DTX3L对多发性骨髓瘤细胞增殖，粘附和耐药的影响

发布时间：2022-01-01 23:02

　　目的揭示DTX3L在多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）细胞粘附过程中的作用机制,并探索DTX3L在MM细胞对蛋白酶体抑制剂（Proteasome inhibitor,PI）硼替佐米（Bortezomib,Bort）的耐药过程中发挥的作用。为提高多发性骨髓瘤治疗疗效、改善预后方面提供新的理论依据。方法1.使用无血清培养液养多发性骨髓瘤细胞72h后,换用含血清培养液培养骨髓瘤细胞48h。细胞增殖过程中,蛋白免疫印迹检测DTX3L,增殖相关蛋白PCNA,CDK2及细胞周期蛋白cyclinE的表达。同时,通过流式检测细胞周期的改变。2.在骨髓瘤细胞中干扰DTX3L的表达,Western Blot检测增殖相关蛋白PCNA,CDK2及细胞周期蛋白cyclinE的表达,CCK-8检测细胞活力,流式检测细胞周期的分布。3.将骨髓瘤细胞RPMI 8226和NCI-H929与骨髓基质细胞HS-5或者纤连蛋白（Fibronection,FN）共培养构建粘附模型。Western Blot检测DTX3L在骨髓瘤细胞悬浮及黏附两种状态下的表达情况;在骨髓瘤细胞中干扰DTX3L的表达,钙黄绿素实... 

【文章来源】：南通大学江苏省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

DTX3L在多发性骨髓瘤细胞增殖过程中的表达

南通大学硕士学位论文3.1.2 多发性骨髓瘤细胞增殖过程中细胞周期的改变为了进一步验证DTX3L是否参与骨髓瘤细胞增殖的过程，通过对上述图1中的各个时间点的细胞进行细胞流式周期检测，分析多发性骨髓瘤细胞增殖过程中细胞周期的改变。如图2所示，RPMI 8226细胞用RPMI 1640培养液培养72h后，导致细胞在G1期阻滞。用完全培养液培养骨髓瘤细胞后，细胞从G1期重新进入S期。G1期的减少及S期的增加与图1中PCNA，CDK2及cyclinE表达的改变相一致。结合图1与图2的实验结果，DTX3L在促进MM细胞增殖中起重要作用。

DTX3L 被干扰后细胞活力的变化，同时用 Western Blot 检测增殖相关蛋白PCNA，CDK2 及 cyclinE 表达的改变。如图 4 所示，干扰 DTX3L 的表达后，细胞活力显著降低，并且增殖相关蛋白 PCNA，CDK2 及 cyclinE 表达也明显降低。上述实验结果表明，干扰 DTX3L 的表达能抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖。

【参考文献】：
博士论文
[1]抑制蛋白酶体干扰骨髓瘤细胞未折迭蛋白反应与自噬[D]. 高瑛.第四军医大学 2009



本文编号：3562994