药反应,严重影响患者的生活质量及治疗效果。最近研究表明,化疗药物的使用可能通过重塑肿瘤微环境中免疫细胞组成、改变肿瘤细胞自身免疫分子如PD-L1的表达等途径抑制肿瘤免疫应答,从而导致肿瘤免疫逃逸。因此,铂类化疗药物是否会通过诱导肺癌肿瘤免疫抑制从而限制自身的抗肿瘤作用,是临床上值得关注的问题。目前铂类药物对于NSCLC细胞PD-L1表达影响的相关研究尚少,其内在的调控机制仍不清楚。本文拟研究卡铂对NSCLC细胞PD-L1表达的影响及其关键调控机制,从而为肿瘤细胞PD-L1表达调控提供新思路,为铂类药物参与肿瘤免疫逃逸提供新证据,并为铂类药物化疗与免疫疗法联用提供支持依据。研究内容和方法:体外培养人源非小细胞肺癌细胞系H292细胞、A549细胞和H1299细胞,采用实时荧光定量PCR、Western blotting、细胞免疫荧光及流式...
【文章来源】:南方医科大学广东省
【文章页数】:84 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1-2卡铂以浓度依赖性方式上调NSCLC细胞中PD-Ll?mRNA的表达水平??(A)?H292细胞分别在含0?nM,?10?pM.?20?nM,?30?nM.?40?hM.?50?nM卡钼的培养基中培养48??小时,(B)?A549?细胞和(C)?H1299?细胞分别在含?0?nM,?25jiM,?50?nM.?75^M,?lOOfiM,?150?nM??
?硕士学位论文???independent?experiments,?*?P<0.05,?**?P<0.01,?***?P<0.005?versus?control?group?by?one-way??analysis?of?variance?analysis.??A?PD-L1?DAPI?Merge??咖■■■??一?■■■??B??H292?cell??;2.51?*??g:2.0-??cl??11,0:?_??n?■??i?〇,LBI_??Control?S0(iM?CBP??图1-S卡销上调H292细胞PD-L1蛋白表达??(A-B)?H292细胞经过5()?fiM卡钴刺激48小时,利用免疫荧光显微镜检测细胞内PD-L1??的定位。PD-L1被抗体标记为红色荧光,细胞核经DAPI染色为蓝色。AOD代表平均光密??度。*P<0.05,**P<0.01,***P<0.0()5经单样本T检验分析后与对照组相比.差异具有统计??学意义。??Figure.1-5?Carboplatin?uprcgulatcd?the?expression?of?PD-L1?protein?in?H292?cells??(A-B)?H292?cell?were?treated?with?50?(,iM?carboplatin?for?48h.?intracellular?location?of?PD-L1?were??31??
?项士学位论文???B??II292?cell??C???2?100n??K??^?80-???.??60-?_??j::l?m? ̄??^?Control?CBP(50uM)??图1-6卡怕刺激NSCLC细胞PD-L1可抑制T细胞增殖??(A-B)H292细胞经5〇nM卡铂刺激48小时后继续与T细胞共培养72小时。采用流式细胞??术检测T细胞的增殖能力。*p<?0.05,**?p<?0.01,***?p<?0.005采用独立样本t检验,与对??照组比较,差异具有统计学意义。??Figure.?1-6?Carboplatin?stimulation?of?NSCLC?cells?PD-L1?inhibited?T?cell?proliferation??(A-B)?H292?cells?were?treated?with?50|iM?carboplatin?for?48h?prior?to?co-cultured?with?T?cells?for??72h.?The?proliferation?capacity?of?T?cells?was?detected?by?flow?cytometry.?*?P<0.05;?**?P<0.01?;??***?p<〇?qq5?versus?control?group?by?independent?sample?T-test.??1.3.4?EGFR、PI3K/AKT及ERK等信号通路参与卡铂上调NSCLC细胞PD-??L1蛋白表达??1.3.4.1卡铂可激活H292细胞EGFR、PI3K/AKT及ERK等信号通路??研宄表明,多种信号通路可参与PD-LI
本文编号:3559640
【文章来源】:南方医科大学广东省
【文章页数】:84 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1-2卡铂以浓度依赖性方式上调NSCLC细胞中PD-Ll?mRNA的表达水平??(A)?H292细胞分别在含0?nM,?10?pM.?20?nM,?30?nM.?40?hM.?50?nM卡钼的培养基中培养48??小时,(B)?A549?细胞和(C)?H1299?细胞分别在含?0?nM,?25jiM,?50?nM.?75^M,?lOOfiM,?150?nM??
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